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2019-2020年高考生物 備戰(zhàn)5年真題 專題14 現(xiàn)代生物科技 【xx高考試題】 1.（xx廣東卷）華南虎是國家一級保護(hù)動物，可采用試管動物技術(shù)進(jìn)行人工繁殖，該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有:①轉(zhuǎn)基因 ②核移植 ③體外受精 ④體細(xì)胞克隆 ⑤胚胎移植 A. ①③ B. ①④ C. ②⑤ D. ③⑤ 答案：D 解析：本題考查胚胎工程的應(yīng)用，屬于對識記、理解層次的考查。試管動物技術(shù)是指把經(jīng)過體外受精獲得的早期胚胎移植到假孕動物子宮發(fā)育而產(chǎn)生的動物。 2.（xx浙江卷）將 ada（腺苷酸脫氨酶基因）通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是 A.每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重細(xì)胞質(zhì)粒 B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn) C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn)至少插入一個ada D.每個插入的ada至少表達(dá)一個腺苷酸脫氨酶分子 3、（xx江蘇卷）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是 A．蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì) B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體 C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以用于植物莖尖脫毒 D．動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培養(yǎng) 答案：B 解析：克隆動物應(yīng)用的是細(xì)胞核移植技術(shù)，所以B選項敘述錯誤。 4、（xx江蘇卷）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是 A．體外受精是指獲能的精子和成熟的卵子在相應(yīng)溶液中受精 B．受精卵發(fā)育到原腸胚階段才能進(jìn)行胚胎移植 C．早期胚胎培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需要加入血清 D．試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù) 答案：B 解析：受精卵發(fā)育到囊胚階段就可以進(jìn)行胚胎移植，所以B選項的敘述是錯誤的。 5.（xx天津卷）下列敘述正確的是 A．胚胎發(fā)育過程中不存在細(xì)胞衰老或凋亡現(xiàn)象 B．用小鼠不同器官和組織構(gòu)建的cDNA文庫相同 C．垂體功能受損的幼犬會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象 D．刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程屬于反射 6.（xx浙江卷）培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示。若要培育成功，下列敘述正確的是 A甲過程中可通過給母山羊注射有關(guān)激素使用其超數(shù)排卵 B乙過程的目的之，是促進(jìn)卵母細(xì)胞和精子的成熟 C丙過程與乙過程中應(yīng)采用相同成分的培養(yǎng)液 D丁過程中早期胚胎須移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi) 答案：A 解析：本題考查有關(guān)體外受精等相關(guān)的知識。首先是精子的采集和獲能，卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，在此過程中為了讓雌性動物排出更多的卵母細(xì)胞，甲應(yīng)為對雌性動物采用注 射促性腺激素讓其超數(shù)排卵，乙過程是促進(jìn)其完成體外受精，丙過程是早期胚胎發(fā)育過程，丁過程是在母體內(nèi)完成胚胎發(fā)育全過程；所以A選項是正確的；乙過程是完成受精作用，所以B選項是錯誤的；C選項是乙過程在專用獲能培養(yǎng)液或受精溶液中，而丙過程是細(xì)胞培養(yǎng)過程，所以培養(yǎng)液的成分是不同，C錯誤；D選項中早期胚胎移植到與供體處于同期發(fā)情即同時采用促性腺激素處理的母體內(nèi)，所以D選項是錯誤的。 7.（xx安徽卷）Ⅱ.（9分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。 (1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。 (2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。 (3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。 (4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。 8、（xx江蘇卷）請回答基因工程方面的問題：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞同DNA復(fù)制類似（如下圖所示）。 圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。 ①從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為　▲　。 ②在第　▲　輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。 （2）設(shè)計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖），請分別說明理由。 ① 第1組：　▲?。虎诘诙M　▲　。 （3）PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)椤　　? （4）用限制酶EcoR、MboⅠ 單 獨(dú)或立命切割同一種質(zhì)料，得到的DNAT片段長度如下圖（1kb即1000個堿基對），請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)料上EcoR、MboⅠ 的切割位點(diǎn)。 答案：（1）15/16 三（2）引物和引物局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對而失效 引物自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對而失效 （3）DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上 （4）見下圖 Mbol Mbol 2.5kb 5.5kb 6kb 質(zhì)粒 EcoRv 9.T-DNA可隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1代）。 (1)為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的會抑制側(cè)芽的生長。 (2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將T1代播種在含的培養(yǎng)基上生長，成熟后自交，收獲種子（稱為T2代）。 (3)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T2代播種在含的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。 (4)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與植株進(jìn)行雜交，再自交代后統(tǒng)計性狀分離比。 (5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性。 (6)根據(jù)T—DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。其過程是：提取一植株的DNA，用限制酶處理后，再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如右圖），以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取作為引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息。 10（xx福建卷）一對表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個鐮刀型細(xì)胞貧血癥（常染色體隱性遺傳?。┗純?。在他們欲生育第二胎時，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精。醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，過程如右圖。 請回答： （1）過程①是指在體外進(jìn)行的處理，從而使精子與卵子結(jié)合形成受精卵；過程②稱為。 （2）在對胎兒進(jìn)行鐮刀形細(xì)胞貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時，要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取物質(zhì)③進(jìn)行PCR擴(kuò)增。然后用Ⅱ?qū)U(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割，產(chǎn)生多個片段的酶切產(chǎn)物。據(jù)此判斷，Ⅱ是一種酶。 （3）不同長度的酶切產(chǎn)物在電泳時移動的速率不同，形成不同的電泳條帶。該家庭成員的鐮刀型細(xì)胞貧血癥基因分析的電泳帶譜如④，據(jù)此判斷胎兒為（正常/患者/攜帶者）。 11.（xx山東卷）人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。（3）子代大鼠如果________和__________，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型。 （4）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是___________、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。 12.（xx四川卷）北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是 A過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序 B多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白 C過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選 D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá) 答案：B 解析：過程1獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚基因組測序，因此A錯。導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入蕃茄細(xì)胞，C錯。DNA探針技術(shù)不能檢測基因是否完全表達(dá)，D錯。 13.（xx廣東卷） 登革熱病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人時將病毒傳染給人，可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克?？茖W(xué)家用以下方法控制病毒的傳播。 （1）將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi)，使蚊子的唾液腺細(xì)胞大量表達(dá)S蛋白，該蛋白可以抑制登革熱病毒的復(fù)制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子，需要將攜帶S基因的載體導(dǎo)入蚊子的細(xì)胞。如果轉(zhuǎn)基因成功，在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測出、和。 （2）科學(xué)家獲得一種顯性突變蚊子（AABB）。A、B基因位于非同源染色體上，只有A或B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊（AABB）與野生型雌蚊（aabb）交配，F(xiàn)1群體中A基因頻率是，F(xiàn)2群體中A基因頻率是。 （3）將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置（如圖11），將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中，群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會逐代，原因是。 14.（xx重慶卷）擬南芥是遺傳學(xué)研究的模式植物，某突變體可用于驗(yàn)證相關(guān)的基因的功能。野生型擬南芥的種皮為深褐色（TT），某突變體的種皮為黃色（tt）,下圖是利用該突變是.若③的種皮顏色為，則說明油菜基因與擬南芥T基因的功能相同。 （3）假設(shè)該油菜基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個t基因，則③中進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在聯(lián)會時的基因?yàn)椋煌瑫r，③的葉片卷曲（葉片正常對葉片卷曲為顯性，且與種皮性狀獨(dú)立遺傳），用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交，其后代中所占比列最小的個體表現(xiàn)為；取③的莖尖培養(yǎng)成16顆植珠，其性狀通常 （填 不變或改變）。 （4）所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥（填是或者不是）同一個物種。 答案：（1）2 （2）重組質(zhì)粒（重組DNA分子）；重組質(zhì)粒未導(dǎo)入；深褐色 （3）TnTnt t。；黃色正常、黃色卷曲；不變 （4）是 解析：通過對基因工程和遺傳知識相結(jié)合來考查學(xué)生對該部分知識的掌握，屬中檔題，較難。油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)锳GA，而末端序列為“——AGCGCGACCAGACUCUAA——”，在擬南芥中的UGA本是終止密碼子不編碼氨基酸，而在油菜中變?yōu)锳GA可編碼一個氨基酸，而CUC還可編碼一個氨基酸，直到UAA終止密碼子不編碼氨基酸。