高考生物一輪復習 第33講 克隆技術(shù)課件
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1、第第33講克隆講克隆技術(shù)技術(shù)考點克隆技術(shù)考點克隆技術(shù)一、植物的克隆一、植物的克隆1.植物克隆植物克隆(1)技術(shù)基礎(chǔ):技術(shù)基礎(chǔ):(2)理論基礎(chǔ):植物細胞的理論基礎(chǔ):植物細胞的原因:植物體的每個生原因:植物體的每個生活細胞都具有活細胞都具有。(3)植物細胞的全能性的實現(xiàn)條件:離體;適當?shù)闹参锛毎娜苄缘膶崿F(xiàn)條件:離體;適當?shù)?包括水、無機鹽、包括水、無機鹽、氨基酸等、氨基酸等);適宜條件適宜條件(、溫度、溫度、光照等、光照等)以及以及物質(zhì)。物質(zhì)。(4)植物激素的作用:誘導植物激素的作用:誘導的形成和生長;誘導的形成和生長;誘導和控制和控制過程。過程。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)全能性全能性完整的全套
2、遺傳物質(zhì)完整的全套遺傳物質(zhì)營養(yǎng)營養(yǎng)維生素維生素蔗糖蔗糖無菌無菌濕度濕度生長調(diào)節(jié)生長調(diào)節(jié)愈傷組織愈傷組織再分化再分化2.植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)(1)程序:程序:培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制小組織塊的切取小組織塊的切取的獲得的獲得新植株的再生。新植株的再生。(2)填寫基本操作過程圖:填寫基本操作過程圖:圖中圖中,A表示表示,B表示表示或或。半固體半固體愈傷組織愈傷組織脫分化脫分化再分化再分化愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體叢狀苗叢狀苗3.植物細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)植物細胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)(1)植物細胞培養(yǎng)程序:愈傷組織植物細胞培養(yǎng)程序:愈傷組織用用進行進行培養(yǎng)培養(yǎng)單個胚性細胞單個胚性細胞在適宜培養(yǎng)基中培在適宜
3、培養(yǎng)基中培養(yǎng)養(yǎng)細胞團細胞團胚胚胚胚完整完整植株。植株。(2)器官發(fā)生和形態(tài)建成的實現(xiàn):通過平衡的器官發(fā)生和形態(tài)建成的實現(xiàn):通過平衡的進行調(diào)控。如適量的進行調(diào)控。如適量的和和配比,配比,可誘導芽的分化;適量的可誘導芽的分化;適量的及適當減除其他某些及適當減除其他某些激素,可誘導生根。激素,可誘導生根。搖床搖床液體懸浮液體懸浮球形球形心形心形胚狀體胚狀體植物激素配比植物激素配比生長素生長素細胞分裂素細胞分裂素吲哚乙酸吲哚乙酸4.原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細胞工程原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細胞工程(1)原生質(zhì)體的獲得方法:在原生質(zhì)體的獲得方法:在0.50.6 mol/L的的溶液環(huán)溶液環(huán)境境(較高滲透壓較高滲透壓)下
4、,用下,用和和混合液混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細胞,除去處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細胞,除去,獲得獲得的原生質(zhì)體。的原生質(zhì)體。(2)植物細胞工程的操作過程植物細胞工程的操作過程甘露醇甘露醇纖維素酶纖維素酶果膠酶果膠酶細胞壁細胞壁球形球形基因工程基因工程轉(zhuǎn)基因細胞轉(zhuǎn)基因細胞5.植物克隆技術(shù)的應用植物克隆技術(shù)的應用(1)實現(xiàn)工廠化的植物快速繁殖實現(xiàn)工廠化的植物快速繁殖(2)生產(chǎn)生產(chǎn),恢復品種的性狀,恢復品種的性狀(3)生產(chǎn)重要的生產(chǎn)重要的,如藥物、色素、香料、殺,如藥物、色素、香料、殺蟲劑等蟲劑等(4)(植物細胞工程植物細胞工程):轉(zhuǎn)基因作物,突變體選:轉(zhuǎn)基因作物,突變體選擇
