2019-2020年高中生物 第30課 動(dòng)物細(xì)胞工程教案 新人教版必修3考試說明具體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)等級(jí)生物課程標(biāo)準(zhǔn)學(xué)習(xí)要求動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆A簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及其應(yīng)用簡(jiǎn)述克隆動(dòng)物的概念和原理簡(jiǎn)述體細(xì)胞核移植技術(shù)和體細(xì)胞克隆及其應(yīng)用前景關(guān)注體細(xì)胞克隆技術(shù)的安全性和倫理性問題細(xì)胞融合與單克隆抗體 A簡(jiǎn)說出述動(dòng)物細(xì)胞融合的方法和過程說出 單克隆抗體的制備過程及其應(yīng)用認(rèn)同細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間的關(guān)系關(guān)注細(xì)胞工程研究的發(fā)展和應(yīng)用前景一、教學(xué)內(nèi)容及考綱要求二、重要的結(jié)論性語句：1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。2、原代培養(yǎng)階段，培養(yǎng)的細(xì)胞最接近于體內(nèi)組織或細(xì)胞的生長(zhǎng)特性，很適合用于藥物測(cè)試、基因表達(dá)等實(shí)驗(yàn)研究。3、一般情況下，傳代培養(yǎng)1050次后，細(xì)胞增殖會(huì)明顯減緩，甚至完全停止。少部分細(xì)胞的細(xì)胞核型發(fā)生變化，獲得不死性。4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要嚴(yán)格的環(huán)境條件，包括無菌無毒、溫度、pH、氣體和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如葡萄糖、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素和生長(zhǎng)因子等。在使用合成培養(yǎng)基時(shí)還需加入動(dòng)物血清等天然成分）。5、動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新胚胎，并最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。6、細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。7、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的最重要的用途之一是制備單克隆抗體。8、單克隆抗體制備中，第一次篩選：用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次篩選：通過抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。9、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體。10、單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的特異性強(qiáng)、靈敏度高，并能大量制備。三、重、難點(diǎn)知識(shí)歸類、整理1、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)原理細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基物理性質(zhì)固體液體化學(xué)成分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、動(dòng)物血清培養(yǎng)材料常用植物幼嫩部位或花藥常用動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織培養(yǎng)結(jié)果培育成植株培育成細(xì)胞株或細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品等聯(lián)系均為無菌操作,需要適宜的溫度,pH值,O2等條件2、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合方法酶解法去細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、振動(dòng)、電刺激、聚乙二醇誘導(dǎo)（同上）再加上滅活的病毒誘導(dǎo)用途獲得雜種植株主要：制備單克隆抗體3、受精作用、原生質(zhì)體融合、動(dòng)物細(xì)胞融合受精作用原生質(zhì)體融合動(dòng)物細(xì)跑融合不同細(xì)胞類型精子與卵細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞細(xì)胞來源來自同一生物個(gè)體一般來自不同種的生物個(gè)體一般來自不同種的生物個(gè)體染色體數(shù)目變化2N2N1+2N22N1+2N2融合條件不需人工誘導(dǎo)需人工誘導(dǎo)需人工誘導(dǎo)同都有兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，并且融合成這個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)都是由原來的兩個(gè)細(xì)胞決定的4、試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物試管動(dòng)物（嬰兒）:。通過體外受精和胚胎移植技術(shù)而產(chǎn)生的動(dòng)物或嬰兒，其實(shí)質(zhì)是通過有性生殖而形成的后代。在這一技術(shù)過程中，精子和卵子從動(dòng)物（人）體內(nèi)取出來，在人工提供的生活條件下（通常是在試管中）進(jìn)行受精，并讓體外受精的受精卵在試管中發(fā)育，再把發(fā)育到一定階段的胚胎移植到“代理母親”動(dòng)物（人）的子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育直到誕生。 克隆動(dòng)物：一般是指通過無性繁殖形成動(dòng)物后代。將供體體細(xì)胞的細(xì)胞核與受體去核卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行人工組合，借助卵細(xì)胞的發(fā)育能力，經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進(jìn)而形成個(gè)體?？寺∈侵笩o性繁殖系，具體地說，是指從一個(gè)共同的祖先，通過無性繁殖的方法產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子、細(xì)胞或個(gè)體?？寺∫部芍笩o性繁殖的過程。5、動(dòng)物細(xì)胞工程與基因工程、胚胎工程的聯(lián)系 動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞，因此基因工程離不開動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)?？寺?dòng)物則是通過體細(xì)胞核移植形成的重組細(xì)胞發(fā)育成的胚胎也要經(jīng)過胚胎移植等胚胎工程技術(shù)完成。四、例題解析：例1：下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是A 電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合B 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C 小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體D 某種植物甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同例2：下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解，請(qǐng)根據(jù)圖回答下列問題：請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆制備過程的順序連接起來。