細(xì)胞分化,CELL DIFFERENTIATION,.,不同生物具有不同的發(fā)育模式，但都涉及： 細(xì)胞增殖 細(xì)胞分化 細(xì)胞間的相互作用。 細(xì)胞分化（differentiation）是指細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程。,.,第一節(jié) 細(xì)胞分化的特點(diǎn),.,一、細(xì)胞的分化潛能,細(xì)胞分化能力的強(qiáng)弱稱為分化潛能。 動(dòng)物受精卵的分化潛能稱為全能性。 干細(xì)胞：有分化潛能的動(dòng)物細(xì)胞。分為：全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、單能干細(xì)胞。 單能干細(xì)胞只能分化為一種類型的細(xì)胞，也稱為祖細(xì)胞，自我更新能力有限。,.,Fertilized ovum has totipotency,.,Well differentiated plant cells keep their totipotency,.,Strachan T, Read A 2003,.,干細(xì)胞的特征： 終生保持未分化或低分化特征； 在機(jī)體的中的數(shù)目、位置相對(duì)恒定； 具有自我更新能力； 能無限制的分裂增殖； 具有多向分化潛能； 分裂的慢周期性，絕大多數(shù)處于G0期； 可行不對(duì)稱分裂。,.,根據(jù)個(gè)體發(fā)育過程中出現(xiàn)的次序，干細(xì)胞又可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。 胚胎干細(xì)胞（ESC）是從胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞篩選分離出的具有多能性或全能性的細(xì)胞。 ESC的用途主要有：動(dòng)物克??；動(dòng)物轉(zhuǎn)基因；組織工程。,.,二、細(xì)胞分化的特點(diǎn),1. 時(shí)空性 細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是在細(xì)胞質(zhì)（信號(hào)系統(tǒng)）和細(xì)胞核（基因組）共同作用下，選擇性地表達(dá)特定的基因，稱為差別基因表達(dá)。 已分化細(xì)胞的胞質(zhì)RNA與核DNA雜交率低于10。 細(xì)胞表達(dá)的基因分為：管家基因、組織特異性基因或奢侈基因。,.,高度分化的動(dòng)物細(xì)胞也具有完整的基因組。 證明方法：原位雜交、核移植。 Briggs和King（1952，1960），豹蛙（Rana pipiens）核移植。 Gurdon等（1975），成蛙蹼上皮細(xì)胞核移植。 童第周等20世紀(jì)60年代，魚類核移植。 Ian Wilmut（1997）克隆Do11y sheeep。,.,2.定向性 隨著細(xì)胞的分裂和分化，發(fā)育方向逐漸被限定，稱為決定（determination）。 決定意味著基因活動(dòng)模式改變。 例：哺乳動(dòng)物桑椹胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和外圍細(xì)胞，前者形成胚胎、后者形成滋養(yǎng)層。 無脊椎動(dòng)物早期的卵裂球已經(jīng)決定，每個(gè)卵裂球只能形成身體的一部分。,.,3. 穩(wěn)定性 動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生分化之后，其遺傳表型保持穩(wěn)定，通常是不可逆的。 例：果蠅幼蟲的成蟲盤移植到成蟲體內(nèi)不發(fā)生細(xì)胞分化，可繼續(xù)增殖或移植。如將其再移植回變態(tài)期幼蟲體內(nèi)則又能按原來已決定的命運(yùn)分化。,.,4. 條件可逆性 在特定條件下，分化細(xì)胞的基因活動(dòng)模式可發(fā)生可逆的變化，又回到未分化狀態(tài)，稱為去分化。 例1：植物愈傷組織。 