《2014屆高三生物（人教版通用）一輪復(fù)習(xí)教案- 第45講 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2014屆高三生物（人教版通用）一輪復(fù)習(xí)教案- 第45講 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用（19頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、 第45講　生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 [考綱要求]　1.植物的組織培養(yǎng)。2.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。3.蛋白質(zhì)的提取和分離。4.從生物材料中提取某些特定的成分。5.實(shí)驗(yàn)：DNA的粗提取與鑒定。 考點(diǎn)一　植物組織培養(yǎng) 1． 植物組織培養(yǎng)的過(guò)程 外植體愈傷組織幼苗―→移栽 植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，一般需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素兩種植物激素。 2． 植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)操作 (1)菊花的組織培養(yǎng)過(guò)程 制備MS培養(yǎng)基(配制母液、配制培養(yǎng)基、滅菌)→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培。 (2)月季的花藥培養(yǎng)過(guò)程 ①過(guò)程：材料的選取→材料的消毒→接種和培養(yǎng)→鑒

2、定和篩選。 ②影響花藥培養(yǎng)的因素主要有材料的選擇和培養(yǎng)基的組成。 ③要挑選完全未開(kāi)放的花蕾，確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法。 3． 影響植物組織培養(yǎng)的因素 (1)菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝 (　　) (2)植物激素的濃度可影響細(xì)胞分化，但使用的先后順序及比例不影響組織培養(yǎng)的過(guò)程 (　　) (3)pH、溫度和光照等也影響植物組織培養(yǎng) (　√　) 易錯(cuò)警示　實(shí)驗(yàn)操作中易錯(cuò)的幾個(gè)問(wèn)題 (1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝；月季的花藥培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。

3、 (2)外植體消毒：所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是無(wú)菌水。 (3)培養(yǎng)過(guò)程：在初期，菊花的組織培養(yǎng)需光照，月季的花藥培養(yǎng)不需光照；而在后期均需光照。 1． 植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義。植物組織培養(yǎng)可用于無(wú)病毒植株及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題： (1)利用月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體時(shí)，選材非常重要。一般來(lái)說(shuō)，在____________期花藥培養(yǎng)的成功率最高。為了選擇該期的花藥，通常選擇____________的花蕾。確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法有____________法，但是對(duì)于花粉細(xì)胞核不易著色的植物

4、，需采用____________法，該法能將花粉細(xì)胞核染成____________色。 (2)若要進(jìn)行蘭花無(wú)病毒植株的培育，首先選擇蘭花的____________作為外植體。從外植體到無(wú)病毒植株試管苗，要人為控制細(xì)胞的____________和____________過(guò)程。 - 2 - / 19 (3)進(jìn)行組織培養(yǎng)需配制MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加____________、____________等植物激素。欲有利于根的分化，植物激素的用量比例應(yīng)為_(kāi)_________________________________________________________________

5、______。 (4)不同植物的組織培養(yǎng)除需營(yíng)養(yǎng)和激素外，____________________________等外界條件也很重要。 (5)無(wú)菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，下列各項(xiàng)中使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的是____________，采用灼燒方法進(jìn)行滅菌的是____________。(填序號(hào)) ①培養(yǎng)皿?、谂囵B(yǎng)基　③實(shí)驗(yàn)操作的雙手?、苋清F形瓶⑤接種環(huán)?、藁ɡ? 答案　(1)單核靠邊　完全未開(kāi)放　醋酸洋紅　焙花青—鉻礬　藍(lán)黑　(2)莖尖分生組織　脫分化(或去分化)　再分化(3)生長(zhǎng)素　細(xì)胞分裂素(兩空順序可以顛倒)　生長(zhǎng)素多于細(xì)胞分裂素　(4)pH、溫度和光照　(5)③⑥　⑤

6、 解析　(1)早期的花藥比后期的更容易培養(yǎng)成功。一般來(lái)說(shuō)，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高。該時(shí)期的花藥通常存在于完全未開(kāi)放的花蕾中。(2)根尖、莖尖約0～0.1 mm區(qū)域中幾乎不含病毒。病毒通過(guò)維管系統(tǒng)移動(dòng)，而分生組織中不存在維管系統(tǒng)，且莖尖分生組織中，代謝活力高，競(jìng)爭(zhēng)中病毒復(fù)制處于劣勢(shì)。(3)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素等植物激素可調(diào)節(jié)脫分化和再分化。當(dāng)生長(zhǎng)素含量多于細(xì)胞分裂素含量時(shí)，利于生根。(4)植物培養(yǎng)時(shí)，除需要營(yíng)養(yǎng)、激素外，還需要適宜的溫度、pH和光照等。(5)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行滅菌處理，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的具有生物活性的材料或用具進(jìn)行消毒處理。 1． 植物組織培養(yǎng)技