假設(shè)油菜Tn基因連接到擬南芥染色體并替換其是一個t基因，注意擬南芥是指實(shí)驗(yàn)有的突變體tt，所以③轉(zhuǎn)基因擬南芥基因型為Tnt，減數(shù)分裂聯(lián)會時形成四分體是由于染色體進(jìn)行了復(fù)制，基因也進(jìn)行了復(fù)制，因而基因型為TnTnt t。 設(shè)③轉(zhuǎn)基因擬南芥的葉片卷曲與正常葉是由B、b基因控制，正常葉為顯性，而該對性狀與種皮性狀為獨(dú)立遺傳，則這兩對性狀遵循基因的分離與自由組合定律。則： ③轉(zhuǎn)基因擬南芥 ╳ 雙雜合擬南芥 Tntbb TtBb 進(jìn)行逐對分析：Tnt╳Tt 1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt 、1/4tt 由于Tn和T的功能相同，所以表示為3/4T--（深褐色）、1/4tt（黃色） bb╳Bb 1/2 Bb（正常葉）、1/2 bb（卷曲葉） 所以后代中有四種表現(xiàn)型； 3/8種皮深褐色正常葉；3/8種皮深褐色卷曲葉 1/8種皮黃色正常葉；1/8種皮黃色卷曲葉 取③轉(zhuǎn)基因擬南芥的莖尖培養(yǎng)為植物組織培養(yǎng)為無性生殖，所以后代性一般不變。（排除基因突變） 由上可知所得③轉(zhuǎn)基因擬南芥Tnt和野生型擬南芥TT兩個品種相當(dāng)于發(fā)生基因突變，沒有隔離，能雜交產(chǎn)生可育后代，因此是同一個種。 15.（xx天津卷）絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能與石油污水中的懸（4）目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________________的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌，選擇效果最好的最為目的菌株。 （5）為探究目的菌株不同發(fā)酵時間發(fā)酵液的絮凝效果，將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，定時取發(fā)酵液，加入石油污水中：同時設(shè)置_____________________________為對照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后，分別測定上層水樣的石油濃度COD值（COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高）,計算石油去除率和COD去除率，結(jié)果如下圖。 （6）目的菌的種群增長曲線是_____________型。在40～44小時，發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好，其原因是___________________________________________________。 16（xx新課標(biāo)全國卷）現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng)，處理流程為“厭氧沉淀池曝光池兼氧池植物池”，其中植物池中生活著水生植物、昆蟲、魚類、蛙類等生物。污水經(jīng)凈化處理后，可用于澆灌綠地。回答問題： （1）經(jīng)厭氧沉淀池。曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個過程中，微生物通過 呼吸將有機(jī)物分解。 （2）植物池中，水生生物、昆蟲、魚類、蛙類和底泥中的微生物共同組成了（生態(tài)系統(tǒng)、菌落、種群）。在植物池的食物網(wǎng)中，植物位于第營養(yǎng)級。植物池中所有蛙類獲得的能量最終來源于所固定的能。 （3）生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、和等原理。一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對進(jìn)行修復(fù)，對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。 答案：（1）有氧和無氧（或細(xì)胞） （2）群落 一 生產(chǎn)者 太陽能 （3）物種多樣性 物質(zhì)循環(huán)再生 （4）已被破壞的生態(tài)環(huán)境（或受損的生態(tài)系統(tǒng)） 解析：本題綜合考查群落和生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、生態(tài)工程的基本原理等相關(guān)知識。屬于對識記層次的考查。（1）在厭氧沉淀池，微生物進(jìn)行無氧呼吸；在曝氣池，微生物主要進(jìn)行有氧呼吸；在兼氧池，微生物既能進(jìn)行有氧呼吸，又能進(jìn)行無氧呼吸。（2）群落是棲息于一定地域或生境中各種生物種群通過相互作用而有機(jī)結(jié)合的集合體，包括給定區(qū)域的所有生物。（3）生態(tài)工程的基本原理包括物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)學(xué)與工程學(xué)原理。（4）見答案。 【xx年高考試題】 1.（xx浙江卷）2.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中，下列操作錯誤的是（ ） A. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸 B. 用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體 C. 將重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體 D. 用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞 答案：A 解析：本題考查基因工程的有關(guān)知識，基因工程的一般過程：①用限制性核酸內(nèi)切酶切割含目的基因的DNA分子（除草劑基因）和運(yùn)載體（質(zhì)粒），②用DNA連接酶連接切割好的目的基因和運(yùn)載體③重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，因?yàn)槭侵参锟梢哉f是原生質(zhì)體④用相應(yīng)的試劑和病原體帥選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草（表達(dá)）。所以答案A。 2.（xx福建卷）32．[生物—現(xiàn)代生物科技專題](10分) 紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖 （1）圖中①所指的是技術(shù)。 （2）圖中②所指的物質(zhì)是，③所指的物質(zhì)是 。 （3）培養(yǎng)重組CHO 細(xì)胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞嚴(yán)物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換。 （4）檢測 rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的細(xì)胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成 答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培養(yǎng)液 （4）雜交瘤 解析：本題主要以人紅細(xì)胞生成素生產(chǎn)為材料來考查基因工程和細(xì)胞工程中動物細(xì)胞培養(yǎng)技 術(shù)、制備單克隆抗體技術(shù)。