專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用注意事項(xiàng)：1答題前，先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)在試題卷和答題卡上，并將準(zhǔn)考證號(hào)條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。2選擇題的作答：每小題選出答案后，用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，寫(xiě)在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無(wú)效。3非選擇題的作答：用簽字筆直接答在答題卡上對(duì)應(yīng)的答題區(qū)域內(nèi)。寫(xiě)在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無(wú)效。4考試結(jié)束后，請(qǐng)將本試題卷和答題卡一并上交。一、選擇題（本題包括20小題，每小題3分，共60分，每小題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意）1關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯(cuò)誤的是（ ）A將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯溶解B等培養(yǎng)基冷卻50左右時(shí)進(jìn)行倒平板C待平板冷卻凝固510 分鐘后將平板倒過(guò)來(lái)放置D操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌2現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時(shí)所加的成分如下表：用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物，它們適于分離的是（ ）A甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌；乙培養(yǎng)基適于分離真菌B甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌C甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌D甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生細(xì)菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌3從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種的方法不包括（ ）A根據(jù)微生物對(duì)碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基B根據(jù)微生物對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物的需求，在培養(yǎng)基中增減不同的特殊營(yíng)養(yǎng)物C根據(jù)微生物對(duì)抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素D根據(jù)微生物耐熱性的不同，利用高溫、高壓消滅不需要的雜菌4微生物的接種技術(shù)有很多，有關(guān)常用的兩種微生物接種方法的敘述不正確的是（ ）A只能應(yīng)用于固體培養(yǎng)基接種B都可以用于微生物的計(jì)數(shù)C接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落D接種用具都需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌5無(wú)菌技術(shù)包括以下幾個(gè)方面的敘述，其中錯(cuò)誤的是（ ）A對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌B將用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌C為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)锲废嘟佑|6培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是（ ）化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法A B C D7下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的敘述正確的是（ ）A配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)PH后滅菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)試劑，長(zhǎng)出的菌落為大腸桿菌菌落D向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)8下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法正確的是（ ）A制備步驟使用的培養(yǎng)基過(guò)程是先滅菌再調(diào)pHB步驟操作時(shí)只需要在接種前和劃線結(jié)束后灼燒滅菌C操作到的過(guò)程中，接種環(huán)共灼燒處理了 5 次D接種結(jié)束后，將倒置培養(yǎng)，皿底上標(biāo)注菌種及接種日期等信息9下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的示意圖，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）A在配制步驟、的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH值后高壓蒸汽滅菌B步驟采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素C步驟挑取中不同種的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力D步驟純化分解尿素的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)胞菌落10如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列敘述正確的是（ ）A劃線操作時(shí)完全打開(kāi)皿蓋，劃完立即蓋上B在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌C接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來(lái)，以便比較前后的菌落數(shù)11下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）A獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B平板劃線法和稀釋涂布平板法都可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)C培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌D倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落，造成污染12下列檢測(cè)某熟制食品中大腸桿菌是否超標(biāo)的實(shí)驗(yàn)操作，不合理的是（ ）A待檢測(cè)食品需要經(jīng)過(guò)滅菌操作后取樣檢測(cè)B應(yīng)設(shè)置未接種的培養(yǎng)基，作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照C用稀釋涂布平板法接種計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)D接種后將培養(yǎng)皿倒置并在適宜溫度下培養(yǎng)13做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的是（ ）A高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋B倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基無(wú)需加入有機(jī)碳源14為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是（ ）A對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上C臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D對(duì)于需要臨時(shí)保存的菌種，可以采用4 低溫保藏的方法15在分解尿素菌的分離和鑒定中，對(duì)先后用到的兩種培養(yǎng)基，敘述正確的是（ ）A加入唯一氮源作為選擇培養(yǎng)基，加入剛果紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基。B加入唯一氮源作為鑒別培養(yǎng)基，加入酚紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基。C加入酚紅指示劑作為鑒別培養(yǎng)基，加入唯一氮源作為選擇培養(yǎng)基。D加入剛果紅指示劑作為選擇培養(yǎng)基，加入唯一碳源作為鑒別培養(yǎng)基。16農(nóng)作物秸稈等纖維質(zhì)原料經(jīng)加工可制成燃料乙醇，從而減少了對(duì)石油資源的依賴，下圖為生產(chǎn)燃料乙醇的簡(jiǎn)要流程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（ ）A要得到微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣B圖中過(guò)程常用的微生物B是酵母菌C微生物A和微生物B可利用的碳源相同D可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用17下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是（ ）A分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液B測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋度范圍不同C測(cè)定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法D接種土壤微生物稀釋液時(shí)，平板劃線法可以采取連續(xù)劃線的方法使微生物均勻分布18下列關(guān)于剛果紅染色法的說(shuō)法中，正確的是（ ）A先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，不需用氯化鈉溶液洗去浮色B倒平板時(shí)就加入剛果紅，可在培養(yǎng)皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培養(yǎng)基C培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的原因是因?yàn)槔w維素被分解為葡萄糖導(dǎo)致的D倒平板時(shí)就加入剛果紅，長(zhǎng)期培養(yǎng)剛果紅有可能被其他微生物分解形成透明圈19某生物興趣小組以帶有落葉的表層土壤(深5cm左右)為實(shí)驗(yàn)材料，研究土壤微生物在適宜溫度下的分解作用，對(duì)土壤處理情況見(jiàn)下表，與此有關(guān)的敘述不正確的是（ ）A探究的問(wèn)題可以是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對(duì)落葉的分解作用B預(yù)期結(jié)果是 1、3 組的落葉不被分解，2、4 組中的落葉被不同程度的分解C為了控制實(shí)驗(yàn)中的無(wú)關(guān)變量，作為實(shí)驗(yàn)材料的落葉也應(yīng)進(jìn)行滅菌處理D該實(shí)驗(yàn)的自變量為土壤是否滅菌處理20為了驗(yàn)證土壤中的微生物可以分解淀粉，取兩只燒杯甲和乙，都放入等景的淀粉溶液20mL，甲中加入30mL制備好的土壤浸出液，乙中放入等量的蒸餾水，在適宜的溫度下放罝7天。然后從甲中取出等量的溶液放入A1、A2試管，從乙中也取出等量的溶液放入試管B1、B2，在A1、B1中加入碘液，在A2和B2中加入斐林試劑并加熱。下列對(duì)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)測(cè)正確的是（ ）AA1和B1都會(huì)有藍(lán)色出現(xiàn)，而且顏色深淺一致BA2有磚紅色沉淀出現(xiàn)，B2無(wú)磚紅色沉淀出現(xiàn)CA2和出都有磚紅色沉淀出現(xiàn)D以上結(jié)果都不正確二、非選擇題（本題包括3小題，每空2分，共40分）21（12分）食品衛(wèi)生是關(guān)系千萬(wàn)人健康和生命的大事，為檢測(cè)某食品廠乳制品中總菌量和大腸桿菌量是否超標(biāo)，常采用微生物培養(yǎng)的方法，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)應(yīng)配制哪種物理性質(zhì)的培養(yǎng)基？_，在接種之前，一般對(duì)培養(yǎng)基采取_方法滅菌，滅菌后才能保證培養(yǎng)得到的菌落全部來(lái)自待測(cè)樣品。培養(yǎng)基中是否應(yīng)該加入全部五大類營(yíng)養(yǎng)要素？為什么？_。(2)培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)該將一定量的_的稀釋液接種到培養(yǎng)基上，并將接種好的培養(yǎng)基在_等條件下培養(yǎng)。