5、,單倍體育種擇,單倍體育種脫毒苗脫毒苗次生代謝產(chǎn)物次生代謝產(chǎn)物育種育種二、動物的克隆二、動物的克隆1.動物細胞、組織培養(yǎng)動物細胞、組織培養(yǎng)(1)動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是。動物的細胞和組織培養(yǎng)動物的細胞和組織培養(yǎng)(2)動物動物(成纖維成纖維)細胞培養(yǎng)的過程:細胞培養(yǎng)的過程:胰酶消化胰酶消化原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳化培養(yǎng)傳化培養(yǎng)分瓶分瓶細胞系細胞系有限細胞系有限細胞系連續(xù)細胞系連續(xù)細胞系細胞株細胞株有限細胞株有限細胞株連續(xù)細胞株連續(xù)細胞株(3)動物細胞培養(yǎng)必需傳代的原因:細胞培養(yǎng)到一定時期,細胞動物細胞培養(yǎng)必需傳代的原因:細胞培養(yǎng)到一定時期,細胞會因為密度過大造成會因為密度過大造成,或者
6、因為代謝消耗,或者因為代謝消耗引起引起,不能正常生長。,不能正常生長。(4)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的含義原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的含義原代培養(yǎng):從原代培養(yǎng):從取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)的過程。的過程。傳代培養(yǎng):將傳代培養(yǎng):將分成若干份,接種到若干份分成若干份,接種到若干份培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長、增殖。培養(yǎng)基中,使其繼續(xù)生長、增殖。接觸抑制接觸抑制營養(yǎng)枯竭營養(yǎng)枯竭機體機體原代培養(yǎng)細胞原代培養(yǎng)細胞2.細胞系和細胞株細胞系和細胞株(1)細胞系:是指可連續(xù)傳代的細胞,可分為細胞系:是指可連續(xù)傳代的細胞,可分為細胞系細胞系(惡性細胞系:具有異體致瘤性;惡性細胞系:具有異體致瘤性;
7、“良性良性”細胞系:保留接觸細胞系:保留接觸抑制現(xiàn)象,不致癌抑制現(xiàn)象,不致癌)和和細胞系。細胞系。(2)細胞株:通過一定的選擇或純化方法細胞株:通過一定的選擇或純化方法,從從中獲得的具有中獲得的具有的細胞。可分為的細胞。可分為細胞株細胞株和和細胞株。細胞株。連續(xù)連續(xù)有限有限原代培養(yǎng)物或細胞系原代培養(yǎng)物或細胞系特殊性質(zhì)特殊性質(zhì)連續(xù)連續(xù)有限有限3.克隆培養(yǎng)法克隆培養(yǎng)法(1)概念:把概念:把單細胞從群體中分離出來單獨培養(yǎng),使之單細胞從群體中分離出來單獨培養(yǎng),使之繁衍成一個新的繁衍成一個新的的技術(shù)。單抗的技術(shù)。單抗等都是應用克隆培養(yǎng)法建立的。等都是應用克隆培養(yǎng)法建立的。(2)基本要求:必須肯定所建成的
8、克隆來源于基本要求:必須肯定所建成的克隆來源于。(3)提高細胞克隆形成率的措施有:提高細胞克隆形成率的措施有:選擇適宜的培養(yǎng)基;選擇適宜的培養(yǎng)基;添添加加;以以支持生長;支持生長;刺激;刺激;使用使用;調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)。CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱一個一個細胞群體細胞群體細胞株細胞株單個細胞單個細胞血清血清滋養(yǎng)細胞滋養(yǎng)細胞激素激素pH4.動物的克隆繁殖動物的克隆繁殖(1)動物難以克隆的根本動物難以克隆的根本原因原因是是體細胞體細胞中基因中基因,細胞質(zhì)中存在細胞質(zhì)中存在。(2)細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖細胞核移植實驗和動物的克隆繁殖選擇性表達選擇性表達調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)因子營養(yǎng)限制性營養(yǎng)限制性融合融合八細胞八細胞胚
9、胎胚胎 移植移植同期發(fā)情同期發(fā)情(3)動物體細胞核成功克隆的原因:去除了動物體細胞核成功克隆的原因:去除了的限制。的限制?!岸嗬蚨嗬颉闭Q生說明:動物誕生說明:動物仍能表現(xiàn)全能仍能表現(xiàn)全能性;胚胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有性;胚胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有作用作用核基因表達核基因表達體細胞核體細胞核調(diào)控調(diào)控5.單克隆抗體單克隆抗體(1)制備過程:制備過程:(2)單克隆抗體的特點:單克隆抗體的特點:、??乖乖撬枇龉撬枇黾毎毎麊慰寺慰寺】贵w抗體產(chǎn)生特定抗體產(chǎn)生特定抗體雜交瘤雜交瘤細胞細胞特異性強特異性強靈敏度靈敏度高高1.(201510月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)科研人員擬將已知的花色基因科研