獲取目的基因的方法有四種（從基因文庫中獲取、用PCR擴(kuò)增技術(shù)、用反轉(zhuǎn)錄法、用化學(xué)合成法）由圖以核DNA為模板獲得目的基因的方法可知①為PCR技術(shù)。進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄的模板是mRNA。由題意可知重組CHO細(xì)胞適用于生產(chǎn)重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO），所以重組CHO細(xì)胞能過表達(dá)出重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）或者紅細(xì)胞生成素。培養(yǎng)動物細(xì)胞是用液體培養(yǎng)基——即培養(yǎng)液，細(xì)胞從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)，并同時向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當(dāng)代謝廢物積累時會危害細(xì)胞，因此要不斷更新培養(yǎng)液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，然后由雜交瘤細(xì)胞來分泌抗體。 3.（xx全國2）5. 下列敘述符合基因工程概念的是 A．B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因 B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株 C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株 D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上 【解析】A:屬于動物細(xì)胞工程的內(nèi)容C: 屬于微生物的發(fā)酵工程的內(nèi)容D:自然狀態(tài)下，一般不能自行形成重組DNA分子 4.（xx廣東卷）22.新技術(shù)的建立和應(yīng)用對生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是 1. PCR技術(shù)——擴(kuò)增蛋白質(zhì) B.雜交瘤技術(shù)——制備單克隆抗體 C.光學(xué)顯微鏡——觀察葉綠體的基粒 D.花粉離體培養(yǎng)——培育單倍體植物 【解析】本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來擴(kuò)增核酸，不能用來擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無法觀察到葉綠體。 【答案】BD 5.（xx天津卷）7.（26分） Ⅰ.（14分）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 （填字母代號）。 A.啟動子 B. tetR C.復(fù)制原點(diǎn) D. ampR （3）過程①可采用的操作方法是 （填字母代號）。 A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B. 大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D. 細(xì)胞融合 （4）過程②可采用的生物技術(shù)是 。 （5）對早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。這利用了細(xì)胞的 性。 （6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 （填字母代號）技術(shù)。 A.核酸分子雜交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗體雜交 D. PCR 【答案】Ⅰ.（14分） （1） HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素 （2） A （3） C （4） 胚胎移植技術(shù) （5） 全能 （6） C 率增加，B項錯誤；動物生長素基因轉(zhuǎn)入植物后也能表達(dá)，C項錯誤；轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題，要通過驗(yàn)證才能得到證實(shí)，D項錯誤。 7.（xx江蘇卷）27．（8分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圈l、圈2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答下列問題： （1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前后，分別含有 ▲ 個游離的磷酸基團(tuán)。 （2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 ▲ 。 （3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 ▲ 。 （4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 ▲ 。 （5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 ▲ 酶。 （6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 ▲ 。 （7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 ▲ 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。 【答案】（1）0、2 （2）高 （3）SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化 （5）DNA連接 （6）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞 （7）蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì) 收蔗糖，因此可利用蔗糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)受體細(xì)胞，含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞才能存活，不含有重組質(zhì)粒的因不能獲得碳源而死亡，從而達(dá)到篩選目的。 8.（xx海南卷）26．（18分）［選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題］ 請回答胚胎工程和基因工程方面的問題： （1）應(yīng)用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管?！?。試管牛的培育需經(jīng)過體外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程。 （2）在“試管?！钡呐嘤^程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行處理，使其＿＿＿＿＿。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細(xì)胞和＿＿＿＿＿。 （3）通常奶牛每次排出一枚卵母細(xì)胞，采用激素處理可使其一次排出多枚卵母細(xì)胞，常使用的激素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 （4）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€基本操作步驟是＿＿＿＿＿＿＿、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和復(fù)制原點(diǎn)等。