例2： 果蠅觸角成蟲盤經(jīng)多次移植后，部分成蟲盤可分化為成體的腿、翅或口器，這種現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)決定。,.,5. 普遍性 個(gè)體一生中都進(jìn)行著細(xì)胞分化。干細(xì)胞是細(xì)胞更新和組織修復(fù)的基礎(chǔ)。 一種組織的成體干細(xì)胞傾向于分化成該組織的各種細(xì)胞，但特定條件下，可分化成其它組織的功能細(xì)胞，稱為轉(zhuǎn)分化或橫向分化。 高度分化的細(xì)胞不再分裂，對(duì)電離輻射敏感性低，而各種干細(xì)胞則不然。,.,三、細(xì)胞分化和增殖的關(guān)系,增殖信號(hào)和分化信號(hào)同時(shí)作用于干細(xì)胞，表現(xiàn)為邊分化邊增殖（反之亦然）； 增殖和分化分別獨(dú)立進(jìn)行，一些干細(xì)胞只增殖不分化，另一些同類干細(xì)胞進(jìn)入終末分化； 細(xì)胞分化與分裂平行進(jìn)行，干細(xì)胞進(jìn)行不對(duì)稱分裂，產(chǎn)生的子細(xì)胞一個(gè)保持原有干細(xì)胞特性，一個(gè)則進(jìn)入終末分化。,.,第二節(jié) 細(xì)胞分化的主要機(jī)制,.,autonomous mechanism：胚胎發(fā)育的早期細(xì)胞分裂由受精卵中的細(xì)胞質(zhì)控制，不涉及細(xì)胞通信。 inductive mechanism：隨著胚胎發(fā)育的進(jìn)行細(xì)胞之間主要通過信號(hào)系統(tǒng)協(xié)調(diào)分裂、分化和細(xì)胞的行為，稱為。 細(xì)胞的分化命運(yùn)主要取決于：細(xì)胞的內(nèi)部特性，外部環(huán)境。,.,卵細(xì)胞具有極性，細(xì)胞核靠近北極。 卵細(xì)胞中貯存有大量mRNA，是母源基因的產(chǎn)物， 維持卵細(xì)胞和早期胚胎代謝；呈非均勻分布，決定胚胎發(fā)育的圖式（pattern）。 合子基因在卵裂后期才發(fā)揮作用。,一、細(xì)胞分裂的不對(duì)稱性,.,用放線菌素D處理海膽受精卵，胚胎發(fā)育能進(jìn)行至囊胚期；嘌呤霉素處理，受精卵停止發(fā)育。 果蠅母源基因在滋養(yǎng)細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄后，輸入卵細(xì)胞，沿微管轉(zhuǎn)運(yùn)到特定部位?；虍a(chǎn)物沿卵的前后和背腹軸形成濃度梯度，決定胚胎形態(tài)，稱為成形素（morphogen）。 卵裂后的細(xì)胞質(zhì)特性決定了子細(xì)胞的分化命運(yùn)。,.,二、誘導(dǎo)機(jī)制,誘導(dǎo)（induction）是一部分細(xì)胞誘導(dǎo)其它細(xì)胞向特定方向分化的現(xiàn)象，也叫胚胎誘導(dǎo)。 對(duì)其它細(xì)胞起誘導(dǎo)作用的細(xì)胞稱誘導(dǎo)者(inductor)，如脊索可誘導(dǎo)其頂部的外胚層發(fā)育成神經(jīng)板，神經(jīng)溝和神經(jīng)管。 響應(yīng)誘導(dǎo)信號(hào)的同類細(xì)胞叫做形態(tài)發(fā)生場(chǎng)。,.,三、分化抑制,分化成熟的細(xì)胞可以產(chǎn)生“抑素”，抑制相鄰細(xì)胞發(fā)生同樣的分化。如含有成蛙心組織的培養(yǎng)液培養(yǎng)蛙胚，則蛙胚不能發(fā)育出正常的心臟。 “抑素” 是TGF-家族的成員。如 myostatin是肌肉生長(zhǎng)的負(fù)調(diào)控因子， GDF11（Wu等2003）通過上調(diào)細(xì)胞周期抑制因子p27抑制神經(jīng)組織生長(zhǎng)。,.,Mouse myostatin mutant (right),Double-muscled mouse,.,Function of the myostain,The so called chalone is the protein belonging to TGF- family, such as myostain,.,四、細(xì)胞數(shù)量效應(yīng),例1. 小鼠胚胎胰腺原基在體外培養(yǎng)，可發(fā)育成胰腺組織，如切成8小塊分別培養(yǎng)，則不能。