武漢工程大學 制藥工程部 藥理： 收縮血管、升高血壓、散大瞳孔、舒 張支氣管、遲緩胃腸肌、加速心率、加強心肌收縮力；臨床應用： 升壓、平喘、充血治療。 武漢工程大學 制藥工程部 結構 擬腎上腺素類藥物，分子結構中具有苯乙胺基本結構R1 HC OH HC R3 NH R2HO HOCl H2N Cl HOHOH 2C CH(CH3)2 C(CH3)3 CH3 CH3 CH3 H H H HCl HCl H2SO4 腎上腺素(adrenaline)鹽酸克倫特羅(clenbuterol hydrochloride)硫酸沙丁胺醇(salbutamol sulfate)鹽酸麻黃堿(ephedrine hydrochloride) R1 R2 R3 HX 武漢工程大學 制藥工程部 化學性質 R1 HCOH HCR3 NH R2 弱 堿 性：烴胺基側鏈，仲胺氮弱堿性，游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑；其鹽可溶于水酚羥基特性：鄰苯二酚（或苯酚）結構，與金屬離子絡合呈色；在空氣中或遇光、熱易氧化，色澤變深；在堿性溶液中更易變色。光學活性：手性碳原子，具有旋光性。苯環(huán)取代基特性：如鹽酸克倫特羅芳伯氨基；紫外、紅外吸收特性進行定性、定量分析。 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別試驗 (identification)與三氯化鐵反應、與甲醛硫酸反應藥物三氯化鐵甲醛硫酸腎上腺素Adrenaline 0.1mol/L鹽酸液中顯翠綠色，加氨試液顯紫色，紫紅色紅色重酒石酸去甲腎上腺素Noradrenaline bitartrate翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍色，紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素Phenylephrine hydrochloride紫色玫瑰紅，橙紅，深棕紅鹽酸異丙腎上腺素 Isoprenaline hydrochloride深綠色，滴加新制5%碳酸氫鈉液，顯藍紫色，紅色棕色，暗紫色鹽酸多巴胺Dopamine hydrochloride墨綠色，滴加1%氨溶液，顯紫紅色 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別試驗 (identification)氧化反應（酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀氧化呈現(xiàn)不同顏色）腎上腺素碘或過氧化氫中性或酸性腎上腺素紅放置鹽酸異丙腎上腺素偏酸性條件碘異丙腎上腺素紅硫代硫酸鈉重酒石酸去甲腎上腺素酒石酸氫鉀飽和液碘試液 放置5min硫代硫酸鈉溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色腎 上 腺 素或 鹽 酸 異 丙 腎 上 腺 素 明 顯 的 紅 棕 色或 紫 色 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別試驗 (identification)雙縮脲反應鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿，芳環(huán)側鏈具有氨基醇結構，可顯雙縮脲特征反應。例：Chp2000，鑒別鹽酸麻黃堿方法：取本品1%水溶液1ml，加硫酸銅試液2滴與20%氫氧化鈉液1ml，即顯藍紫色，加乙醚1ml振搖、放置，乙醚層顯紫紅色，水層變?yōu)樗{色。 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別試驗 (identification)與亞硝基鐵氰化鈉反應(Rimini試驗) HO HCOH HCCH 3 NH2重酒石酸間羥胺水溶解亞硝基鐵氰化鈉試液丙酮數(shù)滴，碳酸氫鈉少量脂肪伯氨基的專屬反應丙酮不含有甲醛 重酒石酸間羥胺的脂肪伯氨基 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別試驗 (identification)紫外特征吸收藥物溶劑濃度(mg/ml) nm (nm)吸收度 (A)重酒石酸間羥胺水0.10 272鹽酸異丙腎上腺素水0.05 280 0.50鹽酸多巴胺0.5%硫酸0.03 280鹽酸芬氟拉明0.1mol/L鹽酸0.25 263, 270鹽酸苯乙雙胍水0.01 234 0.60鹽酸克倫特羅0.1mol/L鹽酸0.03 243, 296硫酸沙丁胺醇水0.08 274 鹽酸偽麻黃堿水0.50 251, 257, 263紅外特征吸收：上述藥物還可采用紅外吸收光譜進行鑒別。 武漢工程大學 制藥工程部 特殊雜質檢查 (Detection of specific impurities)酮體檢查生產(chǎn)工藝：酮體氫化還原制得，若氫化不完全則引入酮體雜質。 