(3)待培養(yǎng)一定時(shí)間后，對(duì)培養(yǎng)基中的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以得出總菌量的數(shù)據(jù)，若要得到大腸桿菌量的數(shù)據(jù)，應(yīng)該在配制培養(yǎng)基時(shí)向培養(yǎng)基中加入_試劑。22（14分）幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素，其不良預(yù)后是胃癌。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，目前我國(guó)有超過(guò)50%人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌，環(huán)境氧要求5%8%，在大氣或絕對(duì)厭氧環(huán)境下均能生長(zhǎng)，Hp的尿素酶極為豐富，尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保護(hù)細(xì)菌在高酸環(huán)境下生存。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板X(qián)培養(yǎng)觀察。請(qǐng)回答：在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)_色環(huán)帶。步驟X的操作如下圖所示：微生物接種的方法很多，但都要注意_；上圖所示方法為_(kāi)。圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是_。在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿_并放在恒溫培養(yǎng)箱中,否則將可能導(dǎo)致_。23（14分）人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來(lái)發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，實(shí)驗(yàn)流程示意圖如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）步驟A是_，可以通過(guò)此步驟增加_。（2）研究人員用_法篩選纖維素分解菌，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。培養(yǎng)基中透明圈的大小與纖維素酶的_有關(guān)。（3）在涂布平板時(shí)，取少量菌液（不超過(guò)0.1mL）滴加到培養(yǎng)基表面，菌液量不宜過(guò)多的原因是_。（4）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株甲和乙，在不同pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見(jiàn)下表，推測(cè)菌株_更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是_。注：纖維素酶活性用U表示。2018-2019學(xué)年高一下學(xué)期專題二訓(xùn)練卷生 物（一）答 案1. 【答案】D【解析】將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，A正確；待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，B正確；待平板冷卻凝固約510min后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上，C正確；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，D錯(cuò)誤。2. 【答案】B【解析】根據(jù)所提供的甲、乙兩種培養(yǎng)基的成分分析，甲培養(yǎng)基有葡萄糖、淀粉作為有機(jī)碳源，適于分離異養(yǎng)型微生物；乙培養(yǎng)基無(wú)有機(jī)碳源，適于分離自養(yǎng)型微生物。兩者都不含氮源，說(shuō)明這兩種培養(yǎng)基都適于分離自生固氮菌。3. 【答案】D【解析】根據(jù)微生物對(duì)碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)自養(yǎng)型的菌，在培養(yǎng)基中不需加入碳源，A正確；不同的微生物需要不同的生長(zhǎng)因子，根據(jù)需要的菌可以在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的生長(zhǎng)因子進(jìn)行分離，B正確；根據(jù)微生物對(duì)抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素，C正確；高溫高壓會(huì)將所有細(xì)菌（包括需要的菌類）一起殺死，D錯(cuò)誤。4. 【答案】B【解析】將微生物接種到固體培養(yǎng)基中的方法通常為平板劃線法和稀釋涂布平板法，A正確；稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，平板劃線法常用來(lái)篩選分離微生物，B錯(cuò)誤；兩種接種方法在培養(yǎng)基中形成單個(gè)菌落，C正確；為防止雜菌污染，接種工具需要滅菌后使用，D正確。5. 【答案】A【解析】對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行消毒和滅菌，A錯(cuò)誤。為保證不被雜菌污染，應(yīng)將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌，B正確。酒精燈火焰附近可以形成一個(gè)無(wú)菌區(qū)，為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，C正確。周?chē)锲房赡軙?huì)含有雜菌，為防止污染，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)锲废嘟佑|，D正確。6. 【答案】A【解析】實(shí)驗(yàn)操作者的雙手用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，用酒精擦拭雙手；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч?；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；空氣可用紫外線消毒；培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不會(huì)破壞其營(yíng)養(yǎng)成分；綜合以上分析，正確的順序?yàn)?，A正確。7. 