將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺細(xì)胞）。 【答案】 （1）早期胚胎培養(yǎng)（1分）　　胚胎移植（2分） （2）獲能　　第一極體（每空1分，共2分） （3）促性腺激素（其他合理答案也給分）（2分） （4）獲取目的基因（2分）　　將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（2分） 目的基因的檢測與鑒定（2分）　　人干擾素基因（或目的基因）（1分） 終止子（1分）　　標(biāo)記基因（1分）　　顯微注射法（1分）　　受精卵（1分） 9.（xx浙江卷）4.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(D) A. 培養(yǎng)保留接觸抵制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變 C. 二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的 D. 惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行付代培養(yǎng) 解析：本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識，動物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代,因?yàn)榧?xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞接觸時就會停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過程中進(jìn)行的為有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細(xì)胞基因型相同),但是細(xì)胞在培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會死亡,留下來的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,但是仍保留接觸抑制現(xiàn)象,所以還是要傳代培養(yǎng),這個也就是人體中癌細(xì)胞會轉(zhuǎn)移的原因,所以答案為D. 10.（xx浙江卷）30．蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的毒蛋白能使螟蟲死亡。研究人員將表達(dá)這種毒蛋白的抗螟蟲基因轉(zhuǎn)入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因組中，培育出一批轉(zhuǎn)基因抗螟水稻。請回答： （1）染色體主要由＿＿＿＿＿＿＿＿組成，若要確定抗螟基因是否已整合到水稻的某一染色體上，方法之一是測定該染色體的＿＿＿＿＿＿＿。 （2）選用上述抗螟非糯性水稻與不抗螟糯性水稻雜交得到F1，從F1中選取一株進(jìn)行自交得到F2，F(xiàn)2的結(jié)果如下表： 表現(xiàn)型　　　抗螟非糯性　　　抗螟糯性　　　不抗螟非糯性　　不抗螟糯性 個體數(shù)　　　　142　　　　　　　48　　　　　　　50　　　　　　　16 分析表中數(shù)據(jù)可知，控制這兩對性狀的基因位于＿＿＿＿染色體上，所選F1植株的表現(xiàn)型為＿＿＿＿＿。親本中抗螟非糯性水稻可能的基因型最多有＿＿＿＿＿種。 （3）現(xiàn)欲試種這種抗螟水稻，需檢驗(yàn)其是否為純合子，請用遺傳圖解表示檢驗(yàn)過程（顯、隱性基因分別用B、b表示），并作簡要說明。 （4）上表中的抗螟水稻均能抗稻瘟?。沟疚敛轱@性性狀），請簡要分析可能的原因。 ①＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ②＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 解析：本題主要考查遺傳方面的知識，需要掌握兩對等位基因的遺傳性狀和遺傳圖解的規(guī)范書寫，該題從染色體的組成開始，借助轉(zhuǎn)基因的相關(guān)知識，然后就研究兩對相對性狀的遺傳性、（9:3:3:1），但是特別需要弄清出在這個題目中有三個相對性狀抗螟蟲和不抗螟蟲、非糯性和糯性、抗稻瘟病和不抗稻瘟病，審題仔細(xì)了第（4）小題就不會做錯。 （3） 把改抗螟水稻和不抗螟水稻進(jìn)行雜交，若出現(xiàn)性狀分離則為雜合子，若沒有性狀分離，則為生成素(rhEPO），所以重組CHO細(xì)胞能過表達(dá)出重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO）或者紅細(xì)胞生成素。培養(yǎng)動物細(xì)胞是用液體培養(yǎng)基——即培養(yǎng)液，細(xì)胞從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)，并同時向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當(dāng)代謝廢物積累時會危害細(xì)胞，因此要不斷更新培養(yǎng)液。制備單克隆抗體是讓淋巴B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，然后由雜交瘤細(xì)胞來分泌抗體。 12.（xx山東高考理綜）35. 【生物-現(xiàn)代生物科技專題】胚胎工程是一項綜合性的動物繁育技術(shù)，可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程。 （1）從良種母牛采集的卵母細(xì)胞，都需要進(jìn)行體外培養(yǎng)，其目的是_____；從良種公牛采集的精子需_____后才能進(jìn)行受精作用。 （2）在體外培養(yǎng)受精卵時，除了給予一定量的O2以維持細(xì)胞呼吸外，還需要提供____氣體以維持____。 （3）圖中過程A稱為_____，它在胚胎工程中的意義在于_____。 （4）研制能夠產(chǎn)生人類白細(xì)胞介素的牛乳腺生物反應(yīng)器，需將目的的基因?qū)肱Ｊ芫眩畛Ｓ玫膶?dǎo)入方法是____；獲得轉(zhuǎn)基因母牛后，如果_____即說明目的基因已經(jīng)表達(dá)。 【答案】 （1）使卵母細(xì)胞成熟（或：使卵母細(xì)胞獲得受精能力）； 獲能 （2）CO2 ； 培養(yǎng)液（基）的pH （3）胚胎移植 提高優(yōu)良母畜的繁殖率。 （4）顯微注射法 牛奶中含有人類白細(xì)胞介素（或：牛乳腺細(xì)胞已合成人類白細(xì)胞介素） 13.（xx江蘇卷）16．下列關(guān)于利用胚胎工程技術(shù)繁殖優(yōu)質(zhì)奶羊的敘述．錯誤的是 A．對受體母羊與供體母羊進(jìn)行同期發(fā)情處理 B．人工授精后的一定時間內(nèi)，收集供體原腸胚用于胚胎分割 C．利用胚胎分剖技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎 D．一次給受體母羊檀人多個胚胎．可增加雙胞胎和多胞胎的比例 【答案】B 【解析】本題考查了胚胎工程及考生理解問題的能力。進(jìn)行胚胎分割要用囊胚或桑椹胚期的胚胎，B項錯誤。 14.（xx江蘇卷）17．老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β一淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降．