現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)代生物科技專題專題九專題九第第1講基因工程和細(xì)胞工程講基因工程和細(xì)胞工程專題九專題九考綱解讀考綱解讀考點(diǎn)預(yù)測(cè)考點(diǎn)預(yù)測(cè)1.基因工程的誕生基因工程的誕生1.基因工程操作工具的作用基因工程操作工具的作用及特點(diǎn)及特點(diǎn)2基因工程的操作流程分基因工程的操作流程分析析3植物組織培養(yǎng)的原理、植物組織培養(yǎng)的原理、過(guò)程及應(yīng)用過(guò)程及應(yīng)用4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過(guò)程及應(yīng)用過(guò)程及應(yīng)用5單克隆抗體制備的過(guò)程單克隆抗體制備的過(guò)程2.基因工程的原理、技術(shù)基因工程的原理、技術(shù)及應(yīng)用及應(yīng)用3.蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程4.植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆克隆6.細(xì)胞融合與單克隆抗體細(xì)胞融合與單克隆抗體 復(fù)習(xí)指導(dǎo)：(1)用比較、歸納法來(lái)掌握基因工程操作工具的種類、作用以及基因工程操作流程中各步驟的原理、方法。(2)以流程圖的形式復(fù)習(xí)植物組織培養(yǎng)、體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的原理和操作步驟。高頻熱點(diǎn)精析高頻熱點(diǎn)精析2真題模擬強(qiáng)化真題模擬強(qiáng)化3課后強(qiáng)化作業(yè)課后強(qiáng)化作業(yè)4體系整合拓展體系整合拓展1體系整合拓展體系整合拓展 答案：限制酶載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測(cè)和鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因治療基因可產(chǎn)生自然界沒有的蛋白質(zhì)細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性植物體細(xì)胞雜交培育作物新品種細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性獲得克隆動(dòng)物個(gè)體細(xì)胞膜流動(dòng)性給小鼠注射抗原產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞 1轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)涉及到哪些生物工程？ _ _ 2基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？ _ _ 3轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育涉及到哪些生物工程？ _ _ 答案：1.基因工程、植物組織培養(yǎng)。 2基因工程的工具酶是限制酶和DNA連接酶，克隆技術(shù)的工具酶是纖維素酶、果膠酶、胰蛋白酶。 3基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程、胚胎移植。 1(2014常州)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是() A消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害 B在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞 C出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控 D生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑 答案B 解析消毒劑的使用既可殺死材料表面的微生物，又要防止其傷害組織細(xì)胞，影響組織培養(yǎng)；植物細(xì)胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的誘導(dǎo)融合，帶有細(xì)胞壁的愈傷組織細(xì)胞不能誘導(dǎo)融合形成染色體加倍的細(xì)胞；出芽和生根都是細(xì)胞再分化的結(jié)果，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；萘乙酸為生長(zhǎng)素類似物，可誘導(dǎo)愈傷組織生根。 2普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細(xì)胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏?？茖W(xué)家們通過(guò)基因工程技術(shù)，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長(zhǎng)的番茄新品種，操作流程如下圖。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)在番茄新品種的培育過(guò)程中，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞采用最多的方法是_，篩選出含重組DNA的土壤農(nóng)桿菌時(shí)通常依據(jù)質(zhì)粒上的_的表達(dá)。 (2)為促使圖中、過(guò)程的順利完成，需要在_條件下進(jìn)行。要快速繁殖轉(zhuǎn)基因抗軟化番茄植株，目前常用的科技方法是_。為獲得這種番茄的脫毒苗，應(yīng)用其_進(jìn)行培養(yǎng)。 (3)除了圖示培育方法外，還可通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)，對(duì)_的結(jié)構(gòu)進(jìn)行特定的改變，從而獲得抗軟化的番茄品種，關(guān)鍵的操作是對(duì)_進(jìn)行定向改造。 (4)為防止轉(zhuǎn)基因番茄通過(guò)花粉將抗多聚半乳糖醛酸酶基因傳播給其他植物而造成基因污染，可將抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕阎参锛?xì)胞的_(結(jié)構(gòu))中。 答案(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法標(biāo)記基因 (2)無(wú)菌和人工控制植物組織培養(yǎng)(微型繁殖)莖尖 (3)多聚半乳糖醛酸酶多聚半乳糖醛酸酶基因 (4)線粒體或葉綠體 解析(1)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，因此篩選出含重組DNA的土壤農(nóng)桿菌時(shí)通常依據(jù)質(zhì)粒上標(biāo)記基因的表達(dá)。