10、人員擬將已知的花色基因(目目的基因的基因)轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中,培育新花色的矮牽牛。請轉(zhuǎn)入矮牽牛的核基因組中,培育新花色的矮牽牛。請回答:回答:將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片,在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶將消毒后的矮牽牛葉片剪成小片,在含有目的基因的農(nóng)桿菌溶液中浸泡后,取出并轉(zhuǎn)移至加有適當配比生長調(diào)節(jié)劑的液中浸泡后,取出并轉(zhuǎn)移至加有適當配比生長調(diào)節(jié)劑的MS培培養(yǎng)基養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素,下同含蔗糖、瓊脂和抗生素,下同)上,使小葉先脫分化形成上,使小葉先脫分化形成_。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導形成芽,芽切割后轉(zhuǎn)。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導形成芽,芽切割后轉(zhuǎn)移至移至_(A.LB培養(yǎng)基培養(yǎng)基B.MS
11、培養(yǎng)基適宜濃度培養(yǎng)基適宜濃度NAAC.MS培養(yǎng)基適宜濃度培養(yǎng)基適宜濃度BAD.NAA/BA小于小于1的的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基)上上生根,形成完整植株。生根,形成完整植株。解析解析組培時,先將處理后的外植體接種在適當?shù)呐囵B(yǎng)基上,組培時,先將處理后的外植體接種在適當?shù)呐囵B(yǎng)基上,先經(jīng)脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導生芽先經(jīng)脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導生芽形成的叢狀苗,叢狀苗經(jīng)分離后轉(zhuǎn)移至添加適宜濃度形成的叢狀苗,叢狀苗經(jīng)分離后轉(zhuǎn)移至添加適宜濃度NAA的的MS培養(yǎng)基上生根,形成完整植株。注意生根培養(yǎng)基中生長素培養(yǎng)基上生根,形成完整植株。注意生根培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)濃度需大于
12、細胞分裂素類。類物質(zhì)濃度需大于細胞分裂素類。答案答案愈傷組織愈傷組織B2.(20164月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)兔肝細胞中的基因兔肝細胞中的基因E編碼代謝甲醛的編碼代謝甲醛的酶,擬利用基因工程技術(shù)將基因酶,擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中,以提高矮牽轉(zhuǎn)入矮牽牛中,以提高矮牽牛對甲醛的代謝能力,請回答:牛對甲醛的代謝能力,請回答:(1)將被侵染的葉片除菌后進行培養(yǎng),最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。將被侵染的葉片除菌后進行培養(yǎng),最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是其中培養(yǎng)過程正確的是_(A.葉片在含合適濃度生長素的葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織B.愈
13、傷組織在含細胞分裂素和生愈傷組織在含細胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽C.再生的芽在細胞分裂素含再生的芽在細胞分裂素含量高的培養(yǎng)基上生根量高的培養(yǎng)基上生根D.愈傷組織在含合適濃度植物生長調(diào)節(jié)愈傷組織在含合適濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株)。(2)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片,放入含取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片,放入含MS液體培養(yǎng)基和適量濃度甲液體培養(yǎng)基和適量濃度甲醛且密封的試管中,將試管置于醛且密封的試管中,將試管置于_上,進行液體懸浮培上,進行液體懸浮培養(yǎng)。一段時間后測定培養(yǎng)基中甲醛的含量,以判斷基因養(yǎng)。一段時間后測定培養(yǎng)基中甲醛