某些基因的突變會導(dǎo)致β一淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)不能用于老年癡呆癥治療的是 A．胚胎移植技術(shù) B．胚胎干細(xì)胞技術(shù) c．單克隆抗體技術(shù) D．基因治療技術(shù) 【答案】A 【解析】本題考查了現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用。采用胚胎干細(xì)胞技術(shù)可以產(chǎn)生新的神經(jīng)元細(xì)胞，單克隆抗體技術(shù)定向改善免疫能力，基因治療技術(shù)可以從基因水平對老年癡呆進(jìn)行治療，而胚胎移植技術(shù)則不能治療老年癡呆，正確選項為A 【xx年高考試題】 1.（xx安徽卷）4．xx年諾貝爾化學(xué)獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是 A．追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過程 B．追蹤目的基因插入到染色體上的位置 C．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布 D．追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) 【答案】C 【解析】將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光，從而可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布。故C正確。 2.（xx浙江卷）3．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是 A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物 B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性 D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) 【答案】D 【解析】基因工程中目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性，只有經(jīng)過一定的物質(zhì)激活以后，才有生物活性。載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。所以D錯誤。 3.（xx廣東理基）45．錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲xx年諾貝爾獎。在某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光。由此可知 A．該生物的基因型是雜合的 B．該生物與水母有很近的親緣關(guān)系 C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá) D．改變綠色熒光蛋白基因的1個核苷酸對，就不能檢測到綠色熒光 【答案】C 【解析】某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光，說明綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達(dá)。 4.（xx重慶卷）2.下表有關(guān)基因表達(dá)的選項中，不可能的是 基因 表達(dá)的細(xì)胞 表達(dá)產(chǎn)物 A 細(xì)菌抗蟲蛋白基因 抗蟲棉葉肉細(xì)胞 細(xì)菌抗蟲蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮膚細(xì)胞 人酪氨酸酶 C 動物胰島素基因 大腸桿菌工程菌細(xì)胞 動物胰島素 D 兔血紅蛋白基因 兔成熟紅細(xì)胞 兔血紅蛋白 【答案】D 【解析】抗蟲棉葉肉細(xì)胞中存在細(xì)菌抗蟲蛋白基因，細(xì)菌抗蟲蛋白基因能夠表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲蛋白；正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶；大腸桿菌工程菌細(xì)胞存在動物胰島素基因，動物胰島素基因能夠表達(dá)產(chǎn)生動物胰島素；兔成熟紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，所以無兔血紅蛋白基因不能表達(dá)產(chǎn)生兔血紅蛋白。此題為容易題，識記理解類。 5.（xx上海理綜卷）20．科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)將人胰島素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內(nèi)獲得成功表達(dá)。圖示a處為胰島素基因與大腸桿菌質(zhì)粒DNA結(jié)合的位置，它們彼此能結(jié)合的依據(jù)是 A．基因自由組合定律 B．半保留復(fù)制原則 C．基因分離定律 D．堿基互補(bǔ)配對原則 【答案】D 【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識，重組質(zhì)粒依據(jù)的是粘性末端的堿基互補(bǔ)配對原則。 6.（xx天津卷）8．（30分）水稻種子中70％的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，同時，排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。 （1）磷元素除了形成植酸外，還可以出現(xiàn)在下列_____________分子或結(jié)構(gòu)中（多選）。 A.核糖 B.ATP C.核糖體 D.核膜 （2）種植蘆葦能有效抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與引起水華的藻類關(guān)系是_____________。 （3）植酸酶可降解植酸，在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的_____________ 利用率。 （4）酵母菌中植酸的活性較高。下圖是從不同類型酵母菌的發(fā)酵液中提取植酸酶的工藝流程。 據(jù)圖回答： ①植酸酶________________（Ⅰ/Ⅱ）屬于分泌蛋白。 ②若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在______________________。 ③提純的植酸酶需做活性條件測定。右圖為測定結(jié)果。 圖中的自變量可為____________________________(答一種)； 因變量可以通過測定______________________來表示。 （5）為從根本上解決水稻中的高植酸問題，可將植酸酶基因?qū)胨?，培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。 據(jù)圖回答： ①圖中基因組文庫____________（小于/等于/大于）cDNA文庫。 ②B過程需要的酶是______________；A、C過程中_____________（可以/不可以）使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。 ③目的基因Ⅰ和Ⅱ除從構(gòu)建的文庫中分離外，還可以分別利用圖中___________。和_____________為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該過程中所用酶的顯著特點(diǎn)是_________________________。 （6）已獲得的轉(zhuǎn)植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下圖為選育低植酸抗病水稻品種的過程。圖中兩對相對性形狀分別由兩對基因控制，并獨(dú)立遺傳。 采用上圖育種過程，需從_______________代開始篩選，經(jīng)篩選淘汰后，在選留的植株中低植酸抗病純合體所占的比例是______________。選留植株多代自交，經(jīng)篩選可獲得低植酸抗病性狀穩(wěn)定的品性。 【答案】 （1）BCD （2）競爭關(guān)系 （3）營養(yǎng)成分 （4）①I ②氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序不同 ③溫度（或PH） 單位時間內(nèi)植酸的降解量（或植酸降解產(chǎn)物的生成量） （5）①大于 ②逆轉(zhuǎn)錄酶 可以 ③DNA cDNA耐高溫 （6）F2 1/9 【解析】本題考查物質(zhì)的元素組成、生物的種間關(guān)系、蛋白質(zhì)、酶、基因工程、遺傳定律的相關(guān)知識，涉及的知識點(diǎn)較多，綜合性很強(qiáng)。（1）只有核糖中不含磷元素，ATP（磷酸基團(tuán)）、核糖體（含RNA）、核膜（含磷脂）中均含有磷元素。（2）蘆葦能抑制水華的發(fā)生，表明蘆葦與水華的藻類關(guān)系是競爭。（3）植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外，是多種動物的抗?fàn)I養(yǎng)因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物類飼料中添加植酸酶可提高飼料的營養(yǎng)成分的利用率。（4）分析圖可知，植酸酶Ⅱ需要經(jīng)過兩次離心，因此植酸酶Ⅰ屬于分泌蛋白。若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽鏈組成不同，其差異體現(xiàn)在氨基酸的種類、數(shù)量和排列順序的不同。從圖的可看出，自變量可為溫度或pH，因變量可以通過測定單位時間內(nèi)植酸的降解量或植酸降解量產(chǎn)物的生成量來表示。（5）分析獲取植酸酶基因的流程圖可知，圖中基因組文庫大于cDNA文庫。B過程需要的酶應(yīng)該是逆轉(zhuǎn)錄酶，因?yàn)锳、C過程都能獲得含目的基因基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有 ，作為標(biāo)記基因。 （3）香蕉組織細(xì)胞具有 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的 。 【答案】 （1）PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA 、質(zhì)粒 （2）抗卡那霉素基因 （3）全能性 脫分化、再分化 【解析】本題考查基因工程的有關(guān)知識。 （1）從圖可看出，只有PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶能保持抗病基因結(jié)構(gòu)的完整性，所以構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時，應(yīng)選用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ兩種酶，對抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。 （2）卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以此作為標(biāo)記基因。 （3）香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的脫分化和再分化。 8.（xx重慶卷）31.（16分）小鼠基因敲除技術(shù)獲得xx年諾貝爾獎，該技術(shù)采用基因工程、細(xì)胞工程、雜交等手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能，以研究基因在生物個體發(fā)育和病理過程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠，要敲除基因B，可先用體外合成的突變基因b取代正?；駼，使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞，最終培育成為基因敲除小鼠。 （1）基因敲除過程中外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用重組質(zhì)粒上的 檢測。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，則可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的 被激活，使小鼠細(xì)胞發(fā)生癌變。 （2）通過基因敲除，得到一只AABb小鼠。假設(shè)棕毛基因A、白毛基因a、褐齒基因B和黃齒基因b均位于常染色體上，現(xiàn)要得到白毛黃齒新類型小鼠，用來與AABb小鼠雜交的純合親本的基因型是 ，雜交子代的基因型是 。讓F1代中雙雜合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中帶有b基因個體的概率是 。不帶B基因個體的概率是 。 （3）在上述F1代中只考慮齒色這對性狀，假設(shè)這對性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則表現(xiàn)黃齒個體的性別是 ，這一代中具有這種性別的個體基因是 。 的基因型及比例為:1/4BB、2/4Bb、1/4bb，帶有b基因個體的概率是3/4，不帶B基因個體的概率是1/4。（只考慮B和b這一對基因的計算，用基因分離定律） 也可兩對同時計算用自由組合定律，AaBb自交得1/4AAX1/4BB、1/4AAX2/4Bb、1/4AAX１/4bb、2/4AaX1/4BB、2/4AaX2/4Bb、24AaX１/4bb、1/4aaX1/4BB、1/4aaX2/4Bb、1/4aaX１/4bb、可得帶有b基因個體的概率是12/16，不帶B基因個體的概率是4/16。 （3）假設(shè)齒色性狀的遺傳屬X染色體伴性遺傳，則親本都為褐齒，基因型為XBXb　和　XＢY，則F1代的基因型為XBXb、XＢXＢ、XBＹ、XbY，其中XbY為黃齒是雄性個體，雄性個體基因還有XBＹ?！　? 此題考查學(xué)生對兩大遺傳定律的理解與掌握情況及基因工程的有關(guān)知識?！　　? 9.（xx江蘇卷）34．（7分）蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是（2）圖中②表示 HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得 種重組質(zhì)粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得 種重組質(zhì)粒。 （3）目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的 。 （4）圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的T—DNA導(dǎo)人植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中 對T—DNA的降解。 （5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞 。 （6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的 基因頻率的增長速率。 