實驗實驗11植物的植物的組織組織培養(yǎng)培養(yǎng)部分部分:淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)實驗11植物的組織培養(yǎng)部分:淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)1實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)2.嘗試植物激素的應(yīng)用嘗試植物激素的應(yīng)用實驗?zāi)康?1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)2 通過必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大通過必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？有沒有不用種子來培育植物的方法呢？組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖營養(yǎng)繁殖扦插扦插嫁接嫁接壓條壓條 通過必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植3扦插扦插嫁接嫁接壓條壓條 扦插嫁接壓條 4組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基花瓣或花粉等，在無菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。根發(fā)芽。一、組織培養(yǎng)概述一、組織培養(yǎng)概述1.概念概念組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花52、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個體的能力。胞形成完整個體的能力。3.植物組織培養(yǎng)的基本過程植物組織培養(yǎng)的基本過程:離體離體的植物的植物器官、組織、器官、組織、細(xì)胞細(xì)胞脫分化脫分化愈愈傷傷組組織織再分化再分化根根芽芽植植物物體體2、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的6植物組織培養(yǎng)過程示意圖植物組織培養(yǎng)過程示意圖 2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？沒有進(jìn)行沒有進(jìn)行滅菌滅菌處理，試管也沒有做密封等。處理，試管也沒有做密封等。植物組織培養(yǎng)過程示意圖 2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完74.植物組織培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)條件 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時光照等。、適時光照等。生長素生長素/細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素高高 利于根和愈傷組織的形成利于根和愈傷組織的形成適中適中 有利于根芽的分化有利于根芽的分化低低 有利于芽的形成有利于芽的形成4.植物組織培養(yǎng)條件 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定8二、菊花的組織培養(yǎng)二、菊花的組織培養(yǎng)(一一)設(shè)備及用品設(shè)備及用品1.100ml三角瓶或大口培養(yǎng)瓶三角瓶或大口培養(yǎng)瓶 2.鑷子鑷子 3.超凈臺超凈臺 4.滅滅菌鍋菌鍋 5.封口膜和橡皮圈封口膜和橡皮圈 6.有棉球的廣口瓶有棉球的廣口瓶 7.酒精燈酒精燈 8.三角漏斗三角漏斗 9.培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿(二二)材料材料1.MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基(用于配置發(fā)芽和生根培養(yǎng)基用于配置發(fā)芽和生根培養(yǎng)基)2.奈乙酸用少量奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解溶液溶解,芐基腺嘌呤用芐基腺嘌呤用少量少量0.1mol/LHCL溶解溶解3.發(fā)芽培養(yǎng)基發(fā)芽培養(yǎng)基(滅菌滅菌)4.