第第1講基因工程和細(xì)胞工程講基因工程和細(xì)胞工程 1(2011四川理綜)北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是() A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序 B將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白 C過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選 D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)解析：將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)相連成能表達(dá)的新基因，合成的蛋白質(zhì)為新的蛋白質(zhì)，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，故選項(xiàng)B正確；過程是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，由于沒有非編碼區(qū)和編碼區(qū)中的內(nèi)含子，不能用于比目魚基因組測(cè)序；用作運(yùn)載體的質(zhì)粒，必須具有標(biāo)記基因才能便于檢測(cè)和篩選；應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄中目的基因的存在和轉(zhuǎn)錄，但不能檢測(cè)是否成功表達(dá)，故選項(xiàng)A、C、D錯(cuò)誤。答案：B1基因工程的基本工具限制酶限制酶DNA連接酶連接酶載體載體作作用用切 割 目 的切 割 目 的基因和載體基因和載體連接連接DNA片片段 ， 形 成 重 組段 ， 形 成 重 組DNA攜 帶 目攜 帶 目的基因進(jìn)入的基因進(jìn)入受體細(xì)胞受體細(xì)胞作作用用部部位位兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸兩核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵間形成的磷酸二酯鍵限制酶限制酶DNA連接酶連接酶載體載體作作用用特特點(diǎn)點(diǎn)(條條件件)識(shí)別特定的識(shí)別特定的核苷酸序列核苷酸序列在特定位點(diǎn)在特定位點(diǎn)上切割上切割Ecoli DNA連接連接酶只連接黏性末端酶只連接黏性末端T4DNA連接酶連連接酶連接黏性末端和平末端接黏性末端和平末端能在宿主能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制大量復(fù)制有多個(gè)限有多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)制酶切割位點(diǎn)具有特殊具有特殊的標(biāo)記基因的標(biāo)記基因常常用用類類型型EcoR限制限制酶酶Sma限制酶限制酶Ecoli DNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶質(zhì)粒、噬菌質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒體、動(dòng)植物病毒2.基因工程的基本操作程序(1)目的基因的獲取從基因文庫中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；用化學(xué)方法直接人工合成。 (2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 基因表達(dá)載體的組成：目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因。 基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程 (3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)動(dòng)物細(xì)胞胞微生物細(xì)微生物細(xì)胞胞常常用用方方法法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管、基因槍法、花粉管通道法通道法顯微注顯微注射技術(shù)射技術(shù)感 受 態(tài) 細(xì)感 受 態(tài) 細(xì)胞法胞法(用用Ca2處處理理)受受體體細(xì)細(xì)胞胞受精卵、體細(xì)受精卵、體細(xì)胞胞受精卵受精卵原核細(xì)胞原核細(xì)胞(4)目的基因的檢測(cè)和表達(dá)類類型型步驟步驟檢測(cè)內(nèi)容檢測(cè)內(nèi)容方法方法結(jié)果顯示結(jié)果顯示分分子檢測(cè)子檢測(cè)第一步第一步目的基因是否整目的基因是否整合 到 受 體 細(xì) 胞 染 色 體合 到 受 體 細(xì) 胞 染 色 體DNA上上DNA分子雜分子雜交交(DNA和和DNA之間之間)技術(shù)技術(shù)是否成是否成功顯示功顯示出雜交帶出雜交帶第二步第二步目的基因是否轉(zhuǎn)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出錄出mRNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)(DNA和和mRNA之間之間)同上同上第三步第三步目的基因是否翻目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)譯出蛋白質(zhì)抗原抗原抗體雜交抗體雜交同上同上個(gè)個(gè)體體水水平平鑒鑒定定包括做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；對(duì)基因工程包括做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；對(duì)基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定功能是否相同產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定功能是否相同3.蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過過程程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推推測(cè)氨基酸序列測(cè)氨基酸序列找到對(duì)應(yīng)找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列的脫氧核苷酸序列合成合成DNA表達(dá)出蛋白質(zhì)表達(dá)出蛋白質(zhì)獲取目的基獲取目的基因因構(gòu)建表達(dá)載構(gòu)建表達(dá)載體體導(dǎo)入受體細(xì)導(dǎo)入受體細(xì)胞胞目的基因的目的基因的檢測(cè)與鑒定檢測(cè)與鑒定項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別實(shí)實(shí)質(zhì)質(zhì)定向改造或生定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)結(jié)果果生產(chǎn)自然界沒生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)項(xiàng)項(xiàng)目目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程聯(lián)聯(lián)系系蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，因?yàn)閷?duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的第二代基因工程，因?yàn)閷?duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，必須通過基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)，必須通過基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn) 2(2011江蘇卷)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是() A愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 B二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得解析：本題考查植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。