重點(diǎn)增分練一、選擇題1(2018徐州檢測)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法，正確的是()A天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段D分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源解析：選C天然培養(yǎng)基的成分不明確，其原料來自天然物質(zhì)，其配制較為簡單；接種前需要對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行消毒處理；大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源。2下列有關(guān)用雞血進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的操作，錯(cuò)誤的是()A雞血細(xì)胞中加入蒸餾水后，用玻璃棒攪拌B用蛋白酶純化溶解于2 mol/L NaCl溶液中的DNAC在溶有DNA的濾液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精后，用玻璃棒輕緩攪拌D將卷在玻璃棒上的絲狀物加入4 mL二苯胺試劑中，沸水浴加熱，冷卻后觀察解析：選D卷在玻璃棒上的絲狀物(DNA)首先溶于NaCl溶液，然后再加二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后觀察顏色變化。3某校高三學(xué)生對某種加酶洗衣粉做了研究實(shí)驗(yàn)，在不同溫度下除去不同污漬所需的時(shí)間，結(jié)果如表所示。下列敘述正確的是()不同溫度下除去不同污漬所需時(shí)間(min)水溫()1020304050607080奶漬48432812641217藍(lán)墨水93868072686781105注：牛奶(主要含蛋白質(zhì)、脂肪)、藍(lán)墨水主要成分：阿拉伯樹膠(植物纖維)、鞣酸與硫酸亞鐵A此加酶洗衣粉適宜洗滌棉織品、毛織品、蠶絲制品等衣料B此實(shí)驗(yàn)證明了酶具有高效性C此實(shí)驗(yàn)證明了加酶洗衣粉的洗滌效果比普通洗衣粉好D同一水溫下除去兩種污漬時(shí)間不同的可能原因是加酶洗衣粉含有多種酶，酶具有專一性，且不同酶的活性受溫度影響不同解析：選D根據(jù)題中表格數(shù)據(jù)可知，此加酶洗衣粉對奶漬的洗滌效果較好，因此含有蛋白酶，而毛織品、蠶絲織品等衣料的主要成分就是蛋白質(zhì)，不能用該洗衣粉洗滌；該實(shí)驗(yàn)證明了酶需要溫和的條件，即適宜的溫度；此實(shí)驗(yàn)探究了加酶洗衣粉最適溫度范圍以及對不同污漬的洗滌效果，由于缺少加普通洗衣粉的對照組，不能證明加酶洗衣粉比普通洗衣粉的洗滌效果好。4下表是利用固定化淀粉酶進(jìn)行酶解淀粉的實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是()組別固定化酶柱長度(cm)淀粉溶液的流速(mL/min)甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5A預(yù)期丙組流出液中產(chǎn)物的純度可能最高B固定后的淀粉酶裝入柱中后可以重復(fù)利用C各組實(shí)驗(yàn)中淀粉溶液的濃度、pH、溫度等都應(yīng)該相同且適宜D流出液產(chǎn)物的純度只與固定化酶柱長度和淀粉溶液的流速有關(guān)解析：選D反應(yīng)柱長，淀粉流速慢，則反應(yīng)時(shí)間充足，產(chǎn)物純度較高；流出液產(chǎn)物的純度除與固定化酶柱長度和淀粉溶液的流速有關(guān)外，還與反應(yīng)柱中固定的酶的數(shù)量及下端篩板上孔徑大小等有關(guān)。5(2019屆高三南通調(diào)研)下面是利用蘋果塊固定乳酸菌進(jìn)行的有關(guān)實(shí)驗(yàn)流程圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A將蘋果切成小塊可以增大相對表面積，有利于固定化乳酸菌與外界進(jìn)行物質(zhì)交換B步驟中用無菌水清洗的目的是洗去蘋果塊表面乳酸菌，使步驟的結(jié)果更準(zhǔn)確C步驟中設(shè)置的對照實(shí)驗(yàn)應(yīng)是用等質(zhì)量的蘋果小塊在相同條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)D與傳統(tǒng)使用海藻酸鈉固定細(xì)胞相比，用蘋果固定乳酸菌可以保證發(fā)酵食品的安全性解析：選C將蘋果切成小塊可以增大相對表面積，有利于固定化乳酸菌與外界進(jìn)行物質(zhì)交換；步驟中用無菌水清洗的目的是洗去蘋果塊表面乳酸菌，使步驟的結(jié)果更準(zhǔn)確；步驟中設(shè)置的對照實(shí)驗(yàn)應(yīng)是用等量的(未固定)乳酸菌在相同條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；與傳統(tǒng)使用海藻酸鈉固定細(xì)胞相比，用蘋果固定乳酸菌可以保證發(fā)酵食品的安全性。6苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A使用平板劃線法可以在上獲得單個(gè)菌落B如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源D微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行消毒處理解析：選D微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌處理。7下列有關(guān)生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是()A固定化酶技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯B牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，可用高壓蒸汽滅菌法滅菌C相同pH時(shí)，加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉D向雞血細(xì)胞中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，可以獲得無雜質(zhì)的DNA解析：選B 在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯的是固定化細(xì)胞；pH不適宜時(shí)，加酶洗衣粉洗滌效果不一定比普通洗衣粉好；向雞血細(xì)胞中加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，得不到DNA。8下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述，錯(cuò)誤的是()A制作腐乳時(shí)，料酒的量超過50%時(shí)，腐乳成熟的時(shí)間將會縮短B發(fā)酵裝置設(shè)置出料口便于取料及對發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測C采用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA的方法可去除部分雜質(zhì)D用移液管稀釋菌液時(shí)，要輕壓橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻解析：選A制作腐乳時(shí)，料酒的量超過50%時(shí)，腐乳成熟的時(shí)間將會延長。9(2018南通二模)下列是“肝臟細(xì)胞DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)關(guān)鍵操作步驟，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.步驟1中，加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定B步驟1中，冰浴處理的主要原理是低溫下DNA水解酶容易變性C步驟2中，異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀D步驟2中，離心后應(yīng)取上清液，因?yàn)镈NA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度比較大解析：選B步驟1中，加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定；步驟1中，冰浴處理主要原理是低溫下DNA酶的活性低，防止DNA分解；步驟2中，異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀；DNA在2 mol/L NaCl溶液中的溶解度最大，因此加固體NaCl使溶液濃度達(dá)到2 mol/L后再離心過濾取上清液。