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2019年高考真題分類匯編 專題30 克隆技術(shù) 考點1　植物細(xì)胞工程 1.(xx廣東理綜,29,16分)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下: 新生 營養(yǎng)芽PLBsPLBs實驗 結(jié)果 在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,請回答下列問題: (1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱　　　　。 (2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在　　　　　　　　　　　　,　　　　　　　　　　　　,　　　　　　　　　　　　。 (3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng),推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實驗驗證該推測,在設(shè)計實驗方案時探討了以下問題: ①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個ABA處理組,1個空白對照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基　　　　　　　　　　　　后按比例加入。 ②實驗進(jìn)程和取樣:實驗50天完成,每10天取樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為　　　　　　　　　　　　　　　　。 ③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間:當(dāng)某3個樣品(重復(fù)樣)的　　　　時,其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。 答案　(16分)(1)細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)形成PLBs(2分)　細(xì)胞的脫分化(2分) (2)生長起始較快(2分)　快速生長時間較長(2分)　PLBs產(chǎn)量較高(2分) (3)①滅菌、冷卻(2分)　②75(1分)?、跴LBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大(3分) 考點2　動物細(xì)胞工程 2.(xx浙江理綜,3,6分)下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(　　) A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型 B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞 C.由多個祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個克隆 D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀 答案　B　 3.(xx北京理綜,5,6分)在25 ℃的實驗條件下可順利完成的是(　　) A.光合色素的提取與分離 B.用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖 C.大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng) D.制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基 答案　A　 4.(xx課標(biāo)Ⅰ,40,15分)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問題: (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達(dá)到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過　　　　次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是　　　　小鼠,理由是　　　　　　　　　　　　　。 (2)細(xì)胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有　　　　個細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是　　　　條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是　　　　　　　　　　　。 答案　(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價最高 (2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100% (3)1　100 (4)不能無限增殖 5.(xx福建理綜,33,10分)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖: (1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的　　　　。 (2)步驟②中,重組胚胎培養(yǎng)到　　　期時,可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。 (3)步驟③中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達(dá)載體。可以根據(jù)Rag2基因的　　　　　　設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達(dá)載體,所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有　　　　　　　　酶的酶切位點。 (4)為檢測Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的　　　　,用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。 答案　(10分)(1)細(xì)胞核 (2)囊胚 (3)核苷酸序列　HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白質(zhì)