(2)和過(guò)程是植物組織培養(yǎng)，該過(guò)程只有在無(wú)菌和人工控制條件下才能順利完成。運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖優(yōu)良品種，該技術(shù)又稱植物的微型繁殖技術(shù)。植物分生區(qū)附近如莖尖的病毒極少，可以切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，從而獲得脫毒苗。(3)人們要獲得抗軟化的番茄品種，就必須對(duì)多聚半乳糖醛酸酶基因進(jìn)行定向改造，從而達(dá)到對(duì)多聚半乳糖醛酸酶的結(jié)構(gòu)進(jìn)行特定的改變。(4)細(xì)胞質(zhì)基因遺傳表現(xiàn)為母系遺傳，因此將抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕阎参锛?xì)胞的線粒體或葉綠體中可防止轉(zhuǎn)基因番茄通過(guò)花粉將抗多聚半乳糖醛酸酶基因傳播給其他植物而造成基因污染。高頻熱點(diǎn)精析高頻熱點(diǎn)精析 1基因工程的基本工具和基本方法的比較基因工程及蛋白質(zhì)工程基因工程及蛋白質(zhì)工程基本基本工具工具的比較的比較限制酶限制酶識(shí)別目的基因和載體上特定的識(shí)別目的基因和載體上特定的核苷酸序列，在特定位點(diǎn)上切核苷酸序列，在特定位點(diǎn)上切割割DNA連接酶連接酶 拼接拼接DNA片段，形成重組片段，形成重組DNA載體載體攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞；攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞；能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制，并有一個(gè)至多個(gè)限制量復(fù)制，并有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，具有特殊的標(biāo)記酶切割位點(diǎn)，具有特殊的標(biāo)記基因基因目的基目的基因?qū)胍驅(qū)胧荏w細(xì)受體細(xì)胞方法胞方法的比較的比較農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因整合到植物體細(xì)將目的基因整合到植物體細(xì)胞的染色體胞的染色體DNA上上顯微注射法顯微注射法將目的基因注入動(dòng)物受精卵將目的基因注入動(dòng)物受精卵中中Ca2處理法處理法使處于感受態(tài)的原核生物細(xì)使處于感受態(tài)的原核生物細(xì)胞吸收基因表達(dá)載體胞吸收基因表達(dá)載體目的基目的基因的檢因的檢測(cè)與鑒測(cè)與鑒定方法定方法的比較的比較DNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)(DNA和和DNA之間之間)檢測(cè)目的基因是否插入受體檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞染色體的細(xì)胞染色體的DNA上上核酸分子雜交技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)(DNA和和mRNA之間之間)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA抗原抗原抗體雜交技術(shù)抗體雜交技術(shù)(蛋白質(zhì)分子雜交蛋白質(zhì)分子雜交)檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)白質(zhì)抗蟲或抗病的接種抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)等個(gè)體水平鑒定個(gè)體水平鑒定 2.蛋白質(zhì)工程 (1)蛋白質(zhì)工程流程圖 (2)蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別原理原理中心法則的逆推中心法則的逆推基因重組基因重組過(guò)程過(guò)程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序應(yīng)有的氨基酸序列列找到相對(duì)應(yīng)找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序的脫氧核苷酸序列列合成合成DNA表達(dá)出蛋白質(zhì)表達(dá)出蛋白質(zhì)獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體將目將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與目的基因的檢測(cè)與鑒定鑒定項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別實(shí)質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)所需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品物類型或生物產(chǎn)品(基因基因的異體表達(dá)的異體表達(dá))結(jié)果結(jié)果生產(chǎn)自然界沒有的蛋生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)白質(zhì)生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代基因工程，因?yàn)槭菍?duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)的改造或制造基因工程，因?yàn)槭菍?duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，所以必須通過(guò)基因修飾或基因合成新的蛋白質(zhì)，所以必須通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)實(shí)現(xiàn)下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamH、Hind、Sma直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。 據(jù)圖回答： (1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用_限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_的培養(yǎng)基上進(jìn)行。 (2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_(填字母代號(hào))。 