大題1題多練十現(xiàn)代生物科技專題1.(2018重慶4月調(diào)研測試,38)透明質(zhì)酸酶在臨床上常用作藥物滲透劑,目前主要從動物組織中提取?？蒲腥藛T嘗試將透明質(zhì)酸酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使其得到高效表達。下圖中Nco和Xho為限制酶,重疊延伸PCR是一種定點突變技術(shù)。據(jù)圖回答下列問題。(1)步驟的目的是保護,PCR的原理是;PCR擴增的過程是:目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合,然后,如此重復(fù)循環(huán)。(2)若圖中的透明質(zhì)酸酶基因來自cDNA文庫,則在進行步驟之前需在其前、后端分別接上特定的,否則該基因就不能轉(zhuǎn)錄。步驟需要用(酶)切割質(zhì)粒。(3)圖中A是;早期實驗人員利用大腸桿菌作為受體,后來發(fā)現(xiàn)用毛霉或酵母菌作受體更具優(yōu)勢,從生物體結(jié)構(gòu)角度分析,最可能的原因是。(4)目的基因?qū)胧荏w細胞后,是否可以穩(wěn)定地維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測和鑒定才能知道。檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因的方法是。答案:(1)透明質(zhì)酸酶基因,防止Nco破壞目的基因DNA雙鏈復(fù)制在DNA聚合酶作用下延伸(2)啟動子、終止子Nco和Xho(3)基因表達載體毛霉或酵母菌是真核細胞,有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對初始形成的蛋白質(zhì)進行加工(4)利用目的基因制作成的探針進行DNA分子雜交2.(2018黑龍江哈爾濱第三中學(xué)二模,38)草莓是無性繁殖的作物,感染的病毒很容易傳播給后代,病毒在作物體內(nèi)逐年積累,就會導(dǎo)致產(chǎn)量變低,品質(zhì)變差?？梢岳眉毎こ膛嘤摱静葺蚶没蚬こ膛嘤共《静葺；卮鹣铝袉栴}。(1)為了獲得脫毒草莓,外植體往往取自植物分生區(qū)附近(如莖尖),其原因是。利用植物組織培養(yǎng),能獲得試管苗,其原理是細胞具有全能性,細胞具有全能性的原因是。(2)植物組織培養(yǎng)過程中可出現(xiàn)不同的結(jié)果,這些結(jié)果的出現(xiàn)主要與培養(yǎng)基中兩種激素有關(guān),這兩種激素是;在培養(yǎng)形成完整新植株過程中,對這兩種激素的調(diào)控關(guān)鍵是。(3)構(gòu)建的基因表達載體除了含有標記基因外,還必須有。草莓是雙子葉植物,將目的基因?qū)胧荏w細胞采用最多的方法是。(4)要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,檢測方法是。用作為探針與草莓基因組DNA雜交,如果,就表明目的基因已插入染色體DNA中。答案:(1)分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無病毒具有草莓全部遺傳信息(2)生長素和細胞分裂素恰當調(diào)控好不同的培養(yǎng)期培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的濃度和比例(3)啟動子、終止子、目的基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(4)DNA分子雜交技術(shù)放射性同位素標記的目的基因顯示出雜交帶3.2018年1月25日,我國研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,經(jīng)體細胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長類動物食蟹猴,可作為研究癌癥等人類疾病的動物模型。下圖為用體細胞核移植技術(shù)培育食蟹猴的操作過程,請回答下列問題。(1)2001年,美國科學(xué)家已經(jīng)培育出胚胎細胞核移植猴。獲得食蟹猴的體細胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細胞核移植,原因是。(2)進行過程時,為提供成纖維細胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境,應(yīng)進行的實驗措施是,其目的是。(3)據(jù)圖分析,過程是利用法將成纖維細胞注入猴去核的M中期卵母細胞的。(4)圖中過程的實質(zhì)是早期胚胎在條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。(5)上述實驗的突破之處是使用了去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,在確定其作用時,研究人員用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細胞得到A組實驗數(shù)據(jù),用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)向融合細胞中注入去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的融合細胞得到B組實驗數(shù)據(jù)。下圖中X為融合細胞發(fā)育成的胚胎數(shù),Y為囊胚數(shù),Z為內(nèi)細胞團數(shù)。分析實驗數(shù)據(jù)可知,Kd4d的mRNA的作用是既能提高,又能提高。答案:(1)體細胞分化程度高,恢復(fù)其全能性較難(2)定期更換培養(yǎng)液防止成纖維細胞代謝產(chǎn)物的積累對細胞自身造成危害(3)顯微注射卵細胞膜與透明帶之間(4)相同生理(5)融合細胞發(fā)育成囊胚的成功率囊胚中內(nèi)細胞團的形成率