再把分開的小塊合起來，又可形成胰腺組織。 例2. Fisher（1967）將大量腫瘤細(xì)胞注射到小鼠肝臟門靜脈，小鼠很快死于腫瘤。只注射50個(gè)腫瘤細(xì)胞時(shí)，小鼠正常生存，手術(shù)檢查未發(fā)現(xiàn)任何腫瘤。術(shù)后關(guān)腹飼養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)小鼠很快死于肝腫瘤。,.,五、細(xì)胞外基質(zhì)的影響,ECM能與細(xì)胞表面的整合素相互作用，激活粘著斑激酶（FAK），F(xiàn)AK可以通過接頭蛋白Grb2啟動(dòng)Ras信號(hào)途徑，引起細(xì)胞增殖。 干細(xì)胞在IV型膠原和層粘連蛋白上形成上皮細(xì)胞；在I型膠原和纖粘連蛋白上分化為成纖維細(xì)胞；在II型膠原及軟骨粘連蛋白上發(fā)育為軟骨細(xì)胞。,.,六、激素的作用,例1. 哺乳動(dòng)物雄性激素促進(jìn)烏爾夫氏管，抑制繆勒氏管的發(fā)育，摘除胚胎睪丸，則促進(jìn)謬?yán)帐瞎艿陌l(fā)育，形成雌性生殖管道。 例2. 昆蟲的保幼激素和脫皮激素，兩者保持一定的比例時(shí)，幼蟲脫皮而長(zhǎng)大；當(dāng)保幼激素含量減少時(shí)，幼蟲化蛹，成蟲器官發(fā)育。成蟲期又開始合成保幼激素，促進(jìn)性腺發(fā)育。,.,七、細(xì)胞核與細(xì)胞分化,（一）染色體結(jié)構(gòu)的變化 1. 基因刪除：原生動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物。 2 . 基因擴(kuò)增：多線染色體、爪蟾卵母細(xì)胞rDNA。 3 . 基因重排：如Ig基因(106108種抗體)。 4 . DNA甲基化與異染色質(zhì)化：基因失活。,.,5. 基因印跡,Genomic imprinting，特點(diǎn)： 性別特異，同一等位基因僅表達(dá)父或母本基因； 印跡發(fā)生于配子形成過程中； 在胚胎的有絲分裂中能穩(wěn)定傳遞給子細(xì)胞； 遺傳給下一代時(shí)消除上一代遺傳的印跡，建立新的與性別有關(guān)的印跡。,.,印跡基因的形成可能與差別修飾有關(guān)，如染色體特異性CpG島的甲基化作用。甲基轉(zhuǎn)移酶純和缺失的小鼠H19、IGF2及IGF2R印跡基因表達(dá)異常。 父源表達(dá)和母源表達(dá)的印跡基因?qū)ε咛グl(fā)育的影響不同。 例.葡萄胎（hydatidiform mole）父本印跡；卵巢畸胎瘤（ovarian teratoma） 母本印跡。,.,（二）基因?qū)壍呐咛ピ缙诎l(fā)育的調(diào)控,調(diào)控基因：母源基因，分節(jié)基因和同源異形基因（homeotic gene，hox）。 母源基因的產(chǎn)物是轉(zhuǎn)錄因子，控制其它基因表達(dá)。 前部系統(tǒng)，Bicoid（bcd） 后部系統(tǒng)， Nanos（nos） 末端系統(tǒng)，Torso（tor） 背腹系統(tǒng)，背Dorsal（dl），腹cactus（cat）,.,合子基因：分節(jié)基因、同源異形基因。 分節(jié)基因：控制胚胎分節(jié)，分為：間隙基因、對(duì)控基因、體節(jié)極性基因。 間隙基因，產(chǎn)物將胚分為相當(dāng)于3個(gè)體節(jié)的區(qū)域。 對(duì)控基因，將間隙基因分成的區(qū)域劃分為體節(jié)。 體節(jié)極性基因，在每個(gè)體節(jié)的前、后部細(xì)胞中表達(dá)，激活HOX基因，以形成和維持體節(jié)結(jié)構(gòu)。 HOX基因，決定每一體節(jié)的性質(zhì)與形態(tài)特征。,.,.,HOX的產(chǎn)物含含螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)，基因突變會(huì)引起同源形態(tài)結(jié)構(gòu)變異。