7、術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的異同 　　 項(xiàng)目 內(nèi)容　　 菊花的組織培養(yǎng) 月季的花藥培養(yǎng) 理論依據(jù) 植物細(xì)胞的全能性 基本過(guò)程 脫分化→再分化 外植體的細(xì)胞類型 體細(xì)胞 生殖細(xì)胞 操作流程 制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培 選材→消毒→接種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育 影響因素 選材、營(yíng)養(yǎng)、植物激素、pH、溫度、陽(yáng)光等 培養(yǎng)結(jié)果 正常植株 單倍體植株 生殖方式 無(wú)性生殖 有性生殖 可育性 可育 高度不育，秋水仙素處理后可育 2． 植物激素與組織培養(yǎng) (1)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)

8、： ①在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。 ②使用順序不同，結(jié)果不同，具體如下： 使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 ③用量比例不同，結(jié)果也不同 3． 影響植物組織培養(yǎng)的因素 (1)材料：植物的種類、材料的年齡和保存時(shí)間的長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。 (2)營(yíng)養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg

9、，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。 (3)環(huán)境條件：pH、溫度、光照等條件。如菊花的組織培養(yǎng)所需pH為5.8左右，溫度為18～22 ℃，光照條件為每日用日光燈照射12 h。 考點(diǎn)二　DNA的粗提取與鑒定 1． 基本原理 2． 操作過(guò)程 材料的選?。哼x用DNA含量相對(duì)較高的生物組織 　 去除雜質(zhì)：利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的 　　 不同，通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì) 　 DNA的鑒定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑，沸水 　　　　中加熱5 min，溶液變成藍(lán)色 易錯(cuò)警示　

10、(1)本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核。可選用雞血細(xì)胞作材料。(2)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水，第一次的目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破釋放出DNA，第二次的目的是稀釋NaCl溶液，使DNA從溶液中析出。 2． 下圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： (1)步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入____________并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂。 (2)步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的____________。 (3)步驟三、四的操作原理是________________________________________

11、________ ________________________________________________________________________； 步驟四中，通過(guò)向溶液中加入____________調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至____________mol/L時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)。 (4)步驟七：向步驟六過(guò)濾后的____________中加入等體積的冷卻的____________，靜置2～3 min，溶液中會(huì)出現(xiàn)________色絲狀物，這就是粗提取的DNA。 (5)步驟七：DNA遇____________試劑，沸水浴5 min，冷卻后

12、，溶液呈______色。 答案　(1)蒸餾水　(2)濾液　(3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)　蒸餾水　0.14　(4)濾液　酒精　白　(5)二苯胺　藍(lán) 解析　破碎紅細(xì)胞應(yīng)用蒸餾水，使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解，在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出?？赏ㄟ^(guò)加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精，遇二苯胺加熱呈藍(lán)色。 1． DNA與蛋白質(zhì)在NaCl溶液中溶解度比較 2 mol/L NaCl溶

13、液 0.14 mol/L NaCl溶液 溶解規(guī)律 DNA 溶解 析出 蛋白質(zhì) 部分發(fā)生鹽析沉淀 溶解 NaCl溶液從2 mol/L降低過(guò)程中，溶解度逐漸增大 2． DNA粗提取與鑒定中不同試劑的用途及原理比較 試劑 濃度 用途 原理(“△”為實(shí)驗(yàn)的主要原理) NaCl溶液 2 mol/L 溶解DNA DNA在NaCl溶液中的溶解度隨溶液濃度的變化而改變，溶解度在2 mol/L時(shí)最大、在0.14 mol/L時(shí)最小 △ 0.14 mol/L 析出DNA 2 mol/L 鑒定時(shí)的溶劑 酒精 95%(體積分?jǐn)?shù)) 除去雜質(zhì)以提純DNA DNA