10(2018鹽城三模，多選)下列有關(guān)利用新鮮的菜花進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()A向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌可釋放核DNAB加入洗滌劑和食鹽的作用分別是瓦解細(xì)胞膜和溶解DNAC利用DNA不溶于冷酒精的原理可進(jìn)一步提純DNAD含DNA的NaCl溶液與二苯胺在常溫下混合呈藍(lán)色解析：選BC 菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞，有細(xì)胞壁保護(hù)，因此加蒸餾水不會吸水脹破。加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜，加入食鹽的作用是溶解DNA。DNA在冷酒精中的溶解度很低，蛋白質(zhì)在冷酒精中的溶解度較高，因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理可進(jìn)一步提純DNA。含DNA的NaCl溶液與二苯胺在沸水浴下混合呈藍(lán)色。11(多選)下圖為制備人工種子部分流程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()A外植體需要經(jīng)過脫分化、再分化等才能形成胚狀體B在海藻酸鈉溶液中可加入適量的無機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、抗生素等C人工種皮應(yīng)選擇不透水、不透氣的材料，以防加入的養(yǎng)分流失D配制海藻酸鈉溶液時(shí)，可用水浴法加熱促進(jìn)其溶解解析：選ABD為了促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育，在人工種子的包裹劑中需要加入適量的無機(jī)鹽、有機(jī)碳源及農(nóng)藥抗生素等；人工種皮應(yīng)選有韌性、透氣、對胚狀體無害的材料。12.(多選)在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無菌濾紙片，d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖。以下判斷正確的是()Aa處抑菌效果大于b處Bb處的濾紙片沒有瀝干Cc處抗生素?zé)o效 Dd為對照解析：選BCD根據(jù)圖示，b的透明圈大于a，則b處抑菌效果大于a處；b的透明圈不規(guī)則，b處的濾紙片沒有瀝干，有浸潤現(xiàn)象；d處濾紙片浸有無菌水，無抗生素，作為對照；c處的結(jié)果和d處相同，說明c處抗生素?zé)o效。二、非選擇題13圖1表示實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)中的部分操作。請分析回答：(1)步驟的后一步的正確操作應(yīng)是將平板_，這樣可以防止_。(2)步驟之間需要進(jìn)行的正確操作應(yīng)是_。(3)甲同學(xué)按步驟進(jìn)行操作，據(jù)圖分析，采用的接種方法稱為_，其操作的兩處不當(dāng)之處分別是_、_。在老師的指導(dǎo)下，該同學(xué)按正確的方法重新操作，則經(jīng)培養(yǎng)后菌落的分布情況最可能是圖2中的_。(4)乙同學(xué)嘗試采用不同于甲同學(xué)的接種方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖3所示，推測該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是_。解析：(1)步驟是倒平板，下一步應(yīng)是將平板冷凝后并倒置，目的是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基。(2)步驟需要在火焰旁冷卻接種環(huán)并打開棉塞、將試管口通過火焰。(3)據(jù)圖1分析，甲同學(xué)采用的接種方法為平板劃線法。劃線操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，劃線的首尾區(qū)域不應(yīng)相連。(4)乙同學(xué)采用的接種方法是稀釋涂布平板法，根據(jù)菌落分布情況推測，該同學(xué)接種時(shí)可能涂布不均勻。答案：(1)冷凝后并倒置(缺一不可)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基(2)在火焰旁冷卻接種環(huán)(并打開棉塞)、將試管口通過火焰(3)平板劃線法劃線的首尾區(qū)域不應(yīng)相連劃線應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行A(4)涂布不均勻14(2018南通考前預(yù)測)“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2、Mn2，抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取蠟梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果如下(表中OD260反映溶液中核酸的濃度，OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0)。CTABSDSOD260OD280OD260/OD280OD260OD280OD260/OD2800.0330.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題：(1)CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_。(2)氯仿異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿異戊醇，實(shí)驗(yàn)過程中加入氯仿異戊醇離心后，應(yīng)取_加異丙醇(異丙醇與水互溶)并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是_。(3)兩種方法中，_法提取的DNA較多，其可能原因是_。(4)兩種方法中，_法提取的DNA純度較低，其含有的主要雜質(zhì)是_。解析：(1)EDTA能螯合Mg2、Mn2，抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。(2)氯仿異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿異戊醇，離心后，氯仿異戊醇位于試管的底部，DNA位于上清液中，所以離心后應(yīng)該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇。(3)從表中數(shù)據(jù)可知，CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006,0.0330.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別可知，CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度,從而可提取出更多的DNA。(4)從表中數(shù)據(jù)可知，CTAB法提取的DNA的OD260/OD280是1.833，而SDS法提取的DNA的OD260/OD280是1.200，與1.833相比，1.200偏離1.800更多，所以SDS法提取的DNA純度較低，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0，比純DNA溶液的OD260/OD280大，而1.2比1.8小，所以主要雜質(zhì)不是RNA，而是蛋白質(zhì)。答案：(1)減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量(2)上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇(3)CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA(4)SDS蛋白質(zhì)