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觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂 一 實驗原理 1 植物根尖 莖尖等分生區(qū)細胞能進行有絲分裂 2 在有絲分裂過程中 染色體發(fā)生規(guī)律性動態(tài)變化 3 染色體可被堿性染料著色 便于觀察 4 根據(jù)顯微鏡下觀察到的染色體特點可識別有絲分裂不同時期 觀察根尖的縱切面 分生區(qū) 根冠 伸長區(qū) 成熟區(qū) 分生組織 保護組織 根據(jù)細胞的形態(tài)特點分為幾部分 二 材料用具 1 洋蔥 蔥 蒜 2 顯微鏡 載玻片 蓋玻片 剪刀 鑷子 滴管 玻璃皿3 15 鹽酸 95 酒精混和 1 1 作為解離液 0 01g ml或0 02g ml龍膽紫染液4 洋蔥根尖細胞有絲分裂固定裝片 三 方法步驟 一 洋蔥根尖的培養(yǎng)實驗課前的3 4d 取洋蔥一個 放在廣口瓶或燒杯上 瓶內(nèi)裝滿清水 放置在光照處 注意每天換水1 2次 使洋蔥的底部總是接觸到水 待根長到5cm時 取生長健壯的根尖制片臨時裝片觀察 解離 取根尖2 3mm 最好在每天的10 14點取根 因此時間是洋蔥根尖有絲分裂高峰期 立即放入盛有質(zhì)量分數(shù)為15 的氯化氫溶液和體積分數(shù)為95 的酒精溶液的混合液 1 1 的玻璃皿中 在室溫下解離3 5min何為解離 目的 是使得細胞相互分離開來 二 裝片的制作 另外解離時間不宜過短 否則根尖未充分解離 壓片時細胞分不開 細胞重疊 但又不能太長 否則使根尖過分酥軟 無法進行漂洗和染色 且染色體成分被破壞 這一步是實驗成功與否的關(guān)鍵 也可手拿鑷子 輕輕按正在解離的根尖 感覺酥軟即可 漂洗用鑷子去除根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分鐘 思考 目的 需要注意 動作輕 不要把根尖弄碎 漂洗的目的是去除根中多余的解離液 特別是鹽酸 因為染色時用的是堿性染料龍膽紫 酸與堿發(fā)生反應會影響染色效果 染色再次輕輕取出漂洗干凈的根尖放入滴有一滴龍膽紫的在載玻片上 染色3 5min染完之后用吸水紙將多余的染液除去 再加一滴請水 過長過短都不好 為什么 深 淺 目的是使染色體著色 染色時間過長過短都不好 為什么 染色時間亦不能過長 否則會使染色體與周圍的其他結(jié)構(gòu)均被著色 這樣就無法形成顏色上的反差 不便于觀察 染色時間亦不能過短 否則會使染色體不能很好著色 實驗步驟 制片 注意 蓋蓋玻片時要從一側(cè)接觸 慢慢放下 注意不要產(chǎn)生氣泡 壓片時不要太用力 只要細胞散開既可 觀察 顯微鏡的使用低倍鏡觀察慢慢移動裝片找到分生區(qū)細胞特征 較小 呈正方形 排列緊密 有的正在分裂換高倍鏡觀察用細準焦螺旋和反光鏡調(diào)節(jié)視野清晰找到有絲分裂前 中 后 末期的細胞 并用鉛筆繪圖 特點 分裂間期 DNA復制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成 分裂期 前期中期后期末期注意 染色體的行為變化 根冠 分生區(qū) 伸長區(qū) 觀察 注意 在一個視野中處于分裂期的細胞是少數(shù)的 絕大多數(shù)的細胞處于 期 為什么 一個視野中很難找全各個時期的細胞 可以慢慢移動裝片 從臨近的視野中找 根尖培養(yǎng) 解離 剪取根尖的長度2 3mm立即放入盛有適量解離液的玻璃皿中室溫解離3 5分鐘最佳 酥軟 不能太硬也不能太軟 用鑷子輕輕取出根尖 漂洗 用鑷子取出根尖后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分鐘需要注意 動作輕 不要把根尖弄碎 染色 再次輕輕取出漂洗干凈的根尖放入滴有一滴龍膽紫的載波片中 染色3 5min需要注意 夾取根尖時一定要注意不要夾根尖頭部 可以夾取根尖的后部 染色的時間控制 制片 蓋蓋玻片時要從一側(cè)接觸 慢慢放下 注意不要產(chǎn)生氣泡 壓片時不要太用力 只要細胞散開既可 利用漂洗的時間觀察固定裝片 三 方法步驟 1 培養(yǎng)根尖 2 裝片制作 1 解離 2 漂洗 3 染色 4 制片 3 觀察 1 低倍鏡觀察 2 高倍鏡觀察 練習 1 細胞周期中 要辨認染色體形態(tài)和數(shù)目 應選擇 A 間期B 前期C 中期D 后期 C 2 同學觀察洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片時發(fā)現(xiàn)被觀察的材料邊緣為淺藍色 中間為白色 下列有關(guān)對這一現(xiàn)象的分析 正確的是 A 染色時間過長B 染色時間過短C 解離不充分D 漂洗不徹底 B 3 在觀察有絲分裂的實驗中 一般用根尖而不能用洋蔥鱗片葉表皮的原因是 A 洋蔥表皮細胞因有紫色液泡而使分裂看不清B 洋蔥表皮細胞太小C 洋蔥表皮細胞一般不發(fā)生分裂D 根尖細胞較大且呈正方形 C 4 某同學在觀察植物細胞有絲分裂裝片時 在根尖分生區(qū)只看到各個分裂時期的靜態(tài)的細胞 而看不到細胞內(nèi)染色體動態(tài)變化 原因是A 壓片用力過大使細胞死亡B 細胞分裂速度緩慢 肉眼很難看出其變化過程C 細胞已被殺死 本來就不可能看到動態(tài)變化D 所觀察的細胞不適合 應選擇分裂后期的細胞進行定點觀察 C 5 在下列實驗中 必須始終用活細胞做材料的實驗是 A 在光學顯微鏡下觀察植物細胞分裂的過程B 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原C 葉綠體色素的提取和分離D 觀察人體口腔上皮細胞的實驗 用碘染色 B