14、不溶于酒精，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)可以溶于酒精 △ 二苯胺 鑒定劑 DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)變藍(lán)色 △ 檸檬酸鈉 0.03 g/mL 抗凝劑 除去血液中的鈣離子，防止血液凝固 3． DNA粗提取實(shí)驗(yàn)材料和方法的選擇 (1)不同生物的組織中DNA含量不同 在選取材料時(shí)，應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。 (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物組織：取材→研磨→過(guò)濾→沉淀。 ②雞血：制備雞血細(xì)胞液→提取核DNA→溶解細(xì)胞核內(nèi)DNA→析出并濾取DNA→DNA再溶解→提取較純凈的DNA。 考點(diǎn)三　PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用 1． P

15、CR原理 DNA熱變性原理，即： 2． PCR反應(yīng)過(guò)程 (1)變性：當(dāng)溫度上升到90_℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈。 (2)復(fù)性：溫度下降到55_℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。 (3)延伸：溫度上升到72 ℃左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。 易錯(cuò)警示　(1)DNA分子復(fù)制的人工控制 解開(kāi)螺旋：在80～100 ℃時(shí)，DNA雙螺旋打開(kāi)，形成兩條DNA單鏈，稱為變性。 恢復(fù)螺旋：在50 ℃左右時(shí)，兩條DNA單鏈重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，稱為復(fù)性。 復(fù)制條件：緩沖液、DNA模板、四

16、種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶和兩種引物。 反應(yīng)場(chǎng)所：PCR儀。 (2)PCR技術(shù)中的引物：①含義：引物是一小段單鏈DNA或RNA分子。②作用：為DNA聚合酶提供合成的3′端起點(diǎn)。③種類：擴(kuò)增一個(gè)DNA分子需要2種引物。 ④數(shù)目：引物數(shù)目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目。⑤與DNA母鏈的關(guān)系：兩種引物分別與DNA母鏈的3′端通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合。 3． 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本原理及應(yīng)用問(wèn)題： (1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，通常將________________的末端稱為5′端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)

17、合后，DNA聚合酶就能從引物的____________開(kāi)始延伸DNA鏈。 (2)PCR利用DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到__________________________________，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題。要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫______________。 (3)PCR的每次循環(huán)可以分為_(kāi)_____________________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有________個(gè)這樣

18、的DNA片段。 (4)請(qǐng)用簡(jiǎn)圖表示出一個(gè)DNA片段PCR反應(yīng)中第二輪的產(chǎn)物。 (5)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用。 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)磷酸基團(tuán)　3′端　(2)耐高溫的Taq DNA聚合酶　選擇培養(yǎng)基　(3)變性、復(fù)性和延伸　32 (4)如圖所示 (5)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基

19、因克隆和DNA序列測(cè)定(要求3項(xiàng)以上) 解析　(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的3′羥基上，與DNA母鏈結(jié)合的引物就提供這個(gè)羥基。 (2)因PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開(kāi)DNA雙鏈的問(wèn)題，所以用于催化DNA復(fù)制過(guò)程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)。 (3)DNA復(fù)制時(shí)兩條鏈均作為模板，進(jìn)行半保留復(fù)制，所以復(fù)制5次后得到的子代DNA分子數(shù)為25＝32個(gè)。 (4)新合成的DNA鏈帶有引物，而最初的模板DNA的兩條鏈不帶有引物。 (5)PCR技術(shù)可以對(duì)DNA分子進(jìn)行擴(kuò)增，所以可用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案

20、、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等方面。 1． 細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較 細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制 PCR 不同點(diǎn) 解旋 在DNA解旋酶作用下，邊解旋邊復(fù)制 80～100 ℃高溫解旋，雙鏈完全分開(kāi) 酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 溫度 體內(nèi)溫和條件 高溫 相同點(diǎn) ①需提供DNA復(fù)制的模板 ②四種脫氧核苷酸為原料 ③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端 2． PCR的反應(yīng)過(guò)程 (1)變性：當(dāng)溫度上升到90 ℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，如下圖： (2)復(fù)性：溫度下降到50 ℃左右，

21、兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，如下圖： (3)延伸：溫度上升到72 ℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，如下圖： 考點(diǎn)四　血紅蛋白的提取和分離 1． 血紅蛋白的提取和分離原理及方法 (1)原理：蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力等，可以用來(lái)分離不同種類的蛋白質(zhì)。 (2)分離方法 ①凝膠色譜法：也稱做分配色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。 ②電泳法：電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。常用的電泳法