【答案】A【解析】配制培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行滅菌，否則會(huì)被再次污染，A正確；青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌而促進(jìn)真菌生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；伊紅美藍(lán)是專一鑒定大腸桿菌的指示劑，利用伊紅美藍(lán)固體培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌是否存在，C錯(cuò)誤；破傷風(fēng)桿菌的代謝類型屬于異養(yǎng)厭氧型，向其培養(yǎng)基中通入氧氣會(huì)抑制其生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。8. 【答案】D【解析】步驟表示倒平板，在倒平板之前是先調(diào)pH再滅菌，A錯(cuò)誤；步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，同時(shí)在接種前和每次劃線結(jié)束后都要灼燒滅菌，B錯(cuò)誤；接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，所以完成步驟中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見(jiàn)，完成步驟共需灼燒接種環(huán)6次，C錯(cuò)誤；圖中操作結(jié)束后，為了防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基造成污染，需要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，且同時(shí)在培養(yǎng)基皿底標(biāo)注菌種及接種日期等信息，D正確。9. 【答案】B【解析】在配制步驟、的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH值后再進(jìn)行髙壓蒸汽滅菌，A正確；要篩選出能高效分解尿素細(xì)菌，所選用的培養(yǎng)基要以尿素為唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步驟所用的培養(yǎng)基中不能含有牛肉膏蛋白胨，B錯(cuò)誤；步驟挑取中不同種的菌落分別接種，形成相互對(duì)照試驗(yàn)，比較細(xì)菌分解尿素的能力，C正確；步驟純化分解尿素的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)胞菌落，D正確。10. 【答案】C【解析】劃線時(shí)皿蓋打開(kāi)一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面，A錯(cuò)誤；在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，但培養(yǎng)基只是在接種前進(jìn)行滅菌即可，B錯(cuò)誤；接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面，否則不能分離得到單菌落，C正確；劃線時(shí)注意不要將最后一區(qū)5的劃線與第一區(qū)1相連，D錯(cuò)誤。11. 【答案】B【解析】微生物培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A正確；利用稀釋涂布平板法接種微生物可以形成單菌落，常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，但利用平板劃線法接種微生物不易分離出單菌落，不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，常用來(lái)篩選分離微生物，B錯(cuò)誤；常用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，C正確；倒平板后，需要將培養(yǎng)皿倒置，以防止培養(yǎng)基蒸發(fā)冷凝成的水滴入培養(yǎng)基而造成污染，D正確。12. 【答案】A【解析】待檢測(cè)食品滅菌后會(huì)將大腸桿菌殺死，則不能檢測(cè)大腸桿菌是否超標(biāo)，A錯(cuò)誤；應(yīng)設(shè)置未接種的培養(yǎng)基，作為實(shí)驗(yàn)的對(duì)照，B正確；用稀釋涂布平板法接種計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)，C正確；接種后應(yīng)該將培養(yǎng)皿倒置，并在適宜溫度下培養(yǎng)，D正確。13. 【答案】D【解析】高壓滅菌加熱結(jié)束，等待壓力表指針回到零后，才能開(kāi)啟鍋蓋，不能打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零，A錯(cuò)誤。倒平板過(guò)程中不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全打開(kāi)，B錯(cuò)誤。接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯(cuò)誤。硝化細(xì)菌就能夠制造有機(jī)物，培養(yǎng)基無(wú)需加入有機(jī)碳源，D正確。14. 【答案】D【解析】對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法，在固體斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后，放入冰箱低溫保藏，A、B正確；臨時(shí)保藏的菌種由于頻繁轉(zhuǎn)種，容易被污染或產(chǎn)生變異，C正確；對(duì)于需要臨時(shí)保存的菌種，可以采用4 低溫保藏的方法，D錯(cuò)誤。15. 【答案】C【解析】尿素分解菌能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，其合成的脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘笔狗蛹t指示劑呈紅色，用加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌，C正確。16. 【答案】C【解析】根據(jù)圖解可知，微生物A的碳源是纖維素，故要想獲得微生物A最好選擇富含纖維素的土壤采集，A正確；圖中過(guò)程表示生產(chǎn)乙醇的過(guò)程，常用微生物是酵母菌，B正確；微生物A所用碳源為纖維素，微生物B所用碳源為纖維素降解物，C錯(cuò)誤；微生物A之所以能利用纖維質(zhì)原料是因?yàn)槠浜欣w維素酶，故可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用，D正確。17. 