特點(diǎn)： 1）基因呈簇存在，形成連鎖群； 2）DNA序列相似； 3）進(jìn)化上高度保守； 4）基因表達(dá)程序化：5端的基因表達(dá)空間靠近胚胎尾部區(qū)域；反之，靠近胚胎前部區(qū)域。 例：缺趾小鼠（Hoxa-13基因的雜合）、果蠅突變型。,.,HOX mutant Antenna leg,.,Bithorax mutant,.,八、同工結(jié)構(gòu)的變化,同工置換：在某一特定時(shí)期，一種細(xì)胞或分子被另一種相似、而能更好適應(yīng)環(huán)境的同工型取代。 例，哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育中： 有核紅細(xì)胞無核紅細(xì)胞 透明軟骨長(zhǎng)骨 恒齒乳齒 血紅蛋白從胚胎型、胎兒型到成年型過渡。,.,九、成體中的細(xì)胞分化,已存在的細(xì)胞功能由弱、強(qiáng)、減退到喪失。經(jīng)歷新生成熟衰老死亡的過程，如表皮細(xì)胞。 已有的分化細(xì)胞通過分裂產(chǎn)生兩個(gè)功能相同的細(xì)胞，如血管內(nèi)皮細(xì)胞。 干細(xì)胞的分裂與分化，如多能造血干細(xì)胞。,.,十、再生,廣義來看再生是生命的普遍現(xiàn)象，從分子、細(xì)胞到組織器官都具有再生現(xiàn)象。 1. 生理性再生：即細(xì)胞更新，如人的紅細(xì)胞。 2. 修復(fù)性再生：如壁虎、蠑螈、螃蟹、海參。 3. 無性繁殖。,.,THE TUMOR CELL,Breast Epithelial Tumor Cell,腫瘤細(xì)胞,.,腫瘤是細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)生長(zhǎng)的調(diào)控，導(dǎo)致異常增生。 良性腫瘤：生長(zhǎng)緩慢，邊界明顯。 惡性腫瘤：即癌癥，生長(zhǎng)快、具有遷移性。 腫瘤由實(shí)質(zhì)和間質(zhì)構(gòu)成，實(shí)質(zhì)是腫瘤細(xì)胞，間質(zhì)由結(jié)締組織和血管組成。,.,第一節(jié) 細(xì)胞的主要特征,metastatic lung tumor in liver,.,一、癌細(xì)胞的形態(tài)特征,核質(zhì)比顯著高于正常細(xì)胞，可達(dá)1:1； 出現(xiàn)巨核、雙核或多核，染色體呈非整倍體； 線粒體多型性、腫脹、增生； 細(xì)胞骨架紊亂； 細(xì)胞表面特征改變，產(chǎn)生腫瘤相關(guān)抗原。,.,二、生理特征,細(xì)胞周期失控； 遷移性； 接觸抑制喪失，可懸浮培養(yǎng)； 定著依賴性喪失； 去分化現(xiàn)象； 對(duì)生長(zhǎng)因子需要量降低； 代謝旺盛； 線粒體功能障礙； 可移植性。,.,.,Metastasis.,.,第二節(jié) 腫瘤形成的內(nèi)因,惡性腫瘤的形成涉及多個(gè)基因的改變。一、原癌基因(oncogene) 是促進(jìn)細(xì)胞增殖的基因，進(jìn)化上高度保守。 原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異，產(chǎn)物活性增強(qiáng)或增多時(shí)，使細(xì)胞過度增殖，形成腫瘤。,.,原癌基因產(chǎn)物： 生長(zhǎng)因子 生長(zhǎng)因子受體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)組分 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白 轉(zhuǎn)錄因子,.,原癌基因的類型,.,補(bǔ)充知識(shí),1966年Rous因發(fā)現(xiàn)雞肉瘤的病原體RSV，獲諾貝爾獎(jiǎng)。 1970年Temin 和Batimore證實(shí)RSV是反轉(zhuǎn)錄病毒，獲1975年諾貝爾獎(jiǎng)。 1970s Varmus和Bishop發(fā)現(xiàn)RSV中的致瘤基因是src。 c-onc：正常細(xì)胞中的癌基因；有內(nèi)含子。 v-onc：病毒中的癌基因，是連續(xù)的。,.,二、抑癌基因,抑癌基因：抑制增殖和遷移；促進(jìn)分化。