22、有瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。 2． 血紅蛋白的提取和分離過(guò)程 樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌―→血紅蛋白的釋放―→分離血紅蛋白溶液 　 純化：用凝膠色譜法分離相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 3． 判斷正誤 (1)利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量小的先洗脫出來(lái) (　　) (2)在電泳過(guò)程中，蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度，與分子本身的大小和形狀無(wú)關(guān)，而與所帶電荷的差異有關(guān) (　　) (3)在SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳中，電泳遷移率完全取決于分子的大小 (　√　) 易錯(cuò)警示　“血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)”中的注意事項(xiàng) (1)紅細(xì)胞的洗滌：洗滌次數(shù)不能過(guò)少，否則

23、無(wú)法除去血漿蛋白；要低速、短時(shí)離心，否則會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。(2)凝膠的預(yù)處理：用沸水浴法不但節(jié)約時(shí)間，而且除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒內(nèi)的空氣。(3)色譜柱的裝填：裝填時(shí)盡量緊密，減小顆粒間隙；無(wú)氣泡；洗脫液不能斷流。(4)色譜柱成功的標(biāo)志：紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)。 4． 紅細(xì)胞中含有大量的血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)提取和分離血紅蛋白。下列對(duì)血紅蛋白提取和分離的敘述，錯(cuò)誤的是 (　　) A．血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定的順序進(jìn)行 B．純化過(guò)程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液

24、C．粗分離中透析的目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) D．可經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定 答案　B 解析　蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。提取和分離血紅蛋白時(shí)，首先通過(guò)洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品處理；再通過(guò)透析法除去相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜蛋白除去，即樣品純化，純化過(guò)程中凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹后，配制成凝膠懸浮液，而不是用生理鹽水；最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。 1． 常用的蛋白質(zhì)分離方法 (1)凝膠色譜法 　　　蛋白

25、質(zhì) 項(xiàng)目 相對(duì)分子質(zhì)量大 相對(duì)分子質(zhì)量小 凝膠內(nèi)部 不能進(jìn)入 能進(jìn)入 運(yùn)動(dòng)方式 垂直向下 垂直向下和無(wú) 規(guī)則擴(kuò)散運(yùn)動(dòng) 經(jīng)過(guò)路程 較短 較長(zhǎng) 洗脫次序 先流出 后流出 (2)電泳法原理 ①在一定pH下，蛋白質(zhì)分子的某些基團(tuán)解離后帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下，帶 電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。 ②由于待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶 電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。 2． 分離DNA、PCR技術(shù)、分離蛋白質(zhì)的比較 分離DNA PCR技術(shù) 分離蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)原理 DNA在不同

26、濃度NaCl溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精 利用DNA熱變性原理體外擴(kuò)增DNA 依據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小不同來(lái)分離蛋白質(zhì) 實(shí)驗(yàn)過(guò)程 選取材料→破碎細(xì)胞釋放DNA→除雜→DNA析出與鑒定 變性→復(fù)性→延伸 樣品處理→凝膠色譜操作 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 獲得較純凈的DNA 獲得大量DNA 相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離 實(shí)驗(yàn)意義 為DNA研究打下基礎(chǔ) 解決了DNA研究中材料不足的問(wèn)題 為蛋白質(zhì)的研究和利用提供了原材料 3． 比較瓊脂糖凝膠電泳和SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 (1)從載體上看，利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳，利用SDS—聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是SDS—

27、聚丙烯酰胺凝膠電泳。 (2)從依據(jù)上看，利用了分子帶電性質(zhì)差異和分子大小的是瓊脂糖凝膠電泳，僅利用了分子大小的是SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳。 (3)從優(yōu)點(diǎn)上看，瓊脂糖凝膠電泳操作簡(jiǎn)單，電泳速度快，樣品不需處理，電泳圖譜清晰，分辨率高，重復(fù)性好；SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳消除了凈電荷對(duì)遷移率的影響，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 考點(diǎn)五　植物有效成分的提取 1． 植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油實(shí)驗(yàn) ①方法：水蒸氣蒸餾法。 ②實(shí)驗(yàn)流程 (2)提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn) ①方法：一般用壓榨法。 ②實(shí)驗(yàn)流程 2． 胡蘿卜素的提取 (1)胡蘿卜素性質(zhì)：不溶于