14、的含量,以判斷基因E是否是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用:在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用:一是提供營養(yǎng);二是一是提供營養(yǎng);二是_,從而使葉片保持正常形態(tài)。,從而使葉片保持正常形態(tài)。解析解析(1)在植物組織培養(yǎng)過程中,植物激素的濃度配比影響著在植物組織培養(yǎng)過程中,植物激素的濃度配比影響著脫分化和再分化過程,培養(yǎng)基中細胞分裂素配比較高時誘導愈脫分化和再分化過程,培養(yǎng)基中細胞分裂素配比較高時誘導愈傷組織生芽,培養(yǎng)基中生長素配比較高時誘導生根,培養(yǎng)基中傷組織生芽,培養(yǎng)基中生長素配比較高時誘導生根,培養(yǎng)基中含合適濃度配比的植物激素時再分化成再生植株。含合適濃
15、度配比的植物激素時再分化成再生植株。(2)將轉(zhuǎn)基因?qū)⑥D(zhuǎn)基因矮牽牛葉片接種在液體培養(yǎng)基上,用矮牽牛葉片接種在液體培養(yǎng)基上,用揺揺床進行液體懸浮培養(yǎng)可床進行液體懸浮培養(yǎng)可獲得單細胞獲得單細胞,若在培養(yǎng)液中加入甲醛,可以通過測定培養(yǎng)基中,若在培養(yǎng)液中加入甲醛,可以通過測定培養(yǎng)基中甲醛的含量,以判斷基因甲醛的含量,以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。液體懸浮培養(yǎng)中用到液體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基除提供營養(yǎng)外還液體懸浮培養(yǎng)中用到液體培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)基除提供營養(yǎng)外還需要維持滲透壓,維持細胞的正常形態(tài)和功能。需要維持滲透壓,維持細胞的正常形態(tài)和功能。答案答案(1)B(2)搖床維
16、持滲透壓搖床維持滲透壓3.(201610月浙江選考節(jié)選月浙江選考節(jié)選)某小組欲進行煙草原生質(zhì)體分離與某小組欲進行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請回答:培養(yǎng)的研究。請回答:(1)原生質(zhì)體的分離:在無菌條件下,取煙草無菌苗的葉片,放原生質(zhì)體的分離:在無菌條件下,取煙草無菌苗的葉片,放入含有入含有0.5 mol/L甘露醇甘露醇(維持較高滲透壓維持較高滲透壓)的的_混合液處混合液處理,經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。理,經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體的培養(yǎng):將原生質(zhì)體進行培養(yǎng),重新長出細胞壁,原生質(zhì)體的培養(yǎng):將原生質(zhì)體進行培養(yǎng),重新長出細胞壁,形成胚性細胞。此時,應該形成胚性細胞。此時,應該_
17、培養(yǎng)基中甘露醇濃度,以培養(yǎng)基中甘露醇濃度,以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團,然后經(jīng)兩條途徑形成再生利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團,然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一:細胞團經(jīng)球形胚、植株。途徑一:細胞團經(jīng)球形胚、_和胚狀體,最后發(fā)和胚狀體,最后發(fā)育成植株。途徑二:細胞團增殖為愈傷組織,然后在發(fā)芽培養(yǎng)育成植株。途徑二:細胞團增殖為愈傷組織,然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導出芽,切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培基上誘導出芽,切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是養(yǎng)基中含量相對較高的激素是_,胚性細胞的主要特點,胚性細胞的主要特點是:是:_。(A.液泡小、細胞核小液泡小、細
18、胞核小B.液泡大,細胞核大液泡大,細胞核大C.液泡大,細胞核小液泡大,細胞核小D.液泡小、細胞核大液泡小、細胞核大)(3)為了對煙草的某些性狀進行改良,分離到兩種煙草的原生質(zhì)為了對煙草的某些性狀進行改良,分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后,通過體后,通過_方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起,經(jīng)培方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起,經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA,采用,采用_擴增相關(guān)基因,來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。擴增相關(guān)基因,來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。解析解析(1)原生質(zhì)體取得,需要在較高滲透壓的甘露醇溶液中,將原生質(zhì)體取得,需要在較高滲透壓
