《高中生物《第二章 第二節(jié) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)》課件6 新人教版選修1》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高中生物《第二章 第二節(jié) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)》課件6 新人教版選修1（29頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)兩個(gè)主要目的從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣 的細(xì)菌專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)兩個(gè)主要目的從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣 的細(xì)菌CO（NH2）2 + H2OCO2+2NH3脲酶一 研究思路（一）篩選菌株耐高溫的DNA聚合酶一 研究思路（一）篩選菌株耐高溫的DNA聚合酶美國微生物學(xué)科布魯克 1966年發(fā)現(xiàn)水生耐熱細(xì) 菌Taq 分離到耐高溫的Taq DNA聚合

2、酶一 研究思路（一）篩選菌株自然界篩選：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境 中去尋找。一 研究思路（一）篩選菌株自然界篩選：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境 中去尋找。實(shí)驗(yàn)室篩選：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包 括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止 其他微生物生長。一 研究思路（一）篩選菌株選擇培養(yǎng)基：一 研究思路（一）篩選菌株選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物 生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生 長的培養(yǎng)基。目的是從眾多微生物中分離 所需要的微生物。 一 研究思路（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目1.顯微鏡直接計(jì)數(shù)：先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的 懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)

3、。根據(jù)在顯微 鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計(jì)算出單位體 積內(nèi)的微生物總數(shù)一 研究思路（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目1.顯微鏡直接計(jì)數(shù)：先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的 懸液放在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)在顯微 鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計(jì)算出單位體 積內(nèi)的微生物總數(shù)優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡單、能觀察微生物的形態(tài)特征。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌和活菌。一 研究思路（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法: 應(yīng)用： 統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生 長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一 個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能 推測出樣品中大約含有多少活菌。注意： 一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行記數(shù)。

4、一 研究思路（二）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法: 第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置 重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題，涂 布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù) 結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程 中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡單地將 3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。一 研究思路（三）設(shè)置對照增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力和準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)過一系列的稀釋，然后選擇 三個(gè)稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然 后培養(yǎng)。注意：為了結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀 釋度菌液涂布到3個(gè)或3個(gè)以上的平板上， 經(jīng)培養(yǎng)，計(jì)算出菌落的平均數(shù)。一 研究思路（三）設(shè)置對照判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污

5、染：將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：對照培養(yǎng)基接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中測得 平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣 品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液 的體積為0.1ml） A. 2.34108 B. 2.34109 C. 234 D. 23.4 每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106 的培養(yǎng)基中測得 平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣 品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液 的體積為0.1ml） A. 2.34108 B. 2.34109 C. 234 D.

6、23.4 每克樣品中的菌株數(shù) =（CV）M二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)方案、材料用具、實(shí)施步驟和時(shí)間 安排等。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣樣品系列稀釋涂布平板與培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果 菌落計(jì)數(shù)二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：（1）土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層 土3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn) 備好的信封中。（2）樣品的稀釋因?yàn)椴煌⑸镌谕寥乐泻坎煌?，其?的是保證獲得菌落數(shù)在30300之間。 不同。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：（3）微生物的培養(yǎng)與觀察培養(yǎng)皿編號(hào)：104、105、106各編號(hào)三個(gè) 培養(yǎng)皿。每個(gè)培養(yǎng)皿加入牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 15ml。用

7、移液管按照編號(hào)分別加入不同濃度土壤稀釋 冷卻倒置放入3037攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)。觀察紀(jì)錄。液各0. 1ml，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使土壤稀釋液與培養(yǎng)基混合均勻。三 操作提示1. 無菌操作2. 做好標(biāo)記3. 規(guī)劃時(shí)間四 結(jié)果分析與評價(jià)五 課題延伸1. 對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要 借助生物化學(xué)的方法。2. 在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合 成的脲酶將尿素分解成了氨 。氨會(huì)使培 養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高 。因此，我們 可以通過檢測培養(yǎng)基pH變化來判斷該化學(xué) 反應(yīng)是否發(fā)生。五 課題延伸3. 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚 紅指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高， 指示劑將變紅 ，說明該細(xì)菌

8、能夠分解尿素。練習(xí)1. 用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的 數(shù)目，其結(jié)果與實(shí)際值相比 A. 比實(shí)際值高 B. 比實(shí)際值低 C. 和實(shí)際值一致 D. 比實(shí)際值可能高也可能低練習(xí)1. 用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的 數(shù)目，其結(jié)果與實(shí)際值相比 A. 比實(shí)際值高 B. 比實(shí)際值低 C. 和實(shí)際值一致 D. 比實(shí)際值可能高也可能低練習(xí)2. 下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是 A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂、水 D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水練習(xí)2. 下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是 A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂、水 C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂、水 D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水