28、水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。 (2)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) ①方法：萃取法，石油醚最適宜作萃取劑。 ②實(shí)驗(yàn)流程 (3)鑒定方法：紙層析法。 易錯(cuò)警示　胡蘿卜素粗品鑒定過(guò)程中的5個(gè)易錯(cuò)點(diǎn) (1)層析時(shí)沒(méi)有選擇干凈的濾紙，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯：為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染，應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套進(jìn)行操作。 (2)點(diǎn)樣時(shí)點(diǎn)樣圓點(diǎn)太大(直徑大于2 mm)，導(dǎo)致最終在濾紙上形成一條線，無(wú)法辨認(rèn)被提取的色素：點(diǎn)樣圓點(diǎn)的直徑應(yīng)為2 mm。 (3)將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)不能將濾紙兩邊相互接觸：以避免由于毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。 (

29、4)層析液沒(méi)及樣品原點(diǎn)，色素溶解于層析液中，造成實(shí)驗(yàn)失?。簩游鲆翰豢蓻](méi)及樣品原點(diǎn)，以免色素溶解于層析液中，使鑒定失敗。(5)沒(méi)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照：層析液中是否提取到胡蘿卜素，可通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的β－胡蘿卜素作對(duì)比予以確認(rèn)。 5． 請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問(wèn)題： (1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、________和________。 (2)芳香油溶解性的特點(diǎn)是難溶于________________，易溶于______________，因此可用________________作為提取劑來(lái)提取芳香油。 (3)橘子果實(shí)含有芳香油，通常可用________作為材料提取芳香

30、油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材料，理由是____________________________________________________ ________________________。 (4)對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是________。 (5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的________層，原因是____________________________________________________________________ __________________________________

31、______________________________________。加入氯化鈉的作用是_________________________________________________________ ______________________________。 (6)從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無(wú)水硫酸鈉，其作用是___________________ _____________________________________________________。 答案　(1)蒸餾法　萃取法　(2)水　有機(jī)溶劑　有機(jī)溶劑(3)橘子皮　芳香油含量較高　(4)過(guò)濾　(5)上

32、　油層的密度比水層小　增加水層密度，使油和水分層　(6)吸收芳香油中殘留的水分 解析　植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸餾法和萃取法。一般采用新鮮的橘子皮來(lái)提取芳香油，因?yàn)樾迈r的橘子皮芳香油含量較高。除去液體中的固體常用的方法是過(guò)濾。芳香油密度比水小，且不溶于水，會(huì)浮在液體的表面。加入氯化鈉會(huì)增加水層密度，使油和水分層。無(wú)水硫酸鈉可以吸收芳香油中殘留的水分。 植物芳香油提取方法的比較 提取方法 水蒸氣蒸餾法 壓榨法 有機(jī)溶劑萃取法 實(shí)驗(yàn)原理 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái) 通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油 使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲

33、得芳香油 方法步驟 ①水蒸氣蒸餾 ②分離油層 ③除水過(guò)濾 ①石灰水浸泡、漂洗；②壓榨、過(guò)濾、靜置；③再次過(guò)濾 ①粉碎、干燥 ②萃取、過(guò)濾 ③濃縮 適用范圍 適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油 適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取 適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中 優(yōu)點(diǎn) 簡(jiǎn)單易行，便于分離 生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能 出油率高，易分離 局限性 水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題 分離較為困難，出油率相對(duì)較低 使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量 1． (2012江蘇卷，18)下列關(guān)于“D

34、NA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是 (　　) A．洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B．將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán) C．常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取 D．用玻璃棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少 答案　C 解析　洗滌劑可瓦解細(xì)胞膜，有利于釋放DNA，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A項(xiàng)錯(cuò)誤；含DNA的絲狀物應(yīng)先溶解在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中，再用二苯胺試劑在沸水浴條件下檢測(cè)，冷卻后變成藍(lán)色，B項(xiàng)錯(cuò)誤；常溫下菜花勻漿中某些酶如DNA水解酶，其活性較高，會(huì)影響DNA的提取，C項(xiàng)正確；用玻璃棒緩慢

35、攪拌濾液可防止DNA分子斷裂，但不影響DNA的提取量，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 2． (2011廣東卷，5)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是 (　　) A．洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂 B．豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少 C．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè) D．在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢 答案　D 解析　生理鹽水為豬體細(xì)胞的等滲溶液，所以在洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可維持細(xì)胞的正常形態(tài)，A項(xiàng)正確；由于哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞缺少細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，所以提純時(shí)雜蛋白相對(duì)較少，B項(xiàng)正確；如果凝膠色譜柱

36、裝填得很成功，分離操作也正確，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出，所以血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)，C項(xiàng)正確；當(dāng)相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢，后洗脫出來(lái)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。 3． (2012山東卷，34)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如下圖： (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的________和__________過(guò)程。 (2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比

