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2019-2020年高考生物總復(fù)習(xí)——單元九 生物技術(shù)實(shí)踐 1.(xx全國(guó)理綜，4)某同學(xué)在①、②、③三種條件下培養(yǎng)大腸桿菌，這三種條件是： ①以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不斷補(bǔ)充培養(yǎng)基，及時(shí)去除代謝產(chǎn)物 ②以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不斷補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物 ③以葡萄糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基，不補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物 根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果繪制的一段時(shí)間內(nèi)菌體數(shù)的對(duì)數(shù)隨時(shí)間變化的趨勢(shì)圖如下： 假設(shè)三種培養(yǎng)基中初始總糖量相等，則①、②、③三種條件依次對(duì)應(yīng)的趨勢(shì)圖是(　　) A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲 C.丙、甲、乙 D.丙、乙、甲 2.(xx全國(guó)課標(biāo)卷Ⅰ，39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： ①配置培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無(wú)菌平板； ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是___________________________________________ ______________________________________________________________________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。 3.(xx全國(guó)課標(biāo)卷Ⅲ，39)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是________。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________和________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。 4.(xx全國(guó)卷Ⅰ，39)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問(wèn)題： (1)顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通常可用______________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以________為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用____________________直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用____________________法進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個(gè)溫度中，________ ℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞________ ℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 5.(xx新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表)： 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng)基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________________________ ______________________________________________________________________。 6.(xx課標(biāo)Ⅱ，39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_____________________________________________________________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 7.(xx課標(biāo)全國(guó)Ⅱ，39)臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。 回答下列問(wèn)題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用____________法或____________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用__________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A__________；含B的濾紙片周圍沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B__________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說(shuō)明__________________________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的____________。 (4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素__________。 8.(xx江蘇卷，25)漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是(多選)(　　) A.生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C.在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，在通過(guò)劃線進(jìn)一步純化 D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株 9.(xx江蘇卷，19)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是(　　) A.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋 B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上 10.(xx四川卷，10)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成________色。 (2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過(guò)程采取的接種方法是________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較________。