A項(xiàng)中愈傷組織是一團(tuán)排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能。B項(xiàng)中二倍體植株的花粉中只含一個(gè)染色體組，培養(yǎng)得到的個(gè)體為單倍體，高度不育，其幼苗需用秋水仙素處理后才能穩(wěn)定遺傳；C項(xiàng)中愈傷組織不能用于制備人工種子。D項(xiàng)中用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需要的突變體類型。答案：D1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)前處前處理理無 菌 、 用 胰 蛋 白 酶 處無 菌 、 用 胰 蛋 白 酶 處理，使組織細(xì)胞相互分散開理，使組織細(xì)胞相互分散開無菌、離體無菌、離體培養(yǎng)培養(yǎng)基成基成分分葡萄糖、氨基酸、無機(jī)葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、促生長因子、微量元素、鹽、促生長因子、微量元素、動(dòng)物血清等動(dòng)物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等維生素、植物激素等項(xiàng)目項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)能否能否培培養(yǎng)成養(yǎng)成個(gè)體個(gè)體不能不能能能應(yīng)用應(yīng)用舉例舉例大規(guī)模生產(chǎn)有重要大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品，如病價(jià)值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；皮膚移植；隆抗體等；皮膚移植；檢測(cè)有毒物質(zhì)的毒性等檢測(cè)有毒物質(zhì)的毒性等快速繁殖、培快速繁殖、培育無病毒植株；生育無病毒植株；生產(chǎn)藥物；制造人工產(chǎn)藥物；制造人工種子；培育轉(zhuǎn)基因種子；培育轉(zhuǎn)基因作物等作物等2.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合比較細(xì)細(xì)胞工胞工程程植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合理理論基論基礎(chǔ)礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖誘誘導(dǎo)手導(dǎo)手段段物理法：離心、物理法：離心、振動(dòng)、電激振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二化學(xué)法：聚乙二醇醇物理法：離心、物理法：離心、振動(dòng)、電激振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二化學(xué)法：聚乙二醇醇生物法：滅活病生物法：滅活病毒毒細(xì)細(xì)胞工程胞工程植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合誘誘導(dǎo)過程導(dǎo)過程去細(xì)胞壁去細(xì)胞壁(纖維素酶、果膠酶纖維素酶、果膠酶)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合(獲得雜種原生質(zhì)體獲得雜種原生質(zhì)體)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(獲得植株獲得植株)獲得分離的單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞獲得分離的單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞(胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶)誘導(dǎo)融合誘導(dǎo)融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞產(chǎn)品)應(yīng)應(yīng)用用白菜白菜甘藍(lán)等雜種植物甘藍(lán)等雜種植物單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備(雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞)相相同點(diǎn)同點(diǎn)兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱克隆，都不兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂；涉及減數(shù)分裂；均為無菌操作，需要適宜的溫度、均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件等條件3.單克隆抗體(1)制備過程(2)特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量生產(chǎn)。1核移植和植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代中都含有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)；植物組織培養(yǎng)和人工種子產(chǎn)生的后代中都只含一個(gè)親本的遺傳物質(zhì)。2植物細(xì)胞培養(yǎng)中去掉細(xì)胞壁的原因是這層細(xì)胞壁阻礙了植物體細(xì)胞雜交融合；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織的目的是使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。3制備單克隆抗體過程中有兩次篩選第一次篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及BB融合、瘤瘤融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B瘤融合的細(xì)胞。第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)的辦法篩選出來。因?yàn)閺捏w內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種，形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種，所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (2011浙江理綜卷浙江理綜卷)將將ada(腺苷酸脫氨酶基因腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)通過質(zhì)粒粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是錯(cuò)誤的是()A每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD每個(gè)插入的每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子解析：受體大腸桿菌成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶，說明每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含有一個(gè)重組質(zhì)粒，且每個(gè)ada至少指導(dǎo)合成一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子。