37、值____(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是________________。 (3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是________。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是__________和纖維素酶。 (4)提取辣椒素過(guò)程中，萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是__________________ ______________________________________________________。 答案　(1)脫分化(或去分化)　再分化　(2)瓊脂　低　高壓蒸汽滅菌　(3)70%　果膠酶　(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)

38、 解析　(1)由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程稱為脫分化，對(duì)脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可重新分化出根或芽等器官，這個(gè)過(guò)程叫做再分化。(2)培養(yǎng)基中常用的凝固劑是瓊脂。同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比值大小影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時(shí)，有利于芽的分化；反之，有利于根的分化。培養(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(3)外植體消毒所用酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%。酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞所用的酶是果膠酶和纖維素酶。(4)用萃取法提取植物有效成分時(shí)，應(yīng)在瓶口安裝冷凝回流裝置，目的是防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑的揮發(fā)。 4． (2010課標(biāo)全國(guó)卷，37)下列是與

39、芳香油提取相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答： (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有_____________________ ___________________________________________________ 的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液________(是、不是)純的玫瑰精油，____________________ ____________________________________________________。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和________。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量

40、隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是______________________________________________________________________。 (3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì)________，原因是__________________ ______________________________________________________________________________________________________________________________。 (4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度________

41、的地方，目的是____________________。 (5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為_(kāi)_______天左右。 (6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)____(能、不能)采用從玫瑰花中 提取玫瑰精油的方法，理由是___________________________ _____________________________________________。 答案　(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定　不是　玫瑰精油與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物　(2)蒸餾溫度　在一定的時(shí)間內(nèi)提取量隨蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)而增

42、加，一定時(shí)間后提取量不再增加　(3)下降　部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失　(4)較低　減少揮發(fā)　(5)a　(6)能　薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似 解析　由于玫瑰精油易揮發(fā)，難溶于水，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，因此可以用水蒸氣蒸餾法提取，冷卻后必然含有水；蒸餾的提取效果與蒸餾的溫度與蒸餾的時(shí)間有關(guān)，隨著蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)，原料中含有的精油減少，提取的量也會(huì)減少直至再也提不出精油。蒸餾過(guò)程中，如果不冷卻，提取后的混合液溫度較高，由于精油易揮發(fā)，其中的含量會(huì)降低；保存時(shí)，環(huán)境溫度應(yīng)較低為好，防止精油揮發(fā)；第(5)小題為信息題，主要考查學(xué)生的讀圖、識(shí)圖及圖文轉(zhuǎn)化能力，根據(jù)圖像可知，玫瑰精油在蓓蕾期、開(kāi)放期之間花的含

43、量較高，應(yīng)在此時(shí)采收；由于薄荷精油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，可以采用相同的提取方法。 1． 在用果膠酶處理果泥時(shí)，為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng)，應(yīng)采取的措施是(　　) A．加大果泥用量 B．加大果膠酶用量 C．進(jìn)一步提高溫度 D．用玻璃棒不時(shí)地?cái)嚢璺磻?yīng)混合物 答案　D 解析　用果膠酶處理果泥時(shí)，用玻璃棒不時(shí)地?cái)嚢璺磻?yīng)混合物，能使果膠酶與果膠充分接觸，使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng)。 2． 在“探究不同溫度條件下加酶洗衣粉的洗滌效果”的實(shí)驗(yàn)中，變量控制方法正確的是 (　　) A．實(shí)驗(yàn)材料的污染程度屬于本研究的無(wú)關(guān)變量，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不必考慮 B．若采用手洗法進(jìn)

44、行去污操作，需盡可能保證各組的洗滌用力程度、時(shí)間等基本相同 C．水溫屬于本研究的變量，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須保證各組實(shí)驗(yàn)溫度相同且恒定 D．水的用量和布料的大小是成正比的，實(shí)驗(yàn)用的布料越大、水量越多實(shí)驗(yàn)效果越好 答案　B 解析　根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的對(duì)照原則和單一變量原則，水溫是本研究的自變量，要有溫度梯度，各組實(shí)驗(yàn)溫度不能相同，其他的無(wú)關(guān)變量要保持適宜且相同。該實(shí)驗(yàn)用的布料大小、水量要適中，不是布料越大、水量越多實(shí)驗(yàn)效果越好。 3． 如圖為胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過(guò)程示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是 (　　) A．①和②過(guò)程中都會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和

