課標(biāo)版 生物 第31講 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與微生物的應(yīng)用,知識(shí)一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 一、果酒和果醋的制作 1.制作原理與條件,2.制作流程 3.葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是 紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液 。 4.現(xiàn)在工廠生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其他微生物的生長(zhǎng), 采取的措施是直接在果汁中加入 人工培養(yǎng) 的酵母菌。 二、腐乳的制作 1.菌種:主要是 毛霉 。 2.原理,(1)蛋白質(zhì) 肽、氨基酸; (2)脂肪 甘油+脂肪酸 3.腐乳的制作流程,三、泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測(cè)定 1.作用菌類(lèi): 假絲酵母和乳酸菌 。 2.原料:白菜、洋白菜等。 3.原理:假絲酵母和乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化成 乳酸 和醇類(lèi)。 4.制作步驟,5.亞硝酸鹽含量的測(cè)定 (1)亞硝酸鹽的產(chǎn)生:由 假絲酵母 產(chǎn)生。 (2)亞硝酸鹽的危害: 可轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺 。 (3)亞硝酸鹽含量測(cè)定:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與 對(duì)氨基苯磺酸 發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成 玫瑰紅色,產(chǎn)物,將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測(cè)比較,大 致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。,1.生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用十分廣泛,如果酒、果醋、腐乳、泡菜的 制作就是生活中常見(jiàn)的例子。下圖是果酒制果醋的發(fā)酵裝置,分析回答下 列問(wèn)題:,(1)果酒制作中的原材料通常是葡萄,但對(duì)葡萄不能進(jìn)行反復(fù)沖洗,其原因是 。 (2)在圖乙中遺漏了一個(gè)裝置,請(qǐng)以文字加以補(bǔ)充。 (3)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置,則溫度應(yīng)該控制在 。此時(shí) 裝置需要修改的地方是 。 果酒制果醋的反應(yīng)式為: 。 (4)在果醋發(fā)酵過(guò)程中,用 檢測(cè)是否有醋酸生成。 答案 (1)葡萄上存在酵母菌,反復(fù)沖洗,會(huì)洗去大量的酵母菌,不利于酒精 發(fā)酵 (2)缺少一個(gè)排氣口,應(yīng)補(bǔ)上一個(gè)排氣口裝置,并連上一根長(zhǎng)而彎曲的管子,(3)1825 不需要通入空氣 C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O (4)pH試紙 解析 (1)果酒通常是以葡萄為原料,通過(guò)酵母菌發(fā)酵獲得的,而酵母菌主 要存在于果實(shí)的表面,所以不能對(duì)葡萄進(jìn)行反復(fù)沖洗。(2)乙裝置沒(méi)有排氣 管道,所以應(yīng)添加排氣口,并連上一根長(zhǎng)而彎曲的管子。(3)酵母菌產(chǎn)生酒精 需進(jìn)行無(wú)氧呼吸,所以生產(chǎn)酒精不需通入空氣。20 左右最適合酵母菌繁 殖,所以酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在1825 。(4)用pH試紙檢測(cè)裝置中 培養(yǎng)液的pH,以檢測(cè)是否有醋酸生成。,2.臘肉、腌白菜、腐乳等是家庭中常見(jiàn)的一些腌制品,其味道鮮美,便于保 存。請(qǐng)聯(lián)系生活實(shí)際,回答下列問(wèn)題: (1)臘肉和腌白菜能保存較長(zhǎng)時(shí)間而不腐敗,原因是 。 (2)腐乳制作的原理是 。 (3)制作腐乳的鹵湯中通常要加入料酒、黃酒等,含量一般控制在12%左右, 其目的是 。 (4)腌白菜味道鮮美,但最好是等腌制好后再食用,若過(guò)早食用會(huì)影響人體健 康,請(qǐng)分析原因。,答案 (1)腌制液鹽濃度過(guò)高,微生物因失水而不能生存 (2)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨 基酸;脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸 (3)抑制微生物的生長(zhǎng),同時(shí)使腐乳具有獨(dú)特的香味 (4)未腌制成熟的白菜中,亞硝酸鹽等物質(zhì)的含量過(guò)高,食用后可能會(huì)影響人 體健康。 解析 (1)由于腌制液鹽濃度過(guò)高,微生物失水死亡,所以臘肉和腌白菜能 保存比較長(zhǎng)的時(shí)間。(2)腐乳的制作原理是毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將 豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶將脂肪分解成甘油和 脂肪酸。(3)制作腐乳的鹵湯中加入料酒、黃酒的目的是抑制微生物的生,長(zhǎng),同時(shí)能使腐乳具有獨(dú)特的香味。(4)白菜腌制的過(guò)程中,由于微生物的作 用,會(huì)產(chǎn)生硝酸鹽和亞硝酸鹽等物質(zhì),未腌制成熟的白菜中,亞硝酸鹽等物 質(zhì)含量高,食用后可能會(huì)影響人體健康。,知識(shí)二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 一、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基 (1)概念:人們按照微生物對(duì) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 的不同需求,配制出供其 生長(zhǎng)繁殖 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 (2)營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成:水、 無(wú)機(jī)鹽 、 碳 源、 氮 源和生長(zhǎng)因子。 (3)類(lèi)型:根據(jù)物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和 液體培,養(yǎng)基 ;根據(jù)功能可分為選擇培養(yǎng)基和 鑒別 培養(yǎng)基。 (4)制備步驟:計(jì)算稱(chēng)量溶化滅菌倒平板。 2.無(wú)菌技術(shù)(連線),注意:(1)消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物。 (2)滅菌可以殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。 二、大腸桿菌的純化培養(yǎng) 1.純化大腸桿菌,其關(guān)鍵的步驟是 接種 。 2.純化培養(yǎng)原理:在培養(yǎng)基上得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的 菌落 ,即可獲得較純的菌種。 3.純化培養(yǎng)方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。 (1)平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 連續(xù)劃線 的操 作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 (2)稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列的 梯度稀釋 ,然后將不同稀,釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。 三、纖維素分解菌的分離 1.纖維素酶 (1)組成:纖維素分解菌可產(chǎn)生 纖維素酶 ,纖維素酶是一種復(fù)合酶, 它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用: 纖維素 纖維二糖 葡萄糖 2.纖維素分解菌的分離 (1)方法: 剛果紅染色法 。,(2)原理 紅色復(fù)合物 紅色消失、出現(xiàn) 透明圈 。 (3)標(biāo)志:使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,根據(jù) 是否產(chǎn)生透明 圈 來(lái)篩選纖維素分解菌。 (4)操作流程 土壤取樣:富含 纖維素 的環(huán)境 選擇培養(yǎng):用 選擇培養(yǎng)基 培養(yǎng),以增加纖維素分解菌的數(shù)量 , 梯度稀釋 涂布平板:將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落:產(chǎn)生 纖維素酶 的菌落周?chē)?出現(xiàn)透明圈,四、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離,1.如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法,請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題: (1)圖甲是利用 法進(jìn)行微生物接種,圖乙是利用 法 進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是 和 ;對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是 和酒精消,毒。 (2)接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)行? 。 (3)接種后,在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)? 。 (4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,其接種方法是 (填圖甲或圖乙)。,答案 (1)平板劃線 稀釋涂布平板 接種環(huán) 涂布器 灼燒滅菌 (2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域 (3)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng) (4)圖乙 解析 圖甲和圖乙分別表示平板劃線法和稀釋涂布平板法,這兩種方法 所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著 無(wú)菌區(qū)域,因此接種常在酒精燈火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn) 生水,對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響,故在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要倒置培 養(yǎng)。,2.有些微生物能合成纖維素酶。研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以 及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。分析 回答下列問(wèn)題。 (1)培養(yǎng)基中加入的化合物A是 ,為微生物的生長(zhǎng)提供 ,這 種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。 (2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物,向培養(yǎng)基中加入 。 (3)在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前,可用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),增加 微生物的濃度。若要獲得純凈的菌株,常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種,此 過(guò)程所用的接種工具是 ,操作時(shí)采用 滅菌的方法,還可用 法操作。,(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過(guò)的培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)滅菌處理才能倒掉,這樣做的目的是 。 