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_(kāi)_______，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含________個(gè)氨基酸。 1.(xx河南鄭州二模)某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？________(填“能”或“不能”)，原因是__________________________________。 (2)培養(yǎng)基用________方法滅菌，培養(yǎng)皿用________方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右時(shí)，在________附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，可以防止________，以免造成污染。 (3)要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用________法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的________就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。 (4)培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是________________________________________________。 (5)實(shí)驗(yàn)中使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)________處理后才能丟棄，以防止微生物的擴(kuò)散。 2.(xx甘肅張掖市天一中第一次質(zhì)檢)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。對(duì)炭疽病疑似患者，可通過(guò)噬菌體裂解實(shí)驗(yàn)確診。 (1)為從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用涂布器涂勻， 這種接種方法稱為_(kāi)_______。 (2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要對(duì)照組？________。為什么？______________________________________________________________________。 (3)下圖為細(xì)菌鑒定的實(shí)驗(yàn)流程。圖中Ⅲ的液體培養(yǎng)基由澄清變渾濁的原因是________________。在實(shí)驗(yàn)Ⅳ中，先用無(wú)菌滴管吸取________滴于平板培養(yǎng)基表面，再用涂布器涂勻，經(jīng)培養(yǎng)得到如圖中Ⅳ的6個(gè)菌落。然后在平板培養(yǎng)基的________(填數(shù)字標(biāo)號(hào))菌落上滴加________。觀察并記錄結(jié)果。 (4)用炭疽桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)后，所有用過(guò)的培養(yǎng)液、培養(yǎng)基等必須經(jīng)過(guò)________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，污染環(huán)境。 3.(xx東北三省三校聯(lián)考)人和哺乳動(dòng)物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過(guò)降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源。現(xiàn)對(duì)土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無(wú)菌的，常用的滅菌方法有______________________________________________________ ___________________________________________________________(至少答2種)。 (2)將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過(guò)程中每一步都要在________旁進(jìn)行操作。接種后的培養(yǎng)皿________于37 ℃的________中培養(yǎng)。 (3)用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌，其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的________使pH升高，使酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力________。 (4)與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)________。 A.多 B.少 C.相等 D.幾乎為零 4.(xx黑龍江大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)初考)葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問(wèn)題，引進(jìn)果酒、果醋生產(chǎn)線進(jìn)行葡萄的深加工，獲得了較好效益，其生產(chǎn)流程如圖所示，據(jù)圖回答： (1)在篩選菌種A時(shí)，需要在接種前用________法對(duì)葡萄果汁進(jìn)行滅菌。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用________的方法。 (2)在純化菌種A時(shí)接種了5個(gè)平板，每個(gè)平板均接種了0.1 mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是________，推測(cè)出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數(shù)分別是180、220、480、200，則樣品中菌種A的數(shù)量為_(kāi)_______個(gè)/mL，用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，一般________(低于、高于)實(shí)際值。 (3)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成________保存?zhèn)溆谩? 5.(xx深圳調(diào)研)自養(yǎng)需氧型的硝化細(xì)菌能夠降低水體中的銨鹽，對(duì)水體有一定的凈化作用。請(qǐng)回答： (1)培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)，將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是________________。培養(yǎng)基中加入銨鹽為硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)提供________，培養(yǎng)基中沒(méi)有加入有機(jī)碳，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)硝化細(xì)菌純化并計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)照組應(yīng)該涂布等量的________。若實(shí)驗(yàn)組每個(gè)平板中的菌落數(shù)都超過(guò)了300，應(yīng)對(duì)樣本菌液進(jìn)行________處理。 (3)實(shí)驗(yàn)：探究弱酸弱堿條件下硝化細(xì)菌對(duì)銨鹽轉(zhuǎn)化能力的大小。