重組質(zhì)粒的形成需先用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒形成相同的黏性末端，再在DNA連接酶的作用下連接起來，連接起來的序列中會(huì)含有限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)。不同的限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)不同，不是每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)都能插入ada，C項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：C 1轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四種限制酶切割位點(diǎn)，培養(yǎng)皿中含有卡那霉素，會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長。下列說法錯(cuò)誤的是()A構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶Pst、Sma 對(duì)含抗病基因的DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割B導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因C香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株D圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的脫分化，再分化答案：A (2011北京東城一模)下圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖。有關(guān)敘述正確的是() A利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子 B過程中都會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化 C多倍體植株的培育需經(jīng)過如圖所示過程 D此過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性解析：植物的組織培養(yǎng)過程是無性繁殖的過程，如果離體的組織來自純合子，將來得到的試管苗是純合子，如果離體的組織來自雜合子，將來得到的試管苗是雜合子；為脫分化，為再分化，脫分化過程沒有細(xì)胞的分化；用秋水仙素處理萌發(fā)的種子和幼苗培養(yǎng)就可獲得多倍體植株，不需組織培養(yǎng)過程；植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性而不是細(xì)胞膜流動(dòng)性。答案：A 2下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是() A利用組織培養(yǎng)技術(shù)能夠培育脫毒苗 B利用組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生突變體，不一定能直接培育出具有優(yōu)良性狀的新品種 C利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草素，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn) D利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“蘿卜甘藍(lán)”，不遵循基因的自由組合定律，但遵循基因的分離定律解析：取根尖、莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得無病毒植株。突變是不定向的，利用組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生突變體，不一定能直接培育出具有優(yōu)良性狀的新品種。植物體細(xì)胞雜交是用兩個(gè)來自不同植物的體細(xì)胞融合成一個(gè)雜種細(xì)胞，并且把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的方法，沒有減數(shù)分裂過程，所以不遵循基因的自由組合定律和基因的分離定律。答案：D (2011山東濟(jì)寧市一模)對(duì)于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是() A表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B中的篩選是通過抗原、抗體反應(yīng)進(jìn)行的 C促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D可以無限增殖解析：?jiǎn)慰寺】贵w是利用效應(yīng)B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到，融合方法可以有化學(xué)方法聚乙二醇，生物方法滅活病毒；如果要篩選可以通過檢測(cè)抗原、抗體反應(yīng)，如果有反應(yīng)說明表達(dá)了抗體；融合細(xì)胞具有雙親特點(diǎn)，既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。B淋巴細(xì)胞也可以從血漿中提取。答案：A 3(2011南京二模)下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是() 從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞從小鼠腹水中提取抗體利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合 A實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)該是 B過程產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過程稱為克隆 C過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖 D利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過程中通常要經(jīng)過兩次篩選解析：在細(xì)胞融合過程中，如果只考慮兩兩細(xì)胞的融合，有骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，雜交瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的融合，B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合，其中B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合不能無限增殖。答案：C1下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是()A目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物B限制酶和DNA連接酶都能識(shí)別特異的堿基序列，是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原具有生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)答案：A 2下列有關(guān)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的描述，不正確的是() A利用植物體細(xì)胞雜交可以獲得某種多倍體植株 B獲得原生質(zhì)體的過程中需要纖維素酶和果膠酶 C通常用聚乙二醇或滅活病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 D可根據(jù)細(xì)胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定雜種細(xì)胞解析：滅活病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法，而不能誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合。