生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基(滅菌滅菌)二、菊花的組織培養(yǎng)(一)設(shè)備及用品1.100ml三角瓶或9(三三)步驟步驟1.取外植體取外植體超凈臺上將無菌幼苗切段超凈臺上將無菌幼苗切段,每段至少每段至少1張葉片張葉片2.生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)基中生芽培養(yǎng)基中,放入放入1-3段切段段切段(莖部插入培養(yǎng)基莖部插入培養(yǎng)基,蓋上蓋上封口膜封口膜.日光燈下保持日光燈下保持1825的溫度培養(yǎng)的溫度培養(yǎng),每天光照每天光照不少于不少于14.5h3.生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)23周后周后,將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng).4.適應(yīng)鍛煉適應(yīng)鍛煉將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持用玻璃罩或塑料布保持80以上的濕度以上的濕度,23天后打開減低濕度進(jìn)行鍛煉天后打開減低濕度進(jìn)行鍛煉,直直到將罩全部打開處于自然濕度下為止到將罩全部打開處于自然濕度下為止(三)步驟1.取外植體超凈臺上將無菌幼苗切段,每段至少1張葉105.定植定植將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)6.自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)方法自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)方法:70乙醇乙醇中浸中浸泡泡10分鐘分鐘5次次氯酸鈉氯酸鈉溶液中溶液中浸泡浸泡5min5次次氯酸鈉氯酸鈉溶液中溶液中浸泡浸泡5min5次次氯酸鈉氯酸鈉溶液中溶液中浸泡浸泡5min超凈超凈臺上臺上用無用無菌水菌水清洗清洗將莖將莖移至移至生芽生芽培養(yǎng)培養(yǎng)基中基中5.定植將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)6.自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)方法:11植物的組織培養(yǎng)PPT課件12課后題課后題:1.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實驗相同的生長素和細(xì)胞分裂素濃度？驗相同的生長素和細(xì)胞分裂素濃度？2.本實驗用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激本實驗用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為什么？素，為什么？不可相同不可相同天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，所以使用天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，所以使用時間短，而人工合成的，沒有分解酶，作用時時間短，而人工合成的，沒有分解酶，作用時間長，效果顯著。間長，效果顯著。課后題:1.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實133.如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng)如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng),你認(rèn)為應(yīng)采取什你認(rèn)為應(yīng)采取什么措施保證樣本不被污染么措施保證樣本不被污染?（1）操作環(huán)境清潔（）操作環(huán)境清潔（2）植物樣本的潔凈（）植物樣本的潔凈（3）操作）操作敏捷迅速敏捷迅速3.如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng),你認(rèn)為應(yīng)采取什么措施14 脫分化：脫分化：將來自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植將來自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復(fù)細(xì)胞的分物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。