45、分化 B．在利用單倍體育種法培育優(yōu)質(zhì)小麥的過(guò)程中，不經(jīng)過(guò)愈傷組織階段 C．此過(guò)程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性 D．利用此過(guò)程獲得的試管苗可能為雜合子 答案　D 解析?、俦硎久摲只诒硎驹俜只?。①過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞的有絲分裂，不發(fā)生分化；利用單倍體育種法培育優(yōu)質(zhì)小麥的過(guò)程中，需采用花藥離體培養(yǎng)技術(shù)，要經(jīng)過(guò)愈傷組織階段；植物組織培養(yǎng)過(guò)程依據(jù)的生物學(xué)原理是植物細(xì)胞的全能性；此過(guò)程是無(wú)性生殖，獲得的試管苗的遺傳物質(zhì)取決于取材個(gè)體，因此可能為雜合子。 4． 下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯(cuò)誤的是 (　　) A．可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬的紅細(xì)胞中提取到

46、DNA和蛋白質(zhì) B．用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可除去部分雜質(zhì) C．透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜 D．凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)的有效方法 答案　A 解析　豬是哺乳動(dòng)物，哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核和線粒體，不能從其紅細(xì)胞中提取出DNA。 5． 假設(shè)你已經(jīng)探究了果膠酶的最適溫度(為45 ℃)和最適pH(為 4.8)，若還想進(jìn)一步研究果膠酶的最適用量，此時(shí)，實(shí)驗(yàn)的自變量是______________________。合理設(shè)置果膠酶用量的梯度后，可通過(guò)蘋(píng)果泥出汁的多少來(lái)判斷酶的用量是否合適。請(qǐng)根據(jù)所給的材料和用具完成以下探究實(shí)驗(yàn)。

47、 (1)材料用具：制備好的蘋(píng)果泥、恒溫水浴裝置、試管、漏斗、濾紙、量筒、試管夾、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液和鹽酸。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟： ①取6支試管，編號(hào)為1～6，分別加入________________________，調(diào)節(jié)pH至4.8。 ②向1～6號(hào)試管中分別加入________________________，然后放入45 ℃恒溫水浴裝置中____________。 ③________________________________________________________________________。 (3)以上實(shí)驗(yàn)步驟的設(shè)計(jì)是否有不

48、妥之處？如果有，試分析原因。____________________ ____________________________________________________。 答案　果膠酶的用量　(2)①等量的蘋(píng)果泥?、诓煌w積的pH為4.8的果膠酶溶液　保溫相同時(shí)間?、圻^(guò)濾蘋(píng)果泥并記錄果汁體積　(3)有。為了保證蘋(píng)果泥與果膠酶混合前后的溫度相同，應(yīng)先將盛蘋(píng)果泥和果膠酶的試管放在同一溫度的水浴裝置中恒溫，再將兩者混合 解析　在探究影響果汁產(chǎn)量的酶的用量時(shí)，除酶的用量是變量外，其他條件都應(yīng)相同且適宜。為了避免因混合導(dǎo)致溫度變化而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)先將盛蘋(píng)果泥的試管和盛不同量酶的試管放到相同

49、溫度下恒溫，然后將兩者混合。 6． 下面是制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟，請(qǐng)回答： 活化酵母細(xì)胞→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞。 (1)在________狀態(tài)下，微生物處于休眠狀態(tài)?；罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)________狀態(tài)?；罨皯?yīng)選擇足夠大的容器，因?yàn)榻湍讣?xì)胞活化時(shí)______________。 (2)如果海藻酸鈉溶液濃度過(guò)低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目____________，影響實(shí)驗(yàn)效果。 (3)觀察形成凝膠珠的顏色和形狀，如果顏色過(guò)淺，說(shuō)明___________________________；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢

50、圓形，說(shuō)明__________________________________。 (4)固定化細(xì)胞技術(shù)一般采用包埋法，原因是____________。 答案　(1)缺水　正常的生活　體積會(huì)增大　(2)少　(3)海藻酸鈉溶液濃度偏低　海藻酸鈉溶液濃度偏高，制作失敗　(4)細(xì)胞個(gè)大，不易從包埋材料中漏出 解析　(1)酵母菌在干燥時(shí)，處于休眠狀態(tài)，需加水活化，否則制成的固定化酵母細(xì)胞在發(fā)酵時(shí)酶活性較低且酵母菌增殖緩慢。(2)如果海藻酸鈉溶液的濃度過(guò)低，則形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。(3)如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺或呈白色，說(shuō)明海藻酸鈉溶液的濃度偏低；如果形成的凝膠