在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有 、 的特性。由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了 和 的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。課堂練習(xí)一 、單選題：1為了使用于培養(yǎng)的動(dòng)物組織細(xì)胞分散開以便配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取來的動(dòng)物組織應(yīng)選用下列哪種物質(zhì)處理A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.鹽酸 D.胰脂肪酶2在克隆多利羊的過程中，下列哪項(xiàng)技術(shù)沒有運(yùn)用到A.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B.細(xì)胞核移植 C.胚胎移植技術(shù) D.基因工程技術(shù)3科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞4動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞5能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動(dòng)6一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能 （ ）A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體C用于保存物種 D改變動(dòng)物的基因型7單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是（ ）B淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞A B C D8植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)與原理不相符的是 A纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理酶的專一性 B植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的全能性 C原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合生物膜的流動(dòng)性 D紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)細(xì)胞分裂9在下列自然現(xiàn)象或科學(xué)研究成果中，能為“動(dòng)物細(xì)胞具有全能性”觀點(diǎn)提供直接證據(jù)的是A壁虎斷尾后重新長(zhǎng)出尾部 B蜜蜂的未受精卵細(xì)胞發(fā)育成雄蜂C用體外培養(yǎng)的皮膚治療燒傷病人 D小鼠腺細(xì)胞的自我復(fù)制10利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是A用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者11下列哪一項(xiàng)屬于克隆A將雞的某個(gè)DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系二、多選題：12下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是（ ）AB淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般不需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)B融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體C體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖D單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯13（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細(xì)胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)的是（ ）A.效應(yīng)B細(xì)胞 BT淋巴細(xì)胞 C.骨髓瘤細(xì)胞 D雜交瘤細(xì)胞三、非選題：14右圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_ 處理，除去了；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是。融合完成的標(biāo)志是。（2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（3）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自 ，然后用 使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是 ，所形成的D稱為 ，A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有 。（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了_，圖中B為 。（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有 種（只考慮兩兩融合），用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是 。從中選擇出它的方法是 培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 。15.兩場(chǎng)籌備了10年的“太空結(jié)合”首次在神舟八號(hào)飛船上舉行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,新人在“產(chǎn)房”電融合儀內(nèi)孕育新生命。160min后,中國(guó)首批“太空娃娃”終于順利誕生?！疤胀尥蕖闭Q生和地面實(shí)驗(yàn)如圖所示。請(qǐng)回答下列問題：(1)小白鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞能融合在一起,體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有_的特點(diǎn)。(2)若用于SARS的預(yù)防上,則宜采用_細(xì)胞?？茖W(xué)工作者正在研究治療癌癥使用的生物導(dǎo)彈是_。(3)B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞都是由_細(xì)胞形成的。這種相同細(xì)胞的后代,在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上產(chǎn)生穩(wěn)定差異的過程,叫做 _。(4)鼠的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,在培養(yǎng)時(shí)通過_（有絲/減數(shù)）分裂方式大量繁殖。細(xì)胞中染色體數(shù)目與淋巴細(xì)胞相比有何特點(diǎn)？_；要觀察融合后的細(xì)胞中的染色體形態(tài)、數(shù)目,可用一定濃度的 處理。(5)融合的細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的特性,即_和_。