取含銨鹽的液體培養(yǎng)基均分成________等分，其pH值可依次調(diào)節(jié)為_(kāi)_______，培養(yǎng)相同的時(shí)間后，可通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)基中的________來(lái)判斷硝化細(xì)菌分解能力的大小。 6.(xx寶雞九校聯(lián)考)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如下圖所示。 (1)從用途上來(lái)說(shuō)，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，僅以淀粉作為_(kāi)_______源；從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō)，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)一般加入________作為凝固劑。 (2)進(jìn)行①過(guò)程的目的是________；②過(guò)程所使用的接種方法是________法。 (3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是________________；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用________法滅菌。 (4)部分嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放_(tái)_______分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈；應(yīng)挑出透明圈________(大或小)的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基。 7.(xx成都模擬)醋酸菌是食品工業(yè)中常用的微生物，不僅可用于生產(chǎn)醋酸，某些類型還可用于生產(chǎn)細(xì)菌纖維素，回答下列問(wèn)題： (1)醋酸菌在缺少糖源的情況下，可將乙醇氧化為_(kāi)_______，進(jìn)而生成醋酸，進(jìn)行醋酸發(fā)酵時(shí)，為了維持醋酸發(fā)酵培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定，可向培養(yǎng)液中加入________。 (2)篩選接種時(shí)，為了避免環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在________附近進(jìn)行；某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)行接種，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)一個(gè)培養(yǎng)皿中某部位的菌落分布呈溝槽狀，與其他部位的菌落分布有明顯差異，其原因最可能是劃線時(shí)該部位____________。 (3)鑒定菌種的依據(jù)通常包括菌落的形狀、大小、________等菌落特征，將鑒定的菌種進(jìn)行臨時(shí)保存時(shí)，可在低溫下使用試管斜面保存，但該方法除保存時(shí)間短外，菌種還易________；若需較長(zhǎng)時(shí)間保存菌種，可用的方法是 ______________________________________________________________________。 (4)利用篩選出的優(yōu)質(zhì)菌種進(jìn)行生產(chǎn)時(shí)，研究人員測(cè)得培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)菌纖維素產(chǎn)量、培養(yǎng)液中的殘?zhí)橇亢蜌埖咳缬覉D所示，圖中代表培養(yǎng)液中殘氮量的是________曲線，與B曲線相比，A曲線下降更快的主要原因是 ______________________________________________________________________。 8.(xx襄陽(yáng)市調(diào)研)生活飲用水經(jīng)過(guò)沉淀、過(guò)濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB5749—85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，大腸桿菌不得大于3個(gè)/L。 (1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為_(kāi)___________。 (2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？為什么？______________________________________________________________________ (3)如分別取0.1 mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_(kāi)_______。 (4)純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用________法滅菌，________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止雜菌感染。 (5)如果要測(cè)定水中的病毒種類，可以用________技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用________技術(shù)進(jìn)行鑒定。 9. (xx石家莊一模)“節(jié)約一張紙，增添一片綠”。紙的主要成分是木質(zhì)纖維，以纖維素類物質(zhì)生產(chǎn)燃料乙醇的研究越來(lái)越受重視。 (1)該技術(shù)需要從土壤中獲得纖維素分解菌，獲得該菌的方法是在含有纖維素的培養(yǎng)基上加入________染料，篩選周圍有________的菌落。其產(chǎn)生的分解纖維素的酶至少包括________________________三種組分，在這三種酶協(xié)同作用下，纖維素最終被水解成________。 (2)用獲得的糖液發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，常用的微生物是________，在________的發(fā)酵液中，該菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物受到抑制。發(fā)酵過(guò)程中檢測(cè)該菌數(shù)量可采用________法計(jì)數(shù)，示意圖A和B中，________表示的是用該法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 課時(shí)考點(diǎn)38　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及酶的應(yīng)用 1.(xx全國(guó)課標(biāo)卷Ⅱ，39)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的，回答下列問(wèn)題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過(guò)程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的________中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過(guò)程③在酵母菌細(xì)胞的________中進(jìn)行，與無(wú)氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度________。 (2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過(guò)程需要在________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段。 (4)醋酸桿菌屬于________核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中________(填“含有”或“不含有”)線粒體。 2.(xx新課標(biāo)全國(guó)Ⅰ理綜，39)回答下列有關(guān)泡菜制作的問(wèn)題： (1)制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是________________________________。 為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是____________。 (2)泡菜制作過(guò)程中，乳酸發(fā)酵的過(guò)程即為乳酸菌進(jìn)行__________的過(guò)程。該過(guò)程發(fā)生在乳酸菌的________中。 (3)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素有______、________和________等。 (4)從開(kāi)始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長(zhǎng)規(guī)律是____________，原因是___________________。 3.(xx江蘇卷，7)下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是(　　) A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長(zhǎng) B.加料酒主要是為了滅菌，避免腐乳變質(zhì) C.發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的是乳酸桿菌 D.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用 4.(xx江蘇卷，17)關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.將腐乳坯堆積起來(lái)會(huì)導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高，影響毛霉生長(zhǎng) B.腐乳坯若被細(xì)菌污染，則腐乳坯表面會(huì)出現(xiàn)黏性物 C.勤向腐乳坯表面噴水，有利于毛霉菌絲的生長(zhǎng) D.裝壇階段加入料酒，可有效防止雜菌污染 5.(xx江蘇卷，20)下圖為制備人工種子部分流程示意圖，下列敘述正確的是(　　) A.胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織 B.該過(guò)程以海藻酸鈉作為營(yíng)養(yǎng)成分，以CaCl2溶液作為凝固劑 C.可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖，為胚狀體提供碳源 D.包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣，有利于人工種子的儲(chǔ)藏 6.(xx廣東理綜，4)下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.醋酸菌在無(wú)氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸 B.酵母菌在無(wú)氧條件下利用葡萄汁產(chǎn)生酒精 C.泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵 D.腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶 7.(xx天津卷，10)天津獨(dú)流老醋歷史悠久、獨(dú)具風(fēng)味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。 (1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度，這是因?yàn)槊竉_____________________________________________________________________。 (2)在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過(guò)程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高_(dá)_______的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。 (3)在醋酸發(fā)酵階段，獨(dú)流老醋采用獨(dú)特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下。 ①發(fā)酵過(guò)程中，定期取樣測(cè)定醋酸桿菌在密度變化，趨勢(shì)如下圖。據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌在顛倒前后密度變化的特點(diǎn)是______________________________________________________________________， 由此推測(cè)，影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是________________。 ②乳酸含量高是獨(dú)流老醋風(fēng)味獨(dú)特的重要成因。發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵缸中______________________________________________________________________ 層醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的變化，加劇了不同種類乳酸菌的________，淘汰了部分乳酸菌種類。 8.(xx廣東理綜，29)泡菜是我國(guó)的傳統(tǒng)食品之一，但制作過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對(duì)人體健康有潛在危害，某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”，查閱資料得到如圖。 (1)制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，目的是________，乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有________。 (2)據(jù)上圖，與第3天相比，第8天后的泡菜更適于食用，因?yàn)楹笳達(dá)_______；pH值呈下降趨勢(shì)，原因是__________________________________________________。 (3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，擬參照資料的實(shí)驗(yàn)方案和食鹽濃度(4%～10%)，探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過(guò)程中亞硝酸鹽含量的高低，并確定其最適條件，請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表，并推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)論。 9.(xx海南卷，30)生產(chǎn)果汁時(shí)，用果膠酶處理果泥可提高果汁的出汁量?