51、珠不是圓形或橢圓形，說(shuō)明海藻酸鈉溶液的濃度偏高，制作失敗，需要再嘗試。(4)由于細(xì)胞個(gè)大，不易從包埋材料中漏出，故細(xì)胞的固定化一般采用包埋法。 7． 下圖是月季的花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題： (1)選用的材料合適與否是能否成功誘導(dǎo)出花粉植株的關(guān)鍵。一般來(lái)說(shuō)，選用________期的花粉可提高成功率。選擇花藥時(shí)，一般要通過(guò)____________來(lái)確定其中的花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時(shí)需要對(duì)花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色，常用的染色劑是____________。 (2)上圖中花粉經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中______________ ____

52、______________________________________。 (3)胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈傷組織的細(xì)胞排列疏松、無(wú)規(guī)則，是一種高度________的薄壁細(xì)胞，胚狀體與____________發(fā)育形成的胚有類似的結(jié)構(gòu)，即具有胚芽、胚軸和胚根。 (4)試管苗移栽到土壤前，通常要進(jìn)行壯苗處理，應(yīng)如何壯苗？ ________________________________________________________________________。 答案　(1)單核　鏡檢(顯微鏡觀察)　醋酸洋紅　(2)激素的種類及其濃度配比　(3)液泡化　正常受精卵(或

53、受精卵)(4)將試管苗移栽到經(jīng)過(guò)消毒的培養(yǎng)基中生活一段時(shí)間，等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中 解析　(1)單核期花粉對(duì)離體刺激較敏感，選用該期花粉可提高培養(yǎng)的成功率；選擇花粉時(shí)可用顯微鏡觀察進(jìn)行篩選；對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色應(yīng)選擇堿性染料，常用醋酸洋紅。(2)花藥離體培養(yǎng)成植株的兩條途徑之間沒(méi)有明顯的界限，主要取決于植物激素的種類及比例。(3)愈傷組織細(xì)胞的特點(diǎn)為細(xì)胞排列疏松、無(wú)規(guī)則、高度液泡化；胚狀體具有與胚相似的胚根、胚軸和胚芽等結(jié)構(gòu)。(4)壯苗是使試管苗進(jìn)一步適應(yīng)外界環(huán)境的做法。 8． PCR是一種體外快速擴(kuò)增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，數(shù)小時(shí)內(nèi)可使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬(wàn)個(gè)。PC

54、R需要模板DNA、引物、脫氧核苷酸和DNA聚合酶等條件。下圖為模板DNA分子及2種引物，請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題： (1)PCR的全稱是______________________。PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制的不同之外主要表現(xiàn)在溫度環(huán)境的不同，在PCR技術(shù)中先用95 ℃高溫處理的目的是____________，而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)____________實(shí)現(xiàn)的。 (2)在PCR技術(shù)中所需要的引物實(shí)質(zhì)上是一種__________________________。請(qǐng)?jiān)趫D中繪出引物結(jié)合的位置。 (3)若將1個(gè)DNA分子拷貝10次，則需要在緩沖液中至少加入____________個(gè)引物。 (4)

55、DNA子鏈復(fù)制的方向是____________，這是由于_______________________________ _________________________________________________________________________。 答案　(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)　使DNA變性(使DNA的兩條鏈解開(kāi))　解旋酶的催化　(2)單鏈DNA或RNA分子　如圖所示 (3)211－2　(4)從5′端到3′端　DNA聚合酶只能從引物的3′端開(kāi)始連接單個(gè)脫氧核苷酸分子 解析　PCR技術(shù)又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。在PCR技術(shù)中，用95 ℃高溫處理的目的是使DNA分子中的氫鍵斷裂，兩條鏈解開(kāi)，即使DNA分子變性。引物是一種單鏈DNA或RNA分子，它能與解開(kāi)的DNA母鏈的3′端結(jié)合，為DNA聚合酶提供吸附位點(diǎn)，使DNA聚合酶從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，從而決定了DNA子鏈復(fù)制的方向是從5′端到3′端。在DNA分子擴(kuò)增時(shí)，需要2種引物，由于新合成的子鏈都需要引物作為復(fù)制的起點(diǎn)，故所需的引物數(shù)目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目，即2210－2＝211－2(個(gè))。 希望對(duì)大家有所幫助，多謝您的瀏覽！