課后練習(xí)一、單選題：1下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是A培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無限地增殖C人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株D用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞2單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是A特異性強(qiáng)、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌3關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 A可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)4下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述中，錯(cuò)誤的是 A植物細(xì)胞融合必須先制備原生質(zhì)體 B試管嬰兒技術(shù)包括人工受精和胚胎移植兩方面C經(jīng)細(xì)胞核移植培育出新個(gè)體只具有一個(gè)親本的遺傳性狀 D用于培養(yǎng)的植物器官或?qū)儆谕庵搀w5用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇（PEG）作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體6人類寄希望于利用干細(xì)胞（人體中具有分裂、分化能力的細(xì)胞）的分離和體外培養(yǎng)，在體外培育出組織器官，并最終通過組織或器官移植實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床疾病的治療。能否用肌細(xì)胞代替干細(xì)胞 A不能，因?yàn)榧〖?xì)胞與干細(xì)胞所含有的遺傳物質(zhì)不同B不能，因?yàn)榧〖?xì)胞是高度分化的細(xì)胞，沒有分裂能力C能，因?yàn)榧〖?xì)胞雖然是分化的細(xì)胞，但在一定條件下也可脫分化，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性D能，因?yàn)榧〖?xì)胞與干細(xì)胞具有完全相同的遺傳物質(zhì)7下列屬于組織培養(yǎng)但不是克隆的是（ ）A將花粉離體培養(yǎng)成單倍體植株 B芽發(fā)育成枝條C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D上皮細(xì)胞無性繁殖產(chǎn)生的細(xì)胞群8動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液和植物組織培養(yǎng)液的共有成分是（ ）A葡萄糖 B蔗糖 C動(dòng)物血清 D維生素9動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞來自于（ ）A任何個(gè)體的細(xì)胞B只能取自動(dòng)物胚胎細(xì)胞C只能取自幼齡動(dòng)物的組織細(xì)胞D胚胎或幼齡動(dòng)物的器官和組織細(xì)胞10動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是 （ ）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) B動(dòng)物細(xì)胞融合 C單克隆杭體 D胚胎、核移植11.“生物導(dǎo)彈”是指 （ ）A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單抗上連接抗癌藥物12.如用動(dòng)物的細(xì)胞進(jìn)行克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇的細(xì)胞核不能是（ ） A、乳腺細(xì)胞的 B、卵細(xì)胞的 C、胃腺細(xì)胞的 D、囊胚時(shí)期的胚胎細(xì)胞的13單克隆抗體制備過程中使用的骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞，在含有次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基（HAT）中無法生長(zhǎng)；而小鼠脾細(xì)胞是正常細(xì)胞，在HAT培養(yǎng)基上可正常存活。用聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合后，經(jīng)過數(shù)代培養(yǎng)，最終可在HAT培養(yǎng)基上存活并能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是 （ ）A骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 B脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 C骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞 D脾細(xì)胞14研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（ ）A利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞 B以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成 D單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合15用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞 （ ）A.容易產(chǎn)生各種變異 B具有更強(qiáng)的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強(qiáng)16動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A.B. C.D.17有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白C細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中D培養(yǎng)至50代后能繼續(xù)傳代的傳代細(xì)胞叫細(xì)胞株二.多選題18關(guān)于制備單克隆抗體的敘述不正確的是A單克隆抗體產(chǎn)自淋巴細(xì)胞 B單克隆抗體的制備要經(jīng)過細(xì)胞融合C單克隆抗體的獲得不需要使細(xì)胞癌變D必須同時(shí)在體內(nèi)和體外培養(yǎng)挑選出所需抗體的細(xì)胞群19對(duì)細(xì)胞全能性的表述不正確的有 A沒有離體植物細(xì)胞也能表現(xiàn)出全能性 B動(dòng)物細(xì)胞融合標(biāo)志著動(dòng)物細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn)C單克隆抗體的制備原理依據(jù)是細(xì)胞的全能性 D花粉可培育成單倍體，是細(xì)胞全能性的體現(xiàn)20將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合，可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是AB淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合后才能產(chǎn)生抗體BB淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖C骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 D骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體21動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從該圖提供的信息可以獲得的正確結(jié)論有 : A正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同 B.有無血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同 C培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng) D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大三、非選題：22、下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合），請(qǐng)據(jù)圖回答： I若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個(gè)煙草品種細(xì)胞的花粉，且這兩對(duì)基因位于非同源染色體上，由于一對(duì)隱性純合基因(rr或hh) 的作用，在光照強(qiáng)度大于800勒克斯時(shí)，都不能生長(zhǎng)。 （1）實(shí)驗(yàn)開始時(shí)必須用 除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。 （2）實(shí)驗(yàn)中除獲得雜種細(xì)胞外，還有基因型為 的融合細(xì)胞。 （3）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，方法： （4）將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株依據(jù)的理論基礎(chǔ)是 。 II若該過程是制備治療“SARS”病毒的單克隆抗體，A為人B淋巴細(xì)胞（染色體組成為2AXX=46），B為鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體組成為2AXX=40） （5）用單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”主要利用了抗體的 特性。 （6）A細(xì)胞來自于 ，雜種細(xì)胞C共有 個(gè)染色體組。 （7）雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)與植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是培養(yǎng)基要用 培養(yǎng)基。（物理狀態(tài)），培養(yǎng)基中除了添加必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為還需加入 。23、肺癌在全國(guó)的發(fā)病率居腫瘤之首，小細(xì)胞肺癌是惡性程度最高的一種，上海肺癌研究所細(xì)胞與分子免疫研究室在國(guó)內(nèi)率先研制出一種名叫“2F7”的靶向生物導(dǎo)彈。這種生物導(dǎo)彈是一種專門對(duì)小細(xì)胞肺癌產(chǎn)生特定靶向性的特異性單克隆抗體。注入靜脈后，會(huì)“直撲”小細(xì)胞肺癌病灶，使其攜帶的腫瘤化療藥物能“集中火力”抑制、殺滅腫瘤細(xì)胞。這預(yù)示著化療藥物有望彌補(bǔ)“良莠不分”、損害全身免疫力的缺陷。（1）制備單克隆抗體的原理是 。（2）制備單克隆抗體用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段有 。（3）單克隆抗體是由 細(xì)胞產(chǎn)生的。（4）靜脈注入而不是口服單克隆抗體的原因是 。（5）單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的過程屬于 免疫的 階段。24為某同學(xué)根據(jù)右圖雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案，據(jù)圖回答：1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？_原因是_。（2）圖中為_過程，常用_作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承了_，因此不僅能分泌_，還有_本領(lǐng)。（3）破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可以從_和_中提取。（4）該方案的目的是_。25、右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：（1）給小鼠注射抗原的目的是_。（2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_的特性。（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_ _和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是可用_。（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有_。（5）在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開，以利于細(xì)胞融合，可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散開。（6）圖中有兩次篩選過程，其中步驟的目的是篩選出_ _，步驟的目的是篩選出_ _。（7）請(qǐng)根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法：_ _。原理：_ _26、(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂長(zhǎng)年到細(xì)胞表面 時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是 。 (2)隨首細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)面出現(xiàn) 的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變面變成 細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性 ，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被污色，而活細(xì)胞不染色，原因是 。(4) 檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染一的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在 條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中 的活性降低，細(xì)胞 的速率降低。(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作 進(jìn)行攻擊。27、現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列有關(guān)問題。 實(shí)驗(yàn)原理： 根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(以下稱Q值)，可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。 材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。 實(shí)驗(yàn)步驟： (1)制備細(xì)胞懸浮液。把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。 (2)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。取A、B、C 3個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶， ；A、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻； (3)制作臨時(shí)裝片。當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相；靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央， ，3min5min后，蓋上蓋玻片。（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于 期的細(xì)胞，并與 進(jìn)行對(duì)比，統(tǒng)計(jì)并計(jì)算該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(Q值)。.結(jié)果分析與結(jié)論：（1）經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是 。（2）在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起 作用，C瓶的Q值說明 。28、自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物眼蟲，這說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動(dòng)物細(xì)胞中存活。某同學(xué)提出問題“動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎？”他嘗試設(shè)計(jì)出下列具體的實(shí)驗(yàn)方案。