興 義 八 中 陳 玉 嬌 尿 素 CO(NH2)2 重 要 的 農 業(yè) 氮 肥 。只 能 被 土 壤 中 細 菌 分 解 為 NH3才 能 被 植 物 吸 收 利 用 CO(NH2)2 + H2O CO2 + 2NH3細 菌 脲 酶一 、 課 題 背 景 （ 一 ） 篩 選 菌 株1、 選 擇 培 養(yǎng) 基 ： 允 許 特 定 種 類 的 微 生 物 生 長 ，同 時 抑 制 或 阻 止 其 他 種 類 微 生 物 生長 的 培 養(yǎng) 基 。2、 菌 株 ： 純 且 活 狀 態(tài) 所 保 存 的 菌 種 。 例 ： 兩 位 同 學 用 稀 釋 涂 布 平 板 法 測 定 同 一 土 壤 樣 品 中 的 細 菌 數 。 從 對 應 稀 釋 倍 數 為106的 培 養(yǎng) 基 中 ， 得 到 以 下 兩 種 統(tǒng) 計 結 果 。 1、 甲 同 學 在 該 濃 度 下 涂 布 了 一 個 平 板 ， 統(tǒng) 計 的菌 落 數 為 230。 2、 乙 同 學 在 該 濃 度 下 涂 布 了 A、 B、 C三 個 平 板 ，統(tǒng) 計 的 菌 落 數 分 別 為 21、 212、 256， 該 同 學 以 這 三個 平 板 上 菌 落 數 的 平 均 值 163作 為 統(tǒng) 計 結 果 。 你 認 為 這 兩 位 同 學 的 的 結 果 誰 更 接 近 真 實 值 ？這 兩 位 的 實 驗 需 要 改 進 嗎 ？ 甲 ： 沒 有 重 復 實 驗 （ 至 少 涂 布 3個 平 板 ） 乙 ： A組 結 果 誤 差 過 大 ， 不 應 用 于 計 算 平 均 值 如 何 對 細 菌 進 行 計 數 ？ 如 何 對 細 菌 進 行 計 數 ？ 土壤，天然培養(yǎng)基，含有大量的微生物，其中70 90是細菌。在富含有機質的土壤層的3-8cm處中分布著絕大多數的細菌取樣要求：鏟去表層土 取 土 樣 用 的 小 鐵 鏟 和 盛 土 樣 的 的 信 封 在 使 用前 都 要 滅 菌 。 制 備 以 尿 素 為 唯 一 氮 源 的 選 擇 培 養(yǎng) 基 。 實 驗 時 要對 培 養(yǎng) 皿 作好 標 記 。 注明 培 養(yǎng) 基 類型 、 培 養(yǎng) 時間 、 稀 釋 度 、培 養(yǎng) 物 等 。 關 注 菌 落 的 形 態(tài) 、 大 小 、 邊 緣 、 突 起 、 顏 色 、質 地 等 等 ， 都 是 區(qū) 分 細 菌 的 重 要 手 段 。 關 注 菌 落 的 形 態(tài) 、 大 小 、 邊 緣 、 突 起 、 顏 色 、質 地 等 等 ， 都 是 區(qū) 分 細 菌 的 重 要 手 段 。 關 注 菌 落 的 形 態(tài) 、 大 小 、 邊 緣 、 突 起 、 顏 色 、質 地 等 等 ， 都 是 區(qū) 分 細 菌 的 重 要 手 段 。 1.對 細 菌 群 體 生 長 規(guī) 律 測 定 的 正 確 的 表 述 是 （ ） A.在 液 體 培 養(yǎng) 基 上 進 行 B.至 少 接 種 一 種 細 菌 C.接 種 一 個 細 菌 D.及 時 補 充 消 耗 的 營 養(yǎng) 物 質 2.使 用 選 擇 培 養(yǎng) 基 的 目 的 是 （ ） A.培 養(yǎng) 細 菌 B.培 養(yǎng) 真 菌 C.使 需 要 的 微 生 物 大 量 繁 殖 D.表 現 某 微 生 物 的 特 定 性 狀 與 其 他 微 生 物 加 以 區(qū) 別3.能 合 成 脲 酶 的 微 生 物 所 需 要 的 碳 源 和 氮 源 分 別 是( ) A.CO 2和 N2 B.葡 萄 糖 和 NH3 C.CO2和 尿 素 D.