裂活性。再分化再分化:經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的能力?？捎修D(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的能力。愈傷組織愈傷組織 脫分化：將來自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑151、外植體帶菌、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔、環(huán)境不清潔污染途徑污染途徑1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶16污染的預(yù)防措施污染的預(yù)防措施（一）防止外植體帶菌（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程（三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔污染的預(yù)防措施（一）防止外植體帶菌17MS固體培養(yǎng)基成分及比例固體培養(yǎng)基成分及比例MS固體培養(yǎng)基成分及比例181、快樂總和寬厚的人相伴，財富總與誠信的人相伴，聰明總與高尚的人相伴，魅力總與幽默的人相伴，健康總與闊達(dá)的人相伴。2、人生就有許多這樣的奇跡，看似比登天還難的事，有時輕而易舉就可以做到，其中的差別就在于非凡的信念。3、影響我們?nèi)松慕^不僅僅是環(huán)境，其實是心態(tài)在控制個人的行動和思想。同時，心態(tài)也決定了一個人的視野和成就，甚至一生。4、無論你覺得自己多么了不起，也永遠(yuǎn)有人比更強(qiáng);無論你覺得自己多么不幸，永遠(yuǎn)有人比你更不幸。5、也許有些路好走是條捷徑，也許有些路可以讓你風(fēng)光無限，也許有些路安穩(wěn)又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我會覺得，那些路不是自己想要的。6、在別人肆意說你的時候，問問自己，到底怕不怕，輸不輸?shù)钠?。不必害怕，不要后退，不須猶豫，難過的時候就一個人去看看這世界。多問問自己，你是不是已經(jīng)為了夢想而竭盡全力了?7、人往往有時候為了爭奪名利，有時驅(qū)車去爭，有時驅(qū)馬去奪，想方設(shè)法，不遺余力。壓力挑戰(zhàn)，這一切消極的東西都是我進(jìn)取成功的催化劑。8、真想干總會有辦法，不想干總會有理由;面對困難，智者想盡千方百計，愚者說盡千言萬語;老實人不一定可靠，但可靠的必定是老實人;時間，抓起來是黃金，抓不起來是流水。9、成功的道路上，肯定會有失敗;對于失敗，我們要正確地看待和對待，不怕失敗者，則必成功;怕失敗者，則一無是處，會更失敗。1、快樂總和寬厚的人相伴，財富總與誠信的人相伴，聰明總與高尚的人相伴，魅力總與幽默的人相伴，健康總與闊達(dá)的人相伴。2、人生就有許多這樣的奇跡，看似比登天還難的事，有時輕而易舉就可以做到，其中的差別就在于非凡的信念。3、影響我們?nèi)松慕^不僅僅是環(huán)境，其實是心態(tài)在控制個人的行動和思想。同時，心態(tài)也決定了一個人的視野和成就，甚至一生。4、無論你覺得自己多么了不起，也永遠(yuǎn)有人比更強(qiáng);無論你覺得自己多么不幸，永遠(yuǎn)有人比你更不幸。5、也許有些路好走是條捷徑，也許有些路可以讓你風(fēng)光無限，也許有些路安穩(wěn)又有后路，可是那些路的主角，都不是我。至少我會覺得，那些路不是自己想要的。6、在別人肆意說你的時候，問問自己，到底怕不怕，輸不輸?shù)钠?。不必害怕，不要后退，不須猶豫，難過的時候就一個人去看看這世界。多問問自己，你是不是已經(jīng)為了夢想而竭盡全力了?7、人往往有時候為了爭奪名利，有時驅(qū)車去爭，有時驅(qū)馬去奪，想方設(shè)法，不遺余力。壓力挑戰(zhàn)，這一切消極的東西都是我進(jìn)取成功的催化劑。8、真想干總會有辦法，不想干總會有理由;面對困難，智者想盡千方百計，愚者說盡千言萬語;老實人不一定可靠，但可靠的必定是老實人;時間，抓起來是黃金，抓不起來是流水。14、成長是一場和自己的比賽，不要擔(dān)心別人會做得比你好，你只需要每天都做得比前一天好就可以了。15、最終你相信什么就能成為什么。因為世界上最可怕的二個詞，一個叫執(zhí)著，一個叫認(rèn)真，認(rèn)真的人改變自己，執(zhí)著的人改變命運。只要在路上，就沒有到不了的地方。16、你若堅持，定會發(fā)光，時間是所向披靡的武器，它能集腋成裘，也能聚沙成塔，將人生的不可能都變成可能。