【答案】 （1）4 （2）2 1 （3）復(fù)制 （4）DNA水解酶 （5）表面無相應(yīng)的特異性受體 （6）抗性 【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識。（1）由于上述兩種酶形成的末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶切割之后所形成的片段有AA、AB、BA、BB四種切法形成的四種片段。（A表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）（2）同時被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，即AB和BA，所以重組質(zhì)粒有兩種。Bst l與BamHⅠ酶切割的末端一樣，所以同時用這兩種限制酶切割只能形成一種目的基因，所以只能形成一種重組質(zhì)粒。（3）質(zhì)粒要進(jìn)行復(fù)制才能更多的表達(dá)出產(chǎn)物，所以重組之后要能復(fù)制。（4）酶具有專一性，對T—DNA的降解酶為DNA水解酶。（5）生物的細(xì)胞表面的受體具有特異性，人類腸上皮細(xì)胞沒有昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體。所以該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較?。?）自然選擇是普遍存在的，純種種植自然選擇會使害蟲抗性基因頻率快速增長。所以混合種植降低害蟲的抗性基因頻率的增長速率。 10.（xx上海卷）37.（9分）人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術(shù)可對此（4）如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是________（以P+表示正?；颍琍n表示異?；颍? 【答案】 （1）從細(xì)胞中分離 通過化學(xué)方法人工合成 （2）見下圖 基因堿基對的替換（基因突變） （3）3 460 220 （4） 【解析】本題主要考查基因工程相關(guān)知識。 （1）目的基因的獲取方法有直接分離和化學(xué)方法人工合成兩種； （2）仔細(xì)對比正常人與患者的基因序列可知是CG堿基對變?yōu)榱薚A堿基對，這種變化屬于傳是細(xì)胞質(zhì)遺傳，兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的，因?yàn)槭芫阎械募?xì)胞質(zhì)幾乎全部來自母本。故C錯誤。 12.（xx浙江卷）1．用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是 A．都需用培養(yǎng)箱 B．都須用液體培養(yǎng)基 C．都要在無菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 【答案】C 【解析】動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無菌條件下進(jìn)行，動物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確。 13.（xx山東卷）35.（8分）（生物一現(xiàn)代生物科技專題） 人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： ② ① 提取 病毒 RNA DNA A基因 A基因 表達(dá)載體 受體 細(xì)胞 A蛋白 小鼠皮下 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 效應(yīng)B淋巴細(xì)胞 X 抗A蛋白的單克隆抗體 ③ 請回答： （1）過程①代表的是 。 （2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用 和 兩種工具酶。 （3）過程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是 ，獲得的X是 。 （4）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時， 可選用圖中基因工程生產(chǎn)的 所制備的疫苗。 對該傳染病疑似患者確診時，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行 比較；或用圖中的 進(jìn)行特異性結(jié)合檢測。 【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄 （2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶、限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶（兩空可以互換） （3）細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 （4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的單克隆抗體 【解析】 本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過程，考察了中心法則、基因工程、動物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。 （1）中心法則中，對于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過程需要補(bǔ)充的過程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過程，圖中過程①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過程 （2）基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達(dá)載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測和表達(dá)，其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過 DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。 （3）過程③是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。 （4）本題考察了免疫預(yù)防的操作過程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進(jìn)一步進(jìn)行檢測是否為目的RNA病毒。 14.（xx四川卷）30.（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ兩個小題。 Ⅰ.將小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成一種特定的細(xì)胞（命名為M細(xì)胞），再將M細(xì)胞移植到糖尿病模型小鼠（胰島細(xì)胞被特定藥物破壞的小鼠）體內(nèi)，然后小鼠的血糖濃度，結(jié)果如圖所示（虛線表示正常小鼠的血糖濃度值）。請回答相關(guān)問題： （1）實(shí)驗(yàn)用的胚胎干細(xì)胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用 酶將其分散成單個細(xì)胞。 （2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以判定M細(xì)胞已具有 細(xì)胞的功能。說明判定的理由 。 （3）用胰島素基因片段做探針，對小鼠胚胎干細(xì)胞和M細(xì)胞進(jìn)行檢測。請在下表的空格中填上檢