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題： (1)某同學(xué)用三種不同的果膠酶進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn)，各組實(shí)驗(yàn)除酶的來(lái)源不同外，其他條件都相同，測(cè)定各組的出汁量，據(jù)此計(jì)算各組果膠酶的活性的平均值并進(jìn)行比較。這一實(shí)驗(yàn)的目的是_________________________________________________。 (2)現(xiàn)有一種新分離出來(lái)的果膠酶，為探究其最適溫度，某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：取試管16支，分別加入等量的果泥、果膠酶、緩沖液，混勻，平均分為4組，分別置于0 ℃、5 ℃、10 ℃、40 ℃下保溫相同時(shí)間，然后，測(cè)定各試管中的出汁量并計(jì)算各組出汁量平均值。該實(shí)驗(yàn)溫度設(shè)置的不足之處有________和________。 (3)某同學(xué)取5組試管(A～E)分別加入等量的同種果泥，在A、B、C、D 4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的試管中分別加入等量的緩沖液和不同量的同種果膠酶，然后，補(bǔ)充蒸餾水使4組試管內(nèi)液體體積相同；E組加入蒸餾水使試管中液體體積與實(shí)驗(yàn)組相同。將5組試管置于適宜溫度下保溫一定時(shí)間后，測(cè)定各組的出汁量。通過(guò)A～D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。本實(shí)驗(yàn)中，若要檢測(cè)加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量，E組設(shè)計(jì)________(填“能”或“不能”)達(dá)到目的，其原因是_______________________________________________________ ______________________________________________________________________。 10.(xx山東卷，35)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下： →→→ (1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，宜用________作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是________________。從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于__________。 (2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前，宜采用______方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。 (3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測(cè)其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快，說(shuō)明其分子量越________。 (4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化，可通過(guò)檢測(cè)固定化乳糖酶的________確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外，酶的固定化方法還包括________、________、離子吸附法及交聯(lián)法等。 11.(xx海南卷，30)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)。為了測(cè)定不同泡制天數(shù)的泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。回答相關(guān)問(wèn)題： (1)請(qǐng)完善下列實(shí)驗(yàn)步驟。 ①標(biāo)準(zhǔn)管的制備：用________________和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。 ②樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的________________，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。 ③將每個(gè)________分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺________的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。 (2)如圖表示的是泡菜中________趨勢(shì)。 (3)泡菜制作過(guò)程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是________(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。  1.(xx東北三省四市聯(lián)模)藍(lán)莓富含花青素等營(yíng)養(yǎng)成分，具有保護(hù)視力、軟化血管、增強(qiáng)人體免疫力等功能。某同學(xué)嘗試用藍(lán)莓來(lái)制作藍(lán)莓果酒和藍(lán)莓果醋。 (1)制酒中利用的微生物是________，取樣后可用________觀察該微生物。發(fā)酵時(shí)一般要先通氣，通氣的目的是________________。制酒過(guò)程中可在酸性條件下用橙色的重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精的存在，檢驗(yàn)后顏色變成________。 (2)釀制成功的藍(lán)莓果酒如果暴露在空氣中酒味會(huì)逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味，尤其是氣溫高的夏天更易如此，分析其原因是________________。醋酸菌將乙醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件是糖源________(填“充足”或“缺少”)。 (3)釀制藍(lán)莓果酒時(shí)，并不需要對(duì)藍(lán)莓進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，這是因?yàn)樵赺_______的發(fā)酵液中，絕大多數(shù)微生物因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受抑制。 (4)為鑒定藍(lán)莓果醋是否釀制成功，除可以通過(guò)觀察菌膜、嘗、嗅之外，還可以通過(guò)檢測(cè)和比較________作進(jìn)一步的鑒定。 2.(xx濰坊統(tǒng)考)近年來(lái)，紀(jì)錄片《舌尖上的中國(guó)》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請(qǐng)回答： (1)腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種接種到豆腐上，這樣可以________________。腐乳制作的過(guò)程中，加鹽的作用是____________和____________。從微生物培養(yǎng)的角度來(lái)看，豆腐應(yīng)該屬于________。 (2)在果醋制作時(shí)，醋酸菌在________供應(yīng)和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以利用________生成醋酸。 (3)制作泡菜的原理是________________________________________________。 (4)胡蘿卜素是重要的藥物和食品添加劑，在胡蘿卜素的萃取中，所用的有機(jī)萃取溶劑應(yīng)該具有較高的________，以便胡蘿卜素能充分溶解其中。對(duì)萃取的胡蘿卜素樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行點(diǎn)樣層析時(shí)，如果出現(xiàn)________，則說(shuō)明胡蘿卜素提取成功。 3.(xx湖北模擬)橙子的果肉可供食用或制作果酒等，皮可用于提取精油，請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題： (1)利用橙子的果肉制作果酒時(shí)，酵母菌能將葡萄糖等糖類在________等條件下轉(zhuǎn)化成酒精，另外發(fā)酵裝置應(yīng)定時(shí)________。 (2)將等量的酵母菌接種到幾組相同的培養(yǎng)基，相同時(shí)間后，可通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)前后____________進(jìn)行發(fā)酵能力的測(cè)試。 (3)某同學(xué)在制作果酒之后，欲進(jìn)一步制作果醋，他先在有氧條件下接種優(yōu)良的醋酸桿菌，再持續(xù)通入無(wú)菌空氣，進(jìn)一步發(fā)酵幾乎未能得到果醋。原因最可能是______________________________________________________________________。 (4)研究發(fā)現(xiàn)橙皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用，如圖是提取橙皮精油和乳酸菌素及抑菌實(shí)驗(yàn)的示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答： ①橙皮易焦糊，不適用于提取橙皮精油的方法是________。 ②篩選乳酸菌A時(shí)，所用培養(yǎng)基須經(jīng)________法進(jìn)行滅菌。 ③圖中進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，接種的方法最可能是________，最終可通過(guò)__________來(lái)比較橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。 4.(xx安康二調(diào))利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久，惠及民生，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： (1)在果酒制作中，溫度是重要的控制條件，________左右的溫度最適合酵母菌繁殖，發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的________(氣體)，要及時(shí)排出。酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的酒精可用________溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。 (2)腐乳制作的流程是：讓豆腐長(zhǎng)出________→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。若腌制時(shí)，應(yīng)注意控制________。 (3)正常制作泡菜過(guò)程中，乳酸發(fā)酵的過(guò)程中發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的________中，若腌制過(guò)程中溫度高，用鹽量少，腌制時(shí)間短，則泡菜中亞硝酸鹽的含量________。 5.(xx沈陽(yáng)質(zhì)監(jiān))紅方是腐乳的一種。請(qǐng)回答與其制作有關(guān)的問(wèn)題： (1)補(bǔ)充制作紅方的實(shí)驗(yàn)流程：①________→②加鹽腌制→③________→④密封腌制。 (2)在實(shí)驗(yàn)流程①中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應(yīng)控制在________℃，并保持在一定的________。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來(lái)自空氣中的________。 (3)在實(shí)驗(yàn)流程②操作中，向長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時(shí)，鹽還能________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。 (4)在實(shí)驗(yàn)流程③用到的輔料中，鹵湯是由________及各種________配制而成的。此外，紅方因加入了________而呈深紅色。 6.(xx唐山一模)人們的日常生活與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)密切相關(guān)。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題： (1)腐乳制作中主要利用了微生物產(chǎn)生的________酶和脂肪酶。 (2)在制作果醋、腐乳、泡菜的過(guò)程中需要提供充足氧氣的是________。在發(fā)酵產(chǎn)物制作過(guò)程中都需要培養(yǎng)微生物，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)液(基)和培養(yǎng)器皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)。 (3)利用酵母菌釀酒時(shí)，一開(kāi)始持續(xù)通入空氣，導(dǎo)致酵母菌數(shù)量________(填“增多”、“不變”或“減少”)，然后再密封，使酒精________(填“增產(chǎn)”、“減產(chǎn)”或“不產(chǎn)生”). (4)果酒發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用________來(lái)檢驗(yàn)，在酸性條件下呈現(xiàn)灰綠色。 (5)純化果酒制作的菌種時(shí)，利用________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。接種時(shí)常用的方法有平板劃線法和________法。 7.(xx河北唐山摸底)根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的相關(guān)問(wèn)題。 (1)當(dāng)________、________時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。 (2)在________條件下，重鉻酸鉀與酒精發(fā)生反應(yīng)呈現(xiàn)________色。 (3)下圖為腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題： ―→―→―→ ①圖中A代表________，其主要目的是__________________，同時(shí)還能__________________。 ②在配制鹵湯中酒的含量一般控制在________左右，加酒含量過(guò)高腐乳成熟時(shí)間將會(huì)________；酒精含量過(guò)低，__________________，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。 8.