藥物 檢查的雜質 溶劑樣品濃度(mg/ml)測定波長(nm) A腎上腺素 腎上腺酮H Cl(92000) 2.0 310不得過0.05鹽酸去氧腎上腺素 酮體 水 2.0 310不得大于0.20重酒石酸去甲腎上腺素去甲腎上腺酮 水 2.0 310不得大于0.05 鹽酸異丙腎上腺素 酮體 水 2.0 310不得大于0.15鹽酸甲氧明 酮胺 水 1.5 347不得大于0.06紫外分光光度法檢查酮體的條件及要求 武漢工程大學 制藥工程部 特殊雜質檢查 (Detection of specific impurities)TLC法檢查有關物質例 ：鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇檢查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取上述溶液適量，加甲醇稀釋成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對照溶液。吸取上述兩種溶液各10l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以異丙醇氯仿濃氨溶液(80:5:15)為展開劑，展開后，晾干，噴以重氮苯磺酸試液使顯色。供試品溶液如顯雜質斑點，與對照溶液的主斑點比較，不得更深。 武漢工程大學 制藥工程部 特殊雜質檢查 (Detection of specific impurities)鹽酸苯乙雙胍中有關雙胍的檢查（Chp2000版） 取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紙色譜法（附錄 A）試驗，精密吸取上述溶液0.2ml ，分別點于兩張色譜濾紙條(7.5cm 50cm) 上，并以甲醇作空白點于另一色譜濾紙條，樣點直徑均為0.5 1cm ；照下行法，將上述色譜濾紙條同置展開室內，以醋酸乙酯乙醇水(6:3:1) 為展開劑，展開至前沿距下端約7cm 處，取出，晾干，用顯色劑（取10鐵氰化鉀溶液1ml ，加10 亞硝基鐵氰化鈉溶液與10氫氧化鈉溶液各1ml ，搖勻，放置15min，加水10ml與丙酮 12ml，混勻）噴其中一張點樣紙條（有關雙胍顯紅色帶，R f值約為0.1 ），參照此色譜帶，在另一張點樣及空白紙條上，剪取其相應部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎條，精 密吸取甲醇各20ml分別進行萃取后，照分光光度法（附錄 A），在232nm 的波長處測定吸收度，不得過0.48。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定( )原 料：非水溶液滴定法、溴量法制 劑：比色法提取容量法紫外分光光度法高效液相色譜法 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )1、非水溶液滴定法弱堿性冰醋酸為溶劑醋酸汞消除氫鹵酸的干擾結晶紫為指示劑 （鹽酸甲氧明的指示劑為萘酚苯甲醇，也可電位法指示終點）若堿性較弱則加醋酐使突躍明顯例 ：重酒石酸去甲腎上腺素直接滴定 鹽酸克倫特羅加醋酸汞消除氫鹵酸干擾； 由于堿性較弱，電位法指示終點 硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突躍，結晶紫為指示劑 武漢工程大學 制藥工程部 四種非水溶劑：1.酸性溶劑：有機弱堿在酸性溶劑中可顯著增強其相對堿度，比如冰醋酸。2.堿性溶劑：比如DMF。3.兩性溶劑：比如甲醇。4.惰性溶劑：比如甲苯、三氯甲烷等。 武漢工程大學 制藥工程部 1. 酸 性 溶 劑 ： 常 用 冰 HAc 除 水（ 加 入 計 算 量 的 醋 酐 ）基準物：鄰苯二甲酸氫鉀（既可標定酸又可標定堿） COOK COOHCOOHCOOH HClO KClO44 +指示劑：結晶紫 2. 標準溶液：HClO4的冰HAc溶液 武漢工程大學 制藥工程部 基本原理置換反應：強酸置換弱酸的過程，故而所用的酸多為高氯酸。一般方法精密稱取供試樣品加冰醋酸溶解，加各規(guī)定試液，指示液1-2滴，用高氯酸滴定液滴定。終點以電位滴定時的突躍點為準。 武漢工程大學 制藥工程部 注意事項1.加入醋酐防止氨基被乙酐化，氨基乙酐化后堿性顯著減弱；2.低溫可以防止氨基乙酐化；3.仲氨基的乙?；?，以指示劑法和電位滴定法都不能被滴定；4.伯氨基的乙?；镆噪娢坏味ǚㄉ锌梢?； 武漢工程大學 制藥工程部 適用范圍：1.適用于pka8的有機弱堿性藥物及其鹽類的含量測定，但不同的堿性有不同的溶劑、滴定劑和指示方法；2.Pka=8-10,以冰醋酸為溶劑；10-12，醋酸加醋酐為溶劑；12以醋酐為溶劑；此外還可以加入乙酸，以利于堿性藥物的堿性增強，使突躍顯著增大。 武漢工程大學 制藥工程部 各種影響：1.醋酸汞可以消除鹽酸對滴定的影響；2.醋酸具有揮發(fā)，溫度和貯存條件影響滴定劑濃度；3.以電位滴定法來確定指示劑的終點顏色變化； 注 ： 加 入 醋 酐 注 意 防 止 氨 基 被 乙 酰 化 ， 所 以 在 冰 醋 酸 溶 解 樣 品 后 應 放 冷 后 再 加 醋 酐 。 武漢工程大學 制藥工程部 （3）加入醋酐可過量，但測 或 時不能過量。 （4）防凍 16以下 冰+醋酐混合溶劑 或加入丙酸 武漢工程大學 制藥工程部 3.