19、的甘露醇溶液中,將植物細胞用纖維素酶和果膠酶處理,去除細胞壁,從而得到原生植物細胞用纖維素酶和果膠酶處理,去除細胞壁,從而得到原生質(zhì)體。質(zhì)體。(2)當原生質(zhì)體再生出細胞壁后,應當降低培養(yǎng)基中甘露醇當原生質(zhì)體再生出細胞壁后,應當降低培養(yǎng)基中甘露醇濃度,否則將會影響細胞的分裂和生長。胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成濃度,否則將會影響細胞的分裂和生長。胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團。然后經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體,最后發(fā)育成植株。發(fā)細胞團。然后經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體,最后發(fā)育成植株。發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是細胞分裂素,而生長素含量較芽培養(yǎng)基中含量相對較高的激素是細胞分裂素,而生長素含量較低。胚性細胞的主要特
20、點是細胞質(zhì)豐富、液泡小而細胞核大。低。胚性細胞的主要特點是細胞質(zhì)豐富、液泡小而細胞核大。(3)分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后,可以通過原生質(zhì)體融合的方法分離到兩種煙草的原生質(zhì)體后,可以通過原生質(zhì)體融合的方法將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起,經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植將他們的遺傳物質(zhì)組合在一起,經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。在體外擴增相關(guān)基因的方法是采用株。在體外擴增相關(guān)基因的方法是采用PCR技術(shù)。技術(shù)。答案答案(1)纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶(2)降低心形胚細胞分裂素降低心形胚細胞分裂素D(3)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合PCR本題組對應選修三本題組對應選修三P21P37,克隆技術(shù),克隆技術(shù)1.愈
21、傷組織是由相對愈傷組織是由相對的活的的活的細胞團組成,其細胞團組成,其細胞具有細胞質(zhì)細胞具有細胞質(zhì)、液泡、液泡而細胞核而細胞核。2.由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個體之間由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個體之間_差異,細胞全能性差異,細胞全能性大不相同。有的如擬南芥、煙大不相同。有的如擬南芥、煙草和番茄等的培養(yǎng)細胞很草和番茄等的培養(yǎng)細胞很再生出新植株,并能在多個世再生出新植株,并能在多個世代中代中細胞全能性表達;而有的如小麥、玉米和水細胞全能性表達;而有的如小麥、玉米和水稻等的一些品種或品系的培養(yǎng)細胞所誘導出的再生植株,在多稻等的一些品種或品系的培養(yǎng)細胞所誘導出的再生植株,在多次
22、繼代培養(yǎng)后,會次繼代培養(yǎng)后,會細胞全能性表達能力。細胞全能性表達能力。沒有分化沒有分化薄壁薄壁豐富豐富小小大大遺傳性遺傳性表達程度表達程度容易容易保持保持喪失喪失3.在長期培養(yǎng)中,培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可在長期培養(yǎng)中,培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有染色體能原因有染色體、細胞核、細胞核或或產(chǎn)生等,而且其結(jié)果是產(chǎn)生等,而且其結(jié)果是的;細胞或組織中的;細胞或組織中平衡被打破,或細胞對外源生長物質(zhì)的平衡被打破,或細胞對外源生長物質(zhì)的發(fā)生改發(fā)生改變;隨著時間推移,由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏變;隨著時間推移,由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏的細胞系。的細胞系。4.通過大量培養(yǎng)特定細