(xx南昌一模)工廠利用蘋果生產(chǎn)果汁、果酒和果醋的大致工藝流程如下圖所示，請(qǐng)分析回答： (1)用蘋果加工成果汁的過(guò)程中，為了提高蘋果的出汁率并使果汁變得澄清，在預(yù)處理時(shí)需要加入________；同時(shí)為了使其得到充分利用，節(jié)約成本，需要控制好________。 (2)蘋果酒清香、明快，風(fēng)味清爽，它是由果汁發(fā)酵產(chǎn)生的。果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用________來(lái)檢驗(yàn)。 (3)嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵，直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物，通常所指的發(fā)酵條件包括________________(至少寫(xiě)出兩項(xiàng))。 (4)下列方案能對(duì)發(fā)酵過(guò)程中使用的菌種進(jìn)行分離的是________。 A.用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選 B.用尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選 C.在常規(guī)培養(yǎng)基中加入青霉素進(jìn)行篩選 D.在小麥試驗(yàn)田中噴灑赤霉素進(jìn)行篩選 (5)蘋果酒在________的作用下，經(jīng)過(guò)深層發(fā)酵可形成蘋果醋；在此過(guò)程中，發(fā)酵溫度要嚴(yán)格控制在________；同時(shí)要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________。 9.(xx信陽(yáng)三門峽聯(lián)考)1963年諾和諾德公司向洗滌劑中加入堿性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉。堿性蛋白酶一般利用枯草芽孢桿菌生產(chǎn)。圖甲、乙為某科研小組對(duì)堿性蛋白酶相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行測(cè)試的結(jié)果。圖丙、丁為兩種常見(jiàn)的平板劃線法：連續(xù)劃線法和四區(qū)劃線法，前者適用于純化菌種較少的樣品，后者適用于純化菌種較多的樣品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)由圖甲、乙可知，堿性蛋白酶發(fā)揮作用的適宜條件為 ______________________________________________________________________。 (2)圖丁中依次進(jìn)行四區(qū)劃線，四區(qū)的面積要求為C＜D＜E＜F，F(xiàn)區(qū)面積最大的原因是________________。每次劃線后都要________接種環(huán)，注意F區(qū)劃線不要與________(填字母)區(qū)相連。 (3)某興趣小組欲從土壤中分離枯草芽孢桿菌，宜選擇圖________所示的方法劃線培養(yǎng)，分離得到的純化單菌落屬于________(填“種群”或“群落”)。 (4)堿性蛋白酶是枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)后期向細(xì)胞外分泌的一種酶，與該酶合成有關(guān)的細(xì)胞器是________。若欲應(yīng)用固定化技術(shù)提高該酶的利用率，減少產(chǎn)物中的雜質(zhì)，則應(yīng)采用________方法。 課時(shí)考點(diǎn)39　生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 1.(xx課標(biāo)卷Ⅱ，39)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問(wèn)題： (1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是________(填“α胡蘿卜素”“β胡蘿卜素”或“γ胡蘿卜素”)，該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子________，后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥，該疾病稱為_(kāi)_______，胡蘿卜素是________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。 (2)工業(yè)生產(chǎn)上，用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時(shí)，________(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。 (3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑，應(yīng)選用其中的________作為胡蘿卜素的萃取劑，不選用另外一種的理由是________________。 2.(xx江蘇卷，25)(多選)圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下列敘述正確的是(　　) A.圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同 B.圖1中完成過(guò)濾之后保留濾液 C.圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液 D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì) 3.(xx江蘇卷，16)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A.酵母菌和菜花均可作為提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水 C.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁梢?jiàn)玻棒上有白色絮狀物 D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán) 4.(xx重慶理綜，5)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞 C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控 D.生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑 5.(xx四川卷，1)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過(guò)程中，下列生命活動(dòng)不會(huì)同時(shí)發(fā)生的是(　　) A.細(xì)胞的增殖與分化 B.光能的吸收與轉(zhuǎn)化 C.ATP的合成與分解 D.基因的突變與重組 6.(xx江蘇卷，29)為了探索海藻酸鈉固定化對(duì)綠球藻生長(zhǎng)的影響，以及固定化藻對(duì)含Zn2＋污水的凈化作用，科研人員用篩選到的一株綠球藻進(jìn)行試驗(yàn)，流程及結(jié)果如下。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： ―→―→ (1)實(shí)驗(yàn)中的海藻酸鈉作用是________，CaCl2的作用是________。 (2)為洗去凝膠球上殘余的CaCl2和其他污染物，并保持綠球藻活性，宜采用________洗滌。圖1中1.0%海藻酸鈉培養(yǎng)24 h后，移去凝膠球，溶液呈綠色，原因是___________________________________________________________。 (3)為探索固定化藻對(duì)含Zn2＋污水的凈化作用，應(yīng)選用濃度為_(kāi)_______海藻酸鈉制備凝膠球。 (4)圖2中空白凝膠球組Zn2＋濃度下降的原因是________。結(jié)合圖1和圖2分析，固定化藻的實(shí)驗(yàn)組24～48 h間Zn2＋濃度下降速度較快的主要原因是 ______________________________________________________________________； 72～96 h間Zn2＋濃度下降速度較慢的原因有______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________。 1.(xx臨沂一模)人們利用五味子根切塊誘導(dǎo)形成愈傷組織，然后分離成單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，通過(guò)懸浮培養(yǎng)得到細(xì)胞培養(yǎng)物，提取五味子降三萜類化合物，該化合物能很好地抑制病毒和癌細(xì)胞，其衍生物具有強(qiáng)抗HIV活性。 請(qǐng)回答： (1)用于離體培養(yǎng)的根切塊叫作________，誘導(dǎo)其進(jìn)行________形成愈傷組織時(shí)常用的激素是________。 (2)在配制MS培養(yǎng)基時(shí)常用的凝固劑是________，往往向培養(yǎng)基中加入適量的蔗糖的目的是________。制備好的培養(yǎng)基常用________法滅菌。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若出現(xiàn)有顏色的絨毛狀菌落，則屬于________污染。 (3)用酶解法將愈傷組織分離成單個(gè)細(xì)胞時(shí)，常用的酶是________。 (4)利用萃取法提取五味子降三萜類化合物，干燥時(shí)，要注意控制________，萃取的效率主要取決于萃取劑的________，同時(shí)還受含水量等條件的影響。 2.(xx銀川市唐徠中學(xué)月考)科學(xué)家已成功地將一些植物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整的新植物。請(qǐng)根據(jù)下面實(shí)驗(yàn)過(guò)程示意圖分析回答下列問(wèn)題。 (1)植物組織培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，原因是培養(yǎng)基中添加了________，培養(yǎng)基的主要成分是________、________、有機(jī)物和激素。 (2)③過(guò)程在生物技術(shù)中稱為_(kāi)_______，由單個(gè)細(xì)胞形成細(xì)胞團(tuán)需要經(jīng)過(guò)________過(guò)程。 (3)④過(guò)程由細(xì)胞團(tuán)形成胚狀體要經(jīng)過(guò)________過(guò)程，其結(jié)果是________________。此實(shí)驗(yàn)成功證明了________________。 3.(xx蘭州統(tǒng)考)江西人喜歡吃辣椒，以“不怕辣”著稱。辣椒中產(chǎn)生辣味的物質(zhì)是辣椒素，不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛和消炎作用，能夠起到降血壓和降膽固醇的功效，應(yīng)用前景廣闊。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題： (1)根據(jù)辣椒素的性質(zhì)，我們可以用萃取的方法提取。萃取的效率主要取決于____________________，同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量等條件的影響。萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是________________________。萃取過(guò)程中應(yīng)采用________加熱，原因是___________________________________。 (2)如果要用植物組織培養(yǎng)的方法對(duì)具有優(yōu)良性狀的辣椒進(jìn)行大規(guī)模種植，在對(duì)辣椒外植體進(jìn)行接種前，需要進(jìn)行________、________兩項(xiàng)工作。 (3)辣椒的組織培養(yǎng)過(guò)程依據(jù)的原理是________，整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程要在________條件下進(jìn)行。 4.(xx沂州聯(lián)考)根據(jù)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的相關(guān)知識(shí)及胡蘿卜素的性質(zhì)，回答下列問(wèn)題。 (1)胡蘿卜素是________色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用________作為溶劑，原因是__________________________________________________________。 (2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、________、________、________。 (3)在胡蘿卜顆粒的加熱過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格將________和________控制在一定范圍內(nèi)，原因是_______________________________________________________________。 (4)提取胡蘿卜素可通過(guò)________法進(jìn)行鑒定，在鑒定過(guò)程中需要用________對(duì)照。 (5)一般情況下，提取胡蘿卜素時(shí)，提取效率與原料顆粒的含水量成________比。 5.(xx巴中市高三“零診”)生物技術(shù)與我們的生活息息相關(guān)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)PCR技術(shù)能把某DNA分子片斷進(jìn)行擴(kuò)增，依據(jù)的原理是________；每次循環(huán)需要經(jīng)過(guò)________、復(fù)性、延伸三步。 (2)在果醋制作時(shí)，運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)________和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以利用酒精生成醋酸。請(qǐng)寫(xiě)出酒精生成醋酸的化學(xué)反應(yīng)式：________________________。 (3)制作泡菜時(shí)蔬菜在腌制過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在________條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生________反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色溶液。 (4)進(jìn)行月季花藥離體培養(yǎng)，一般選擇在五月初到五月中旬開(kāi)的花。對(duì)于花粉而言，要采用________期的花粉，為了鑒定該時(shí)期的花粉，常采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色鑒定。若是某些植物花粉細(xì)胞不易著色，常采用________法染色，能將花粉的細(xì)胞核染成________色。 (5)分離、純化菌種時(shí)為得到單菌落，常用________法和________法接種。 6.(xx湖南郴州質(zhì)監(jiān))根據(jù)所學(xué)知識(shí)回