答案 (1)纖維素 碳源 選擇 (2)剛果紅 (3)接種環(huán) 灼燒 稀釋涂布平板 (4)防止造成環(huán)境污染 解析 (1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1 酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖 維二糖分解成葡萄糖。在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡 萄糖,為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng),同樣,也可以為人類(lèi)所利用。要篩選出能,產(chǎn)生纖維素酶的微生物,應(yīng)用選擇培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中加入纖維素作為唯一 的碳源,能在此培養(yǎng)基中存活的微生物就是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。(2) 剛果紅可以和像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,而不與水解后的 纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶分解纖 維素,從而使菌落周?chē)纬赏该魅Α?3)獲得純凈的菌株的兩種方法為平板 劃線法和稀釋涂布平板法。(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過(guò)的培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)滅菌處理 才能倒掉,這樣可避免微生物對(duì)環(huán)境造成污染。,3.纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素?；卮鹣铝袉?wèn)題: (1)在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中,通常用 染色法,這種方法能夠通 過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。 (2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù),與分離醋酸菌相比,進(jìn)行 培養(yǎng)時(shí)除了營(yíng)養(yǎng)不同外,最主要的實(shí)驗(yàn)條件差別是 ,該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。 (3)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過(guò)程中,為了防止外界酸和堿對(duì)酶活性 的影響,采取的措施是向提取液和分離液中添加 ;若探究纖維素酶 活性的最適溫度,如何設(shè)置對(duì)照? 。,答案 (1)剛果紅 (2)保證無(wú)氧環(huán)境 小(低) (3)緩沖溶液 設(shè)置不同的溫度梯度進(jìn)行相互對(duì)照 解析 (1)利用剛果紅染色法來(lái)篩選纖維素分解菌,剛果紅能與培養(yǎng)基中 的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)培養(yǎng)基中的纖維素被纖維素酶分解后,剛果 紅纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心 的透明圈。(2)牛胃內(nèi)是無(wú)氧環(huán)境,故應(yīng)在無(wú)氧環(huán)境下分離牛胃中的纖維素 分解菌。相距很近的細(xì)菌可以形成一個(gè)菌落,故菌落數(shù)比活菌數(shù)少。(3)在 提取液和分離液中添加緩沖溶液可保證提取液和分離液的pH不受干擾。 探究某種酶活性的最適溫度應(yīng)設(shè)置不同的溫度梯度進(jìn)行相互對(duì)照。,突破一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 1.果酒和果醋發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)思路 (1)因酵母菌的繁殖需要空氣,醋酸菌是好氧菌,所以在果酒制作的前期和 果醋制作的整個(gè)過(guò)程中都需氧。 因酵母菌產(chǎn)生酒精是在無(wú)氧條件下,應(yīng)控制充入氧的量,故應(yīng)在充氣口設(shè) 置開(kāi)關(guān)。 (2)由于在發(fā)酵過(guò)程中都產(chǎn)生CO2 ,因此又需設(shè)排氣口;為防止空氣中微生 物的污染,排氣口應(yīng)連接一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管。,(3)因要對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)監(jiān)測(cè),應(yīng)設(shè)置出料口便于取料。 (4)果酒和果醋的發(fā)酵裝置及各個(gè)部件的作用,2.影響腐乳品質(zhì)的因素 (1)鹽 a.濃度過(guò)低,不足以抑制微生物生長(zhǎng),豆腐易腐敗變質(zhì)。 b.濃度過(guò)高,會(huì)影響腐乳口味。 (2)酒的含量:一般控制在12%左右。 (3)香辛料:具調(diào)味、殺菌作用。 (4)溫度:1518 。 3.泡菜制作的注意事項(xiàng) (1)材料的選擇及用量 蔬菜應(yīng)新鮮,若放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),蔬菜中的硝酸鹽易被還原成亞硝酸鹽。,清水和鹽的質(zhì)量比為41,鹽水要煮沸后冷卻待用。鹽水煮沸有兩大 作用,一是除去水中的氧氣,二是殺滅鹽水中的其他細(xì)菌。 (2)防止雜菌污染:每次取樣用具要洗凈,取樣后要迅速封口。 (3)氧氣需求 泡菜壇要選擇透氣性差的容器,以創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境,有利于乳酸菌發(fā)酵,防 止蔬菜腐爛。 壇蓋邊沿的水槽中要注滿(mǎn)水,以保證乳酸菌發(fā)酵所需的無(wú)氧環(huán)境,并注 意在發(fā)酵過(guò)程中要經(jīng)常補(bǔ)充壇蓋邊沿水槽中的水。 (4)溫度:發(fā)酵過(guò)程控制在室溫即可,最好在2636 。