A啟動(dòng)子BtetR C復(fù)制原點(diǎn) DampR (3)過(guò)程可采用的操作方法是_(填字母代號(hào))技術(shù)。 A農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C顯微注射 D細(xì)胞融合 (4)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用_(填字母代號(hào))技術(shù)。 A核酸分子雜交 B基因序列分析 C抗原抗體雜交 DPCR 解析構(gòu)建目的基因表達(dá)載體必須使目的基因和載體被限制性核酸內(nèi)切酶同時(shí)酶切后露出相同的黏性末端。從圖中可以看出，載體無(wú)Sma酶的切割位點(diǎn)，若要將人乳鐵蛋白基因插入載體，就只能選擇Hind和BamH；要選出含有目的基因的大腸桿菌可以通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記基因是否表達(dá)來(lái)確定，四環(huán)素抗性基因中插入了目的基因而失活，故標(biāo)記基因是氨芐青霉素抗性基因；啟動(dòng)子位于基因首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，具有調(diào)控轉(zhuǎn)錄的功能；要使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)就必須在重組載體中插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子；檢測(cè)蛋白質(zhì)一般使用抗原抗體雜交技術(shù)。 答案(1)Hind和BamH氨芐青霉素 (2)A(3)C(4)C 質(zhì)粒是常用的基因工程載體。如圖是某種天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖(標(biāo)示了部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn))，據(jù)圖分析下列說(shuō)法正確的是() A圖中的終止子是由三個(gè)相鄰堿基組成的終止密碼 B用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將該質(zhì)粒構(gòu)建的表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞 C用限制酶和DNA連接酶改造后的質(zhì)粒無(wú)法被限制酶切割 D用限制酶處理能防止該質(zhì)粒構(gòu)建的表達(dá)載體引起植物瘋長(zhǎng) 答案D 解析密碼子是mRNA上三個(gè)相鄰的堿基，不會(huì)出現(xiàn)在DNA上；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將重組載體導(dǎo)入植物細(xì)胞；用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建的表達(dá)載體中仍存在限制酶的識(shí)別位點(diǎn)；用限制酶切割后，編碼控制細(xì)胞分裂素合成的物質(zhì)就不能合成了。 1植物組織(細(xì)胞)培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞工程細(xì)胞工程項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材取材植物幼嫩部位植物幼嫩部位(芽芽尖、根尖等尖、根尖等)動(dòng)物胚胎或出生不久動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或的幼齡動(dòng)物的器官或組織組織項(xiàng)目項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果結(jié)果獲得植株個(gè)體，可以體獲得植株個(gè)體，可以體現(xiàn)全能性現(xiàn)全能性新的細(xì)胞，不形成個(gè)體，新的細(xì)胞，不形成個(gè)體，不體現(xiàn)全能性不體現(xiàn)全能性目的目的植株快速繁殖；植株快速繁殖；脫脫毒植株的培養(yǎng)；毒植株的培養(yǎng)；人工人工種子；種子；生產(chǎn)藥物、殺生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等；蟲劑等；轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因植物的培育的培育蛋白質(zhì)生物制品的生蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)；產(chǎn)；皮膚移植材料的培皮膚移植材料的培育；育；檢測(cè)有毒物質(zhì)；檢測(cè)有毒物質(zhì)；生理、病理、藥理學(xué)的研生理、病理、藥理學(xué)的研究究相同相同點(diǎn)點(diǎn)兩技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無(wú)兩技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無(wú)性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；均均為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件等條件 2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體制備單克隆抗體制備)理論基理論基礎(chǔ)礎(chǔ)(原原理理)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性融合前融合前處理處理先用纖維素酶和果膠酶除去先用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁細(xì)胞壁先用胰蛋白酶使細(xì)胞分散開先用胰蛋白酶使細(xì)胞分散開促融方促融方法法電激、振動(dòng)、離心、聚乙二電激、振動(dòng)、離心、聚乙二醇醇電激、聚乙二醇、滅活的病毒電激、聚乙二醇、滅活的病毒等等植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗單克隆抗體制備體制備)結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞應(yīng)用應(yīng)用培育植物新品種培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體主要用于制備單克隆抗體意義意義突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴(kuò)展了雜交的親本組合擴(kuò)展了雜交的親本組合 3.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過(guò)程(流程圖)現(xiàn)有甲、乙兩種植物(均為二倍體純種)，其中甲種植物的光合作用能力高于乙種植物，但乙種植物很適宜在鹽堿地種植。