溫度校正：冰HAC體積膨脹系數(shù)大，溫度，C，不標定，測定時結果偏高，可以用公式校正。4.指示劑（或用電位法）：結晶紫 紫色藍藍綠黃應用電位法確定時 空白校正 武漢工程大學 制藥工程部 （1）市售HClO4含水約為30.0，加入醋酐除去。（2）配制時（HClO4與醋酐反應劇烈 ） 配0.1M HClO4 1000ml，需HClO4 （70%） M=100.5 d=1.75, HClO4多少mL? V=8.2mL 用8.5mL 1.05.100 %7075.1 VC MLmLn 武漢工程大學 制藥工程部 3. 應用 1）胺類、氨基酸、含氮雜環(huán) 2）有機酸的堿金屬鹽 3）有機堿的氫鹵酸鹽 4）有機堿的有機酸鹽 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )2、溴量法基本原理： HO HCOHCH2NHCH3+3Br2 HO HCOHCH2NHCH3Br Br Br +3HBrBr2+2KI 2KBr+I2 I2+2Na2SO3 2NaI+Na2S4O6測 定 方 法 ：取本品約0.1g，精密稱定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴 滴定液(0.1mol/L)50ml，再加鹽酸5ml,立即密塞，放置15分鐘并時時振搖，注意微開瓶 塞，加碘化鉀試液10ml ，立即密塞，振搖后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至 近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。每 1ml溴滴定液(0.1mol/L)相當于3.395mg 的C9H 13NO2H Cl。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )3、比色法測定原理： Cl ClN2+Cl- CH(OH)CH2NH(CH3)3+ NHCH2CH2NH2 Cl ClN CH(OH)CH2NH(CH3)3 N NHCH2CH2NH2 2HNO2+2H2NSO3NH4 2N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O 注 意 ：由于偶合劑（N-(1-萘基)-乙二胺）與亞硝酸也能顯色干擾測定，所以在重氮化后，應加入氨基磺酸銨分解剩余的亞硝酸。 武漢工程大學 制藥工程部 比色法含量測定例 ：鹽酸克倫特羅栓（Chp2005）【含量測定】 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸克侖特羅對照品適量，加鹽酸溶液 (9100)制成每1ml 中含7.2g的溶液。 供試品溶液的制備 取本品20粒，精密稱定，切成小片，精密稱取適量（約相當于 鹽酸克侖特羅0.36mg），置分液漏斗中，加溫熱的氯仿20ml使溶解，用鹽酸溶液(9 100)振搖提取3 次(20ml、15ml、10ml) ，分取酸提取液，置50ml量瓶中，用鹽酸溶液(9 100)稀釋至刻度，搖勻，濾過，收集續(xù)濾液，即得。 測定法 精密量取對照品溶液與供試品溶液各15ml，分置25ml量瓶中，各加鹽酸溶 液(9100)5ml 與0.1 亞硝酸鈉溶液1ml ，搖勻，放置3 分鐘，各加0.5 氨 基磺酸 銨溶液1ml ，混勻，時時振搖10分鐘，再各加0.1 鹽酸萘乙二胺溶液1ml,混勻，放置 10分鐘，用鹽酸溶液(9100)稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄 B），在 500 nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )4、提取酸堿滴定法原 理 ：溶解性鹽酸鹽或硫酸鹽可溶于水，游離堿不溶于水，溶于有機溶劑。方 法 ：供試品溶于水或礦酸，加入適量堿性試劑使藥物游離，用適當?shù)挠袡C溶劑提取，將提取液蒸干，殘渣中加中性乙醇溶解，用標準酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量過量的標準酸滴定液，蒸去有機溶劑后，再用標準堿滴定液回滴定）。例 ：硫酸苯丙胺加水溶解加氫氧化鈉試液8ml 加氯化鈉使飽和乙醚多次提取合并乙醚液精密加硫酸滴定液（0.05mol/L）25ml振搖低溫蒸去乙醚放冷至室溫加甲基紅指示液2滴用氫氧化鈉（0.1mol/L）滴定。 每1ml硫酸滴定液（0.05mol/L）相當于18.42mg的C18H 26N2H 2SO4。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )5、熒光分光光度法 基 本 原 理 ：腎上腺素含有的鄰苯二酚結構，被弱氧化劑氧化，生成腎上腺素紅，發(fā)生轉位為N-甲基-3,5,6-三羥基吲哚（THI）。(Tri- Hydroxyl- Indole-) N+O-O OH R OH - NHOHO OH R本法還可用于測定微量兒茶酚胺類藥物。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )6、高效液相色譜法高效分離，高靈敏度和高選擇性可用于制劑常規(guī)分析，臨床藥物監(jiān)測和體內藥物動力學研究。