答案：C 3(2011浙江五校高三聯(lián)考)某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy)基因a，通過基因工程的方法，將a轉(zhuǎn)到馬鈴薯植株中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在，下列說法正確的是() A基因a只有導(dǎo)入到馬鈴薯受精卵中才能表達(dá) B目的基因來自細(xì)菌，可以不需要載體直接導(dǎo)入受體細(xì)胞 C基因a導(dǎo)入成功后，將抑制細(xì)胞原有的新陳代謝，開辟新的代謝途徑 D目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，可隨著馬鈴薯的DNA分子的復(fù)制而復(fù)制，傳給子代細(xì)胞并表達(dá)解析：培育轉(zhuǎn)基因植株可以以體細(xì)胞或受精卵作為受體細(xì)胞；目的基因必須借助載體才能導(dǎo)入受體細(xì)胞；目的基因?qū)氤晒?，不抑制?xì)胞原有的代謝途徑。答案：D 4(2011南京二模)某研究小組對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行培養(yǎng)，下列敘述正確的是() A制備肝細(xì)胞懸浮液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶 B肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸 C為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素 D用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法，可推斷乙細(xì)胞比甲細(xì)胞增殖周期長解析：制備肝細(xì)胞懸浮液時(shí)，用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散開；肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2的目的是調(diào)節(jié)pH；為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；腫瘤細(xì)胞、癌細(xì)胞有無限增殖的能力，即分裂旺盛，細(xì)胞周期會(huì)縮短。答案：D 5下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是() A電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合 B去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理 C小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體 D某種植物有甲、乙兩品種，利用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“甲乙”雜種植株和甲、乙兩品種雜交獲得的后代染色體數(shù)目相同解析：本題考查細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。植物原生質(zhì)體融合與動(dòng)物細(xì)胞融合都可以用電激法；在植物體細(xì)胞雜交過程中，去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁需要用纖維素酶和果膠酶，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞需要用胰蛋白酶；單克隆抗體的制備需要用小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫的小鼠的B淋巴細(xì)胞；體細(xì)胞雜交由細(xì)胞融合而來，雜種細(xì)胞染色體數(shù)目為兩品種染色體數(shù)目之和，雜交是通過有性生殖獲得后代，后代染色體數(shù)目是甲、乙兩品種體細(xì)胞染色體數(shù)目之和的一半。答案：D 6下列有關(guān)單克隆抗體的制備及其應(yīng)用的敘述，不正確的是() A制備單克隆抗體運(yùn)用到的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) B需要用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞 C需要從雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞 D利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥就是利用了單克隆抗體能清除癌細(xì)胞解析：利用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥是利用了單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的部位，用藥物消滅癌細(xì)胞，單克隆抗體是不能清除癌細(xì)胞的。答案：D7(2011安徽理綜卷)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_和_之間。 (3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴(kuò)增緩沖液(含Mg2)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、_和_。 (4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。解析：(1)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，動(dòng)物組織會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞。(2)啟動(dòng)子和終止子是基因正常轉(zhuǎn)錄所必需的，啟動(dòng)子位于基因首端，它能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，終止子位于基因尾端，使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停下來，所以人的干擾素基因片段，應(yīng)正確插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間。(3)PCR反應(yīng)體系的主要成分除了已知的以外，還包括DNA引物對(duì)、Taq DNA聚合酶。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞貼附于底物上才能很好地生長增殖，但又會(huì)產(chǎn)生接觸抑制，反應(yīng)器中放進(jìn)多孔中空薄壁小玻璃珠，就可以擴(kuò)大細(xì)胞貼附底物的面積，解決接觸抑制的問題，增加培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量，并有利于空氣交換。答案：(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(2)啟動(dòng)子終止子(3)對(duì)干擾素基因特異的DNA引物對(duì)Taq DNA聚合酶(4)擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長的附著面積練規(guī)范、練速度、練技能練規(guī)范、練速度、練技能課時(shí)作業(yè)返回目錄