【答案】B【解析】分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，其中的微生物全部死亡，不能得到尿素分解菌，A錯(cuò)誤；土壤中各類微生物的數(shù)量不同，為了獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，可見(jiàn)，測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋度范圍也不同，B正確；測(cè)定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常用菌落計(jì)數(shù)法，一般不常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，C錯(cuò)誤；接種土壤微生物稀釋液時(shí)，可借助平板劃線法，通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，但并不是使微生物均勻分布，D錯(cuò)誤。18. 【答案】D【解析】常用的剛果紅染色法有兩種：一是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，此種方法需用氯化鈉溶液洗去浮色，二是在倒平板時(shí)就加入剛果紅，此種方法則不需要用氯化鈉溶液洗去浮色，A錯(cuò)誤；倒平板時(shí)就加入剛果紅，可在培養(yǎng)皿中先加入10mg/mLCR溶液，滅菌后，按照每200mL培養(yǎng)基加入1ml的比例加入CR溶液，B 錯(cuò)誤；在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，C 錯(cuò)誤；倒平板時(shí)就加入剛果紅，由于有些微生物能降解色素，長(zhǎng)期培養(yǎng)剛果紅有可能被其他微生物分解而形成透明圈，D正確。 19. 【答案】D【解析】實(shí)驗(yàn)組2組合4組可以形成對(duì)照，變量是土壤的濕潤(rùn)程度，來(lái)研究土壤微生物對(duì)落葉的分解作用，A正確；1組和3組由于沒(méi)有微生物，落葉不被分解，2組和4組由于有微生物，落葉不同程度的被分解，B正確；為了控制實(shí)驗(yàn)中的無(wú)關(guān)變量，作為實(shí)驗(yàn)材料的落葉也應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，消除微生物的影響，C正確；該實(shí)驗(yàn)的變量有兩個(gè)，一個(gè)是滅菌、不滅菌，一個(gè)是濕潤(rùn)、不濕潤(rùn)自變量是滅菌、不滅菌，在濕潤(rùn)條件下1、2形成對(duì)照，在干燥條件下3、4形成對(duì)照，所以1、3分別是兩組對(duì)照實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組，D錯(cuò)誤。20. 【答案】B【解析】斐林試劑是鑒定還原糖的，土壤中會(huì)含有些微生物能產(chǎn)生分解淀粉的淀粉酶，淀粉水解后是還原糖，所以A2會(huì)出現(xiàn)磚紅色，其它的都沒(méi)有磚紅色沉淀出現(xiàn)，B正確。碘液是鑒定淀粉的，A1和B1都會(huì)有藍(lán)色出現(xiàn)，但B1的藍(lán)色應(yīng)比較深，A錯(cuò)誤。B2沒(méi)有磚紅色沉淀出現(xiàn)，C錯(cuò)誤，D錯(cuò)誤。21. 【答案】(1)固體 高壓蒸汽滅菌 是，培養(yǎng)基應(yīng)該能保證各種微生物都能生活，才能使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確(2)待測(cè)樣品(乳制品)無(wú)菌、適宜的溫度(3)伊紅和美藍(lán)【解析】 (1)微生物的培養(yǎng)應(yīng)該用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；在接種之前，一般對(duì)固體培養(yǎng)基采取高壓蒸汽滅菌的方法滅菌。培養(yǎng)基中應(yīng)該加入全部五大類營(yíng)養(yǎng)要素，即水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子。因?yàn)橹挥羞@樣，才能保證各種微生物都能生活，才能使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。(2) 培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)該將一定量的乳制品的稀釋液接種到培養(yǎng)基上，并將接種好的培養(yǎng)基在無(wú)菌、適宜的溫度等條件下培養(yǎng)，使雜菌和大腸桿菌正常生活、繁殖。(3) 培養(yǎng)一定時(shí)間后，對(duì)培養(yǎng)基中的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以得出總菌量的數(shù)據(jù)。而要得到大腸桿菌量的數(shù)據(jù)，應(yīng)該在配制培養(yǎng)基時(shí)向培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)試劑進(jìn)行鑒定。22. 【答案】（1）尿素酶 紅 （2）防止雜菌的污染 稀釋涂布平板法 使微生物和無(wú)菌水混合均勻 （3）倒置 無(wú)法形成單一菌落 【解析】（1）由于尿素分解細(xì)菌能合成脲酶，脲酶能將尿素分解成氨，而氨會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，即pH升高，導(dǎo)致酚紅指示劑變紅。（2）微生物接種的方法很多，但都要注意防止雜菌的污染；接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示所示為稀釋涂布平板法。圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是使微生物和無(wú)菌水混合均勻。（3）培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫箱中培養(yǎng)，倒置培養(yǎng)的目的也是為了獲得單一菌落。23. 【答案】（1）選擇培養(yǎng) 纖維素分解菌的濃度（2）剛果紅染色 量與活性（3）培養(yǎng)基表面的菌液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果（4）乙 瘤胃是酸性環(huán)境，菌株乙在酸性環(huán)境下酶的活性更高【解析】（1）步驟A是選擇培養(yǎng)，該步驟可增加纖維素分解菌的濃度。（2）篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法；培養(yǎng)基中透明圈的大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)。（3）在涂布平板時(shí)，菌液量不宜過(guò)多的原因是菌液過(guò)多會(huì)使培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果 。（4）根據(jù)表中數(shù)據(jù)顯示，甲菌株在pH=8時(shí)酶活性最高，乙菌株在pH=5時(shí)酶活性最高，因?yàn)榱鑫甘撬嵝原h(huán)境，因此乙菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。