17、人生，就要活得漂亮，走得鏗鏘。自己不奮斗，終歸是擺設(shè)。無論你是誰，寧可做拼搏的失敗者9、成功的道路上，肯定會有失敗;對于失敗，我們要正確地看待和對待，不怕失敗者，則必成功;怕失敗者，則一無是處，會更5、別著急要結(jié)果，先問自己夠不夠格，付出要配得上結(jié)果，工夫到位了，結(jié)果自然就出來了。6、你沒那么多觀眾，別那么累。做一個簡單的人，踏實而務(wù)實。不沉溺幻想，更不庸人自擾。7、別人對你好，你要爭氣，圖日后有能力有所報答，別人對你不好，你更要爭氣望有朝一日，能夠揚眉吐氣。8、奮斗的路上，時間總是過得很快，目前的困難和麻煩是很多，但是只要不忘初心，腳踏實地一步一步的朝著目標(biāo)前進(jìn)，最后的結(jié)局交給時間來定奪。9、運氣是努力的附屬品。沒有經(jīng)過實力的原始積累，給你運氣你也抓不住。上天給予每個人的都一樣，但每個人的準(zhǔn)備卻不一樣。不要羨慕那些總能撞大運的人，你必須很努力，才能遇上好運氣。10、你的假裝努力，欺騙的只有你自己，永遠(yuǎn)不要用戰(zhàn)術(shù)上的勤奮，來掩飾戰(zhàn)略上的懶惰。11、時間只是過客，自己才是主人，人生的路無需苛求，只要你邁步，路就在你的腳下延伸，只要你揚帆，便會有八面來風(fēng)，啟程了，人的生命才真正開始。12、不管做什么都不要急于回報，因為播種和收獲不在同一個季節(jié)，中間隔著的一段時間，我們叫它為堅持。失敗。11、學(xué)會學(xué)習(xí)的人，是非常幸福的人。米南德12、你們要學(xué)習(xí)思考，然后再來寫作。布瓦羅13、在尋求真理的長河中，唯有學(xué)習(xí)，不斷地學(xué)習(xí)，勤奮地學(xué)習(xí)，有創(chuàng)造性地學(xué)習(xí)，才能越重山跨峻嶺。華羅庚14、許多年輕人在學(xué)習(xí)音樂時學(xué)會了愛。萊杰15、學(xué)習(xí)是勞動，是充滿思想的勞動。烏申斯基16、我們一定要給自己提出這樣的任務(wù)：第一，學(xué)習(xí)，第二是學(xué)習(xí)，第三還是學(xué)習(xí)。列寧17、學(xué)習(xí)的敵人是自己的滿足，要認(rèn)真學(xué)習(xí)一點東西，必須從不自滿開始。對自己，“學(xué)而不厭”，對人家，“誨人不倦”，我們應(yīng)取這種態(tài)度。毛澤東18、只要愿意學(xué)習(xí)，就一定能夠?qū)W會。列寧19、如果學(xué)生在學(xué)校里學(xué)習(xí)的結(jié)果是使自己什么也不會創(chuàng)造，那他的一生永遠(yuǎn)是模仿和抄襲。列夫托爾斯泰20、對所學(xué)知識內(nèi)容的興趣可能成為學(xué)習(xí)動機(jī)。贊科夫21、游手好閑地學(xué)習(xí)，并不比學(xué)習(xí)游手好閑好。約翰貝勒斯22、讀史使人明智，讀詩使人靈秀，數(shù)學(xué)使人周密，自然哲學(xué)使人精邃，倫理學(xué)使人莊重，邏輯學(xué)使人善辯。培根23、我們在我們的勞動過程中學(xué)習(xí)思考，勞動的結(jié)果，我們認(rèn)識了世界的奧妙，于是我們就真正來改變生活了。高爾基24、我們要振作精神，下苦功學(xué)習(xí)。下苦功，三個字，一個叫下，一個叫苦，一個叫功，一定要振作精神，下苦功。毛澤東25、我學(xué)習(xí)了一生，現(xiàn)在我還在學(xué)習(xí)，而將來，只要我還有精力，我還要學(xué)習(xí)下去。別林斯基、學(xué)習(xí)外語并不難，學(xué)習(xí)外語就像交朋友一樣，朋友是越交越熟的，天天見面，朋友之間就親密無間了。高士其2、對世界上的一切學(xué)問與知識的掌握也并非難事，只要持之以恒地學(xué)習(xí)，努力掌握規(guī)律，達(dá)到熟悉的境地，就能融會貫通，運用自如了。高士其3、學(xué)和行本來是有聯(lián)系著的，學(xué)了必須要想，想通了就要行，要在行的當(dāng)中才能看出自己是否真正學(xué)到了手。否則讀書雖多，只是成為一座死書庫。謝覺哉、你的假裝努力，欺騙的只有你自己，永遠(yuǎn)不要用戰(zhàn)術(shù)上的勤奮，來掩飾戰(zhàn)略上的懶惰。11、時間只是過客，自己才是主人，人生的路無需苛求，只要你邁步，路就在你的腳下延伸，只要你揚帆，便會有八面來風(fēng)，啟程了，人的生命才真正開始。12、不管做什么都不要急于回報，因為播種和收獲不在同一個季節(jié)，中間隔著的一段時間，我們叫它為堅持。13、你想過普通的生活，就會遇到普通的挫折。你想過最好的生活，就一定會遇上最強(qiáng)的傷害。這個世界很公平，想要最好，就一定會給你最痛。1、快樂總和寬厚的人相伴，財富總與誠信的人相伴，聰明總與高尚19