溫度過(guò)高,則易滋生 雜菌;溫度過(guò)低,則發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)。,典例1 如圖簡(jiǎn)單表示葡萄酒的釀制過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖分析: (1)葡萄酒的釀制原理是:先通氣使酵母菌進(jìn)行 ,以增加酵母菌的,數(shù)量,然后使酵母菌 獲得葡萄酒。 (2)隨著發(fā)酵過(guò)程的加深,液體密度會(huì)逐漸變低(可用密度計(jì)測(cè)量)。其原因 是 。 (3)在甲中進(jìn)行攪拌的目的是 ,丙中一段時(shí)間后,揭開(kāi)蓋子是否能夠 產(chǎn)生果醋? 。(填“能”或“不能”) (4)蘋(píng)果醋是最受歡迎的飲料之一,其生產(chǎn)過(guò)程中利用了 的發(fā)酵作 用。在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中,果醋制作往往在果酒制作的基礎(chǔ)上進(jìn)行,其相關(guān)的 反應(yīng)式為: 。 解析 (1)酵母菌為一種兼性厭氧真菌,在有氧情況下可進(jìn)行有氧呼吸,無(wú) 氧時(shí)則進(jìn)行酒精發(fā)酵。(2)由于發(fā)酵時(shí)糖被消耗,產(chǎn)生酒精和CO2,而酒精的,密度比糖和水低,這是液體密度降低的原因。(3)攪拌可增加甲內(nèi)溶氧量,酵 母菌有氧呼吸需要氧。揭蓋后氧氣充足,丙中酒精可在醋酸菌作用下被氧 化生成醋酸。(4)果醋制作過(guò)程中,起作用的微生物主要是醋酸菌。 答案 (1)有氧呼吸 發(fā)酵 (2)由于發(fā)酵時(shí)糖被消耗,產(chǎn)生了酒精和CO2,而酒精密度比糖和水低 (3)增加溶氧量 能 (4)醋酸菌 C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O,1-1 從古至今,酒就與人類(lèi)生活息息相關(guān)。請(qǐng)回答與釀酒有關(guān)的問(wèn)題: (1)人類(lèi)使用釀制葡萄酒的微生物主要是酵母菌,酵母菌酒精發(fā)酵的反應(yīng)式 是 ;進(jìn)行酒精發(fā)酵一般將溫度控制在 。 (2)葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是 。 (3)現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其他微生物的生 長(zhǎng),采取的措施是 ,并接入合適的菌種。 (4)某同學(xué)人工自釀葡萄酒時(shí),在發(fā)酵后期向發(fā)酵液中通入空氣,并將發(fā)酵液 置于3035 環(huán)境中,結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液中有 出現(xiàn),這類(lèi)微生物在糖 類(lèi)缺乏時(shí)可以使 轉(zhuǎn)化為 ,后者再轉(zhuǎn)化為 。,答案 (1)C6H12O6 2C2H5OH+2CO2 1825 (2)紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液 (3)對(duì)原料和設(shè)備進(jìn)行消毒和滅菌 (4)醋酸菌 乙醇 乙醛 醋酸 解析 (1)釀制葡萄酒使用的微生物主要是酵母菌,酵母菌酒精發(fā)酵的最 適溫度是1825 。(2)紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液,故葡萄酒常呈現(xiàn)深紅 色。(3)為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其他微生物的生長(zhǎng),需對(duì)原料和設(shè)備 進(jìn)行消毒和滅菌后,再接入合適的菌種。(4)釀制葡萄酒時(shí),若在發(fā)酵后期向 發(fā)酵液中通入空氣,并將發(fā)酵液置于3035 環(huán)境中,在糖類(lèi)缺乏時(shí),醋酸菌 可把乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸。,突破二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 1.選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的應(yīng)用實(shí)例,2.微生物的純化培養(yǎng),3.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 (1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 原理:利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)算一定容積 的樣品中微生物的數(shù)量。 方法:用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 缺點(diǎn):不能區(qū)分死菌與活菌。 (2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法) 原理:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣 品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大 約含有多少活菌。,計(jì)算公式:每克樣品中的菌株數(shù)=(CV)M,其中,C代表某一稀釋度下 平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL), M代表稀釋倍數(shù)。 操作:設(shè)置重復(fù)組,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn) 確,一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。,典例2 根據(jù)分離以尿素為氮源的微生物實(shí)驗(yàn),回答下列問(wèn)題: (1)寫(xiě)出脲酶降解尿素的反應(yīng)式: 。 (2)該實(shí)驗(yàn)分離細(xì)菌時(shí)用濃度為10-4和10-5土壤稀釋液接種,更容易形成單菌 落的是 。 (3)A同學(xué)篩選出的菌落為150個(gè),其他同學(xué)只篩選出50個(gè),并且他在設(shè)計(jì)實(shí) 驗(yàn)時(shí)并沒(méi)有設(shè)置對(duì)照。你認(rèn)為A同學(xué)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有哪些? 