基因的產(chǎn)物主要包括： 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子：如Rb、p53；負(fù)調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子：如WT；周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CKI），如p21； ras GTP酶活化蛋白：如NF-1；DNA修復(fù)因子：如BRCA1、BRCA2；磷脂酶：如PTEN；細(xì)胞粘附分子：如DCC。,.,抑癌基因的類型,.,Rb bind with E2F transcription factor,.,RB gene,.,p53 gene,.,三、原癌基因的激活,基因本身或其調(diào)控區(qū)發(fā)生變異，導(dǎo)致基因的過表達(dá)，或產(chǎn)物蛋白活性增強(qiáng)，使細(xì)胞過度增殖，形成腫瘤。 主要類型：點(diǎn)突變、基因擴(kuò)增、基因重排、病毒插入。,.,1. 點(diǎn)突變：ras基因家族，如膀胱癌中的c-Ha-ras基因僅有一個(gè)核苷酸的變異。 2. 基因擴(kuò)增：存在于某些造血系統(tǒng)惡性腫瘤中，如前髓細(xì)胞性白血病中，c-myc擴(kuò)增832倍。,.,Myc基因擴(kuò)增形成雙微體（黃色）的核型,.,Myc基因擴(kuò)增形成均染區(qū)（黃色）的核型,.,3. DNA重排：染色體的易位，使原癌基因處于活躍轉(zhuǎn)錄基因強(qiáng)啟動(dòng)子的下游，將產(chǎn)生過度表達(dá)，如Burkitt淋巴瘤。,.,4. 插入激活：某些不含v-onc的弱轉(zhuǎn)化逆轉(zhuǎn)錄病毒，具有冗長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR)，含有啟動(dòng)子、增強(qiáng)子，插入基因組后引起下游基因過表達(dá)。,.,.,Pathway leading to cancer,.,第三節(jié) 腫瘤形成的外因,致癌物分為：化學(xué)、生物和物理三類。 根據(jù)在致癌過程中的作用，又可分為； 啟動(dòng)劑：能DNA變異。 促進(jìn)劑：本身不誘發(fā)腫瘤，但有促進(jìn)作用。如糖精、苯巴比妥。 完全致癌物：兼具啟動(dòng)和促進(jìn)兩種作用。,.,一、化學(xué)致癌物,亞硝胺類，引起消化系統(tǒng)腫瘤； 多環(huán)芳香烴類，如苯并芘。 芳香胺類，乙萘胺、誘發(fā)泌尿系統(tǒng)的癌癥； 烷化劑類，芥子氣、環(huán)磷酰胺； 氨基偶氮類，奶油黃，可引起肝癌； 堿基類似物，如5-溴尿嘧啶、5-氟尿嘧啶； 氯乙烯，與塑料工人的肝血管肉瘤有關(guān)。 元素，如鉻、鎳、砷。,.,化學(xué)致癌物的作用機(jī)理： 可與 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物大分子中的親核基團(tuán)發(fā)生作用，引起堿基顛換、缺失，DNA交聯(lián)、斷裂，染色體畸變等。 引起細(xì)胞中胞嘧啶的甲基化水平降低。,.,二、生物性致癌因素,（一）腫瘤病毒 逆轉(zhuǎn)錄病毒，如：HTLV、ATLV、HIV、RSV； 乙型肝炎病毒（HBV）：原發(fā)性肝癌。 人乳頭瘤狀病毒（HPV）：生殖道腫瘤。 EpsteinBars病毒（EBV）；與兒童的 Burkitt淋巴瘤和成人的鼻咽癌發(fā)生有關(guān)。,.,HIV,Herpes Virus,Adenovirus,Mouse Leukemia Virus,.,（二）霉菌,已知數(shù)十種霉菌毒素有致癌性。 黃曲霉毒素B1是已知最強(qiáng)的化學(xué)致癌物之一，可引起肝癌。 黃曲霉菌廣泛存在于污染的食品中，尤以霉變的花生、玉米及谷類含量最多。,.,三、物理因素,（一）電離輻射 致癌機(jī)制：染色體或基因的突變；基因表達(dá)改變；激活潛伏的致癌病毒。 （二）紫外線 引起DNA斷裂、交聯(lián)和染色體畸變，抑制皮膚免疫功能，誘發(fā)皮膚癌、基底細(xì)胞癌和黑色素瘤。,.,Thanks!,71,