且相關(guān)性狀均為核基因控制。要利用甲、乙兩種植物的優(yōu)勢(shì)，培育出高產(chǎn)、耐鹽的植株，有多種生物技術(shù)手段可以利用。下列所采用的技術(shù)手段中，不可行的是() A利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可獲得滿足要求的四倍體雜種目的植株 B將乙種植物耐鹽基因?qū)氲郊追N植物的受精卵中，可培育出目的植株 C兩種植物雜交后，得到的F1再利用單倍體育種技術(shù)，可較快獲得純種的目的植株 D誘導(dǎo)兩種植物的花粉融合，并培育成幼苗，幼苗用秋水仙素處理，可培育出目的植株 解析兩種植物存在著生殖隔離，無(wú)法雜交，即使能夠雜交，所得F1也不能產(chǎn)生正?？捎呐渥?，因而不能用于單倍體育種。 答案C 科學(xué)家用植物體細(xì)胞雜交方法，將番茄的原生質(zhì)體和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合，成功地培育出了“番茄馬鈴薯”雜種植株(如圖所示)，其中表示過(guò)程，英文字母表示細(xì)胞、組織或植株。據(jù)圖回答下列問題： (1)在實(shí)現(xiàn)過(guò)程的技術(shù)之前使用_酶處理細(xì)胞以去除細(xì)胞壁。 (2)在將雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過(guò)程中，依據(jù)的原理是_，其中過(guò)程相當(dāng)于_過(guò)程，過(guò)程涉及的分裂方式為_。 (3)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含_條染色體；若雜種細(xì)胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于_倍體植株。 (4)若將該方案用在單克隆抗體制備過(guò)程中，請(qǐng)用箭頭把下列各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)： 解析(1)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)雜種細(xì)胞培育成為雜種植株依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性，雜種細(xì)胞的組織培養(yǎng)過(guò)程要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中只涉及有絲分裂。(3)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則產(chǎn)生的“番茄馬鈴薯”細(xì)胞所含的染色體為mn條，屬于異源四倍體。該雜種植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)得到的植株無(wú)論含幾個(gè)染色體組，均為單倍體。(4)制備單克隆抗體的過(guò)程包括“正常小鼠免疫處理融合篩選提純”四步。真題模擬強(qiáng)化真題模擬強(qiáng)化 1(2014天津，4)為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過(guò)分子檢測(cè)的是() A攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選 B產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選 C轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定 D21三體綜合征的診斷 答案B 解析本題考查基因工程、細(xì)胞工程與變異的有關(guān)實(shí)驗(yàn)篩選診斷問題。攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選可利用含鏈霉素選擇性培養(yǎng)基篩選；必需利用抗原抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素的雜交瘤細(xì)胞；轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定可采用個(gè)體生物學(xué)水平的飼喂法進(jìn)行檢測(cè)；利用顯微鏡檢測(cè)21三體綜合征。 2(多選)(2014江蘇，23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是() A切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列 BPCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng) C載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因 D抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá) 答案ABC 解析本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。不同的限制性核酸內(nèi)切酶特異性地識(shí)別核苷酸序列不同，A錯(cuò)誤；酶具有專一性，PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了不同的酶將DNA解旋、擴(kuò)增，B錯(cuò)誤；載體質(zhì)粒通常采用抗生素抗性基因作為篩選標(biāo)記基因，C錯(cuò)誤；基因成功插入也未必會(huì)表達(dá)，D正確。解答此類題目一定要準(zhǔn)確把握基因工程的步驟、基因工程的工具。 3(2014湖北質(zhì)檢)在25的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是() A光合色素的提取與分離 B用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖 C大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng) D制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基 答案A 解析本題考查實(shí)驗(yàn)的理解和評(píng)價(jià)能力。光合色素的提取分離對(duì)溫度沒有特別的要求，在室溫下能順利完成；用斐林試劑鑒定還原糖，需要5065的溫水加熱；體外培養(yǎng)組織細(xì)胞的溫度一般與相應(yīng)動(dòng)物的體溫相近，對(duì)于大鼠來(lái)說(shuō)應(yīng)該在37左右；固體培養(yǎng)基需要加瓊脂，瓊脂的溶解溫度9597。解答本題易出現(xiàn)的一個(gè)問題就是不能準(zhǔn)確記憶各實(shí)驗(yàn)的真正溫度，但可借助選項(xiàng)分析獲取有用信息，如大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)溫度與其體溫相同。