例 1：重酒石酸去甲腎上腺素注射液分析色譜條件：色譜柱：ODS流動相：0.14%庚烷基磺酸鈉溶液甲醇(65:35)，用磷酸調pH至3.00.1，流速：1.0ml/min檢測波長：280nm測定方法：精密量取本品適量（約相當于重酒石酸去甲腎上腺素4mg），置25ml 量瓶中， 加醋酸溶液（125）稀釋至刻度，搖勻，取2l注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取重酒石 酸去甲腎腺素對照品適量，精密稱定，加醋酸溶液（125）制成每1ml中含0.16mg的溶液， 同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )6、高效液相色譜法例 1：HPLC-EChD法測定血漿中兒茶酚胺類藥物色譜條件：色譜柱：ODS型鍵合相 流動相：離子對試劑 檢測器：電化學檢測器供試品溶液的制備：氧化鋁吸附洗脫 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 ( )7、衍生化氣相色譜法例 ：鹽酸芬氟拉明 (fenfluramine hydrochloride) F3C HCOHHCCH3NH C2H5由于結構中的仲胺基極性極強，使得氣相色譜法測定值波動較大，因此將樣品溶解后經(jīng)堿化乙酸乙酯提取，加入內標，提取液用三氟乙酸酐進行?；苌瑢⒀苌a(chǎn)物在5%SE-30的色譜柱上分析，用FID檢測器檢測。 武漢工程大學 制藥工程部 第三節(jié) 芳氧丙醇胺類藥物典型藥物：氧烯洛爾 (Oxprenolol, 別名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal, Trasacor, Trasieor )腎上腺素受體阻滯藥 鹽酸卡替洛爾 (Carteolol hydrochloride)受體阻滯藥 H N O O H HN C H 3H 3 C C H 3O H C lO NHO H C H 3 C H 3O C H 2 H N O O H HN C H 3H 3 C C H 3O H C lO NHO H C H 3 C H 3O C H 2 武漢工程大學 制藥工程部 鑒別反應 (identification)化學鑒別氧烯洛爾：取本品0.1g，加乙醇2ml溶解后，滴加0.1mol/L高錳酸鉀溶液1ml，振 搖數(shù)分鐘，高錳酸鉀顏色消褪，并產(chǎn)生棕色沉淀。 鹽酸卡替洛爾：取本品約0.1g，加水5ml使溶解，加硫氰酸鉻銨試液5滴，即生成淡紅色沉淀。 紫外吸收峰特征 氧烯洛爾水溶液 (40g/ml): 在275nm 的波長處有最大吸收。 鹽酸卡替洛爾 (8g/ml): 在215nm 與252nm的波長處有最大吸收。 武漢工程大學 制藥工程部 鹽酸卡替洛爾的有關物質檢查TLC法，自身對照法檢查方法：取本品0.20g，加甲醇10ml使溶解，作為供試品溶液；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照薄層色譜法 (附錄 B)試驗，吸取上述兩種溶液備10l，分別點于同一硅膠GF 254薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液 (50:20:1)為展開劑，展開后，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品溶液如顯雜質斑點，與對照溶液的 主斑點比較，不得更深。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定 鹽酸卡替洛爾原料取本品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸30ml，在水浴上加熱溶解，放冷，加醋酐70ml，照電位 滴定法(附錄 A)，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定 液(0.1mol/L)相當于32.88mg的C 16H24N2O3HCl。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定鹽酸卡替洛爾滴眼液 精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1ml中約含鹽酸卡替洛爾16g的溶液，照分光光度法(附錄 A)，在252nm的波長處測定吸收度；另取鹽酸卡替洛爾對照品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含鹽酸卡替洛爾16g的溶液，同法測定，計算，即得。 武漢工程大學 制藥工程部 含量測定人血漿中氧烯洛爾及其異構體的分析色譜條件：預柱：ODS填料，分析柱：手性OD-R柱（手性選擇劑為3,5-二甲苯氨基甲酸酯纖維素）流動相：NaClO4(0.45mol/L)-乙腈(70:30)的磷酸鹽緩沖溶液(pH6.0)檢測波長：273nm血漿處理方法：醋酸纖維膜透析用預柱純化、富集手性柱分離分析。 武漢工程大學 制藥工程部cpu.edu