結(jié)合實(shí)驗(yàn)方案回答：實(shí)驗(yàn)原理：根據(jù)眼蟲的特點(diǎn)，動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞之間在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。實(shí)驗(yàn)步驟如下：（1）中選的植物材料細(xì)胞中，必須有的細(xì)胞器是 。（2）過程所用的酶是 和 （3）過程除了用電激之外，還可以用 、 等做誘導(dǎo)因素。（4）過程動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是 、 、 、 。（5）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，要強(qiáng)調(diào)所用的器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作，原因是 。 （6）在過程中，通常要添加血清，原因是 。（7）如果讓動(dòng)植物雜交種批量培養(yǎng)生產(chǎn)，可以用 技術(shù)。（8）動(dòng)植物雜交種細(xì)胞是否有細(xì)胞壁？ 。理由是 。第30課 動(dòng)物細(xì)胞工程答案例1：解析：植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合均需誘導(dǎo)，誘導(dǎo)方法可以是電刺激等物理方法，聚乙二醇處理等化學(xué)方法，動(dòng)物細(xì)胞還常用滅活的病毒誘導(dǎo)融合。去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁常用纖維素酶和果膠酶，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞常用胰蛋白酶。小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞的主要用途是制備單克隆抗體。某種植物（如：染色體數(shù)目為2N），甲乙兩品種的體細(xì)胞雜種的染色體數(shù)目是兩品種體細(xì)胞染色體數(shù)之和（4N），甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目不改變（2N）。 選D例2：解析：?jiǎn)慰寺】贵w的制備是利用了雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)，單克隆抗體的制備包括誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞融合，經(jīng)過多次篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)體外或體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲得單克隆抗體，其中重要的技術(shù)手段包括動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等。 在體外大量繁殖 產(chǎn)生特異性抗體 動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)課堂練習(xí)1B2D3A4B5B6D7A8B9B10D11D12BCD13ABCD14（1）纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁 離心、振動(dòng)、電激 產(chǎn)生新的細(xì)胞壁 （2）植物組織培養(yǎng) （3）幼齡動(dòng)物的組織或器官或胚胎 胰蛋白酶 滅活的病毒誘導(dǎo) 雜種細(xì)胞 流動(dòng)性 （4）抗原 效應(yīng)B細(xì)胞、記憶細(xì)胞、抗體 骨髓瘤細(xì)胞 （5）3 雜交瘤細(xì)胞 用特定選擇培養(yǎng)基 小鼠腹腔內(nèi)增殖15（1）一定的流動(dòng)性 （2）SARS病毒感染后產(chǎn)生的效應(yīng)B細(xì)胞,單克隆抗體+抗癌藥物（3）造血干細(xì)胞 細(xì)胞分化（4）有絲加倍龍膽紫 （5）無限增值,產(chǎn)生單一抗體課后練習(xí)1D2C3D4C5B6B7A8D9D10A11D12B13C14D15D16C17A18ACD19ABC20BD 21BCD22（1）纖維素酶(或果膠酶)（2）rrHH、RRhh（3）置大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，收集分化的細(xì)胞團(tuán) （4）細(xì)胞的全能性 II （5）抗體與抗原結(jié)合，發(fā)揮特異性免疫效應(yīng) （6）非典患者2；（7）液體動(dòng)物血清23（1）每種效應(yīng)B細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體 瘤細(xì)胞能無限增殖 （2）動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（3）雜交瘤（4）抗體是蛋白質(zhì)，若口服則被消化，使抗體失去其功能（5）體液 效應(yīng)24（1）不能 因?yàn)闆]有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生此種抗體的效應(yīng)B細(xì)胞 （2）細(xì)胞融合 滅活的病毒（或聚乙二醇） 雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì) 特異性抗體 在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖 （3）培養(yǎng)液 小鼠腹水 （4）制備單克隆抗體25(1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 滅活病毒 (4)動(dòng)物血清(5)胰蛋白酶 (6)雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(7)方法：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖26（1）相互接觸 接觸抑制 單層（或一層）胰蛋白酶 （2）衰老甚至死亡 不死性降低減少 （3）由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色（或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色） （4）中 （5）冷凍（或超低溫、液氮）酶新陳代謝 （6）抗原27 I有毒物質(zhì)會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生染色體變異 (2)分別放人等量的細(xì)胞懸浮液 把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37(或適宜溫度)的恒溫箱中培養(yǎng) (3)加12滴龍膽紫溶液染色 (4)有絲分裂中小白鼠正常細(xì)胞有絲分裂中期高倍顯微照片 (1)甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性且乙的毒性比甲的毒性大 (2)對(duì)照動(dòng)物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體變異頻率非常低28葉綠體 纖維素酶和果膠酶 病毒 聚乙二醇（振蕩、離心、生物、化學(xué)因素等） 無菌、無毒的環(huán)境 營(yíng)養(yǎng) 溫度和pH 氣體環(huán)境 組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長(zhǎng)，所以組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長(zhǎng)的各種雜菌不但會(huì)和培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而且這些雜菌生長(zhǎng)的過程中會(huì)生成大量對(duì)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡（2分） 由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，通常加入血清、血漿等一些天然成分 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 無 因?yàn)榕咛ピ谀阁w子宮中完成胚胎發(fā)育