葡 萄 糖 和 尿 素 ACD 4.下 列 說 法 不 正 確 的 是 （ ） A.科 學 家 從 70 80度 熱 泉 中 分 離 到 耐 高 溫 的 TaqDNA聚合 酶 B.統(tǒng) 計 某 一 稀 釋 度 的 5個 平 板 的 菌 落 數 依 次 為 M1、 M2、M3、 M4、 M5， 以 M3作 為 該 樣 品 菌 落 數 的 估 計 值 C.設 置 對 照 實 驗 的 主 要 目 的 是 排 除 實 驗 組 中 非 測 試 因素 對 實 驗 結 果 的 影 響 ， 提 高 實 驗 結 果 的 可 信 度 D.同 其 他 生 物 環(huán) 境 相 比 ， 土 壤 中 的 微 生 物 數 量 最 大 ，種 類 最 多 。5.為 培 養(yǎng) 和 分 離 出 酵 母 菌 并 淘 汰 雜 菌 ， 常 在 培 養(yǎng) 基 中加 入 （ ） A.較 多 的 氮 源 物 質 B.較 多 的 碳 源 物 質 C.青 霉 素 類 藥 物 D.高 濃 度 食 鹽BC 六 、 例 題 解 析 例 1 對 細 菌 群 體 生 長 規(guī) 律 測 定 的 正 確 的 表 述 是A 在 液 體 培 養(yǎng) 基 上 進 行 B 至 少 接 種 一 種 細 菌 C 接 種 一 個 細 菌 D 及 時 補 充 消 耗 的 營 養(yǎng) 物 質 解 析 ： 細 菌 群 體 生 長 規(guī) 律 的 測 定 是 人 們 在 一 定 條 件下 進 行 的 。 這 些 條 件 是 ： 一 種 細 菌 、 恒 定 容 積 的 培 養(yǎng)基 ， 液 體 培 養(yǎng) 基 、 定 時 測 定 細 菌 總 數 。 在 這 些 條 件 下 ，才 能 測 定 出 細 菌 的 生 長 規(guī) 律 。 測 定 時 只 能 用 一 種 細 菌的 子 細 胞 群 體 的 變 化 規(guī) 律 表 達 微 生 物 的 生 長 ； 恒 定 容積 是 給 微 生 物 提 供 一 定 的 生 存 環(huán) 境 ； 液 體 培 養(yǎng) 基 才 能通 過 樣 品 推 測 細 菌 總 數 。 若 接 種 多 種 細 菌 ， 則 會 發(fā) 生種 間 斗 爭 而 不 能 測 定 一 種 微 生 物 的 生 長 規(guī) 律 。 在 接 種時 ， 要 保 證 一 定 的 接 種 量 。 答 案 ：A 例 2 在 微 生 物 群 體 生 長 規(guī) 律 的 測 定 中 ， 種 內斗 爭 最 顯 著 最 激 烈 的 時 期 是 A 調 整 期 B 對 數 期 C 穩(wěn) 定 期 D 衰 亡 期 解 析 ： 種 內 斗 爭 是 一 種 生 態(tài) 因 素 。 種 內 斗 爭 反 應 了種 內 生 物 對 生 存 空 間 和 生 活 資 源 的 爭 奪 。 在 生 活 空 間 充裕 ， 營 養(yǎng) 充 足 的 時 候 ， 種 內 斗 爭 的 程 度 是 比 較 低 的 。 隨著 微 生 物 個 體 數 目 的 增 加 ， 每 個 個 體 的 生 存 空 間 越 來 越少 ， 營 養(yǎng) 物 質 也 越 來 越 少 ， 每 個 個 體 對 生 存 空 間 和 資 源的 爭 奪 也 越 來 越 激 烈 ， 種 內 斗 爭 就 越 來 越 激 烈 。 由 此 可知 ， 在 穩(wěn) 定 期 的 種 內 斗 爭 最 激 烈 。 在 衰 亡 期 ， 微 生 物 的數 目 已 經 開 始 減 少 ， pH已 經 極 度 不 適 于 微 生 物 的 生 存 ，次 級 代 謝 產 物 積 累 到 很 高 的 程 度 ， 這 時 的 微 生 物 的 生 存斗 爭 主 要 是 與 無 機 環(huán) 境 的 斗 爭 。 答 案 ： C