。如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)排 除可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素: 。 (4)涂布平板的所有操作怎樣保證無(wú)菌? 。 (5)有脲酶的細(xì)菌在生態(tài)穩(wěn)態(tài)上起什么作用? 。,解析 脲即尿素,是蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物。有一些細(xì)菌含有脲酶可以分解 尿素,利用尿素作為其生長(zhǎng)的氮源。本實(shí)驗(yàn)使用稀釋涂布平板法分離以尿 素為氮源的微生物,用濃度為10-4和10-5土壤稀釋液接種,更容易形成單菌落 的是10-5土壤稀釋液。A同學(xué)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能是土樣不同,也可能是培 養(yǎng)基污染或操作失誤,排除方案有二:一是由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土 壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果與A同學(xué)一致,則證明無(wú)誤,如果結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存 在操作失誤或培養(yǎng)基配制有問(wèn)題;另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在 不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。 答案 (1)CO(NH2)2+H2O 2NH3+CO2 (2)10-5土壤稀釋液 (3)可能是土樣不同,也可能是培養(yǎng)基污染或操作失誤 方案有二:一是由,其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果與A同學(xué)一致,則證明無(wú)誤, 如果結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基配制有問(wèn)題;另一種方 案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照, 以證明培養(yǎng)基是否受到污染 (4)應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”,都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。例如,酒精燈 與培養(yǎng)皿的距離要合適、移液管頭不要接觸任何其他物質(zhì)、移液管要在 酒精燈火焰周?chē)鹊?(5)如果土壤中有許多尿素,在自然界較高溫度下會(huì)被水解,水解后的氨使土 壤變成酸性,氨與其他陰離子物質(zhì)如S 、C 、N 等形成化合物,則會(huì) 使土壤板結(jié)。有脲酶的細(xì)菌使植物廢棄物和動(dòng)物尸體降解,并利用了所形 成的氨,有利于自然界中氮的循環(huán),2-1 急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌、病毒通過(guò)消化道進(jìn)入人體導(dǎo) 致的。因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌、病毒的含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要 措施。請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題: (1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同 稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄 菌落數(shù)量,這種方法稱(chēng)為 。如圖所示的四種菌落分布圖中,不可能由 該方法得到的是 。,(2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要對(duì)照組? 。為什么? 。 (3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌:培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿; 玻棒、試管、燒瓶和吸管;實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要消毒的是 ,需要滅菌的是 。 (4)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白 胨培養(yǎng)液和具塞試管,應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌? 。 答案 (1)稀釋涂布平板法 D (2)需要 因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格) (3) (4)通過(guò)無(wú)菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測(cè)水樣。再注入已滅菌的乳糖蛋,白胨培養(yǎng)液將試管充滿(mǎn),塞上塞子,混勻后置于37 恒溫箱培養(yǎng)24 h。若試 管內(nèi)有氣泡生成,則說(shuō)明水樣中有大腸桿菌 解析 (1)平板劃線法所得菌落集中呈線狀,D的菌落分布情況可判斷為 平板劃線法接種。(2)為判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格,本實(shí)驗(yàn)需要對(duì)照組。(3) 消毒是指使用較溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生 物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有 的微生物,包括芽孢和孢子。對(duì)人的手不能進(jìn)行滅菌處理。(4)根據(jù)題目意 思大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體,對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行接種觀察有無(wú)氣泡產(chǎn)生來(lái) 判斷大腸桿菌的有無(wú)。,