23、胞系,實現(xiàn)了能產(chǎn)生重要通過大量培養(yǎng)特定細胞系,實現(xiàn)了能產(chǎn)生重要的細胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn);通過的細胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn);通過培養(yǎng),培養(yǎng),進行單倍體克?。辉谂囵B(yǎng)基中加入不同濃度的進行單倍體克?。辉谂囵B(yǎng)基中加入不同濃度的或病原或病原體的體的,誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。,誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。畸變畸變變異變異非整倍體非整倍體不可逆不可逆激素激素敏感性敏感性成胚性成胚性次生代謝產(chǎn)物次生代謝產(chǎn)物花藥花藥NaCl毒蛋白毒蛋白5.動物的組織經(jīng)過動物的組織經(jīng)過或或消化,使其分消化,使其分散成散成細胞。然后,在人工控制的培養(yǎng)條件下,細胞。然后,在人工控制的培養(yǎng)條件下,使這些細胞得以
24、使這些細胞得以_,并保持生長、分裂乃,并保持生長、分裂乃和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動現(xiàn)象。和有規(guī)律的衰老、死亡等生命活動現(xiàn)象。6.理論上各種培養(yǎng)細胞都可被理論上各種培養(yǎng)細胞都可被,但原代培養(yǎng)細胞和,但原代培養(yǎng)細胞和有限細胞系克隆較有限細胞系克隆較;相反,無限細胞系、轉(zhuǎn)化細胞系;相反,無限細胞系、轉(zhuǎn)化細胞系和腫瘤細胞系克隆較和腫瘤細胞系克隆較。這是因為只有對培養(yǎng)環(huán)境。這是因為只有對培養(yǎng)環(huán)境有有和具有較強和具有較強能力的能力的細胞,才容易做細胞克隆。在這方面,單細胞通常細胞,才容易做細胞克隆。在這方面,單細胞通常群體細胞;原代細胞、有限細胞通常群體細胞;原代細胞、有限細胞通常無限細胞、轉(zhuǎn)無限細胞
25、、轉(zhuǎn)化或腫瘤細胞。化或腫瘤細胞。機械消化機械消化胰酶胰酶單個單個生存生存接觸抑制接觸抑制克隆克隆困難困難容易容易較大適應范圍較大適應范圍獨立生存獨立生存不如不如不如不如7.動物的受精卵具有動物的受精卵具有_,具有使后代細胞形成具有使后代細胞形成的潛能。隨胚胎發(fā)育,細胞的全能表達能力下降,成為的潛能。隨胚胎發(fā)育,細胞的全能表達能力下降,成為、直到體細胞,不再能分化為直到體細胞,不再能分化為其他細胞。低等動物細胞的全能性一般比較容易其他細胞。低等動物細胞的全能性一般比較容易。癌細胞癌細胞逆轉(zhuǎn)為正常細胞。所以,無論分化還是癌逆轉(zhuǎn)為正常細胞。所以,無論分化還是癌化,變化的都是化,變化的都是,基因組成的
26、完整性可以,基因組成的完整性可以。動物體細胞中基因組成是完整的,但細胞分化使得基因的表動物體細胞中基因組成是完整的,但細胞分化使得基因的表達發(fā)生了達發(fā)生了,細胞中合成了,細胞中合成了,細胞全能性難以發(fā)揮。細胞全能性難以發(fā)揮。8.體細胞羊的克隆成功證明了:體細胞羊的克隆成功證明了:(1)高度分化的細胞經(jīng)過一定技高度分化的細胞經(jīng)過一定技術(shù)處理,也可以回復到類似術(shù)處理,也可以回復到類似時期的功能;時期的功能;(2)在胚在胚胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有胎和個體發(fā)育中,細胞質(zhì)具有的作用。的作用。全能性全能性完整個體完整個體多能細胞多能細胞專能細胞專能細胞體現(xiàn)體現(xiàn)仍能仍能表現(xiàn)型表現(xiàn)型保留保留差異化差異化專一
27、的蛋白質(zhì)專一的蛋白質(zhì)受精卵受精卵調(diào)控細胞核發(fā)育調(diào)控細胞核發(fā)育9.克隆羊獲得成功的部分原因:重組卵細胞最初分裂時雖然復克隆羊獲得成功的部分原因:重組卵細胞最初分裂時雖然復制了制了DNA,但,但并未開始;同時,供體核并未開始;同時,供體核DNA開始丟失來源于乳腺細胞的開始丟失來源于乳腺細胞的;在重組卵細;在重組卵細胞開始胞開始分裂時,原乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被分裂時,原乳腺細胞的調(diào)節(jié)蛋白便全部被中的蛋白因子替換了,因此核中的蛋白因子替換了,因此核DNA被重新編排,胚細胞開始被重新編排,胚細胞開始基因,進而調(diào)控胚在代孕母親子宮基因,進而調(diào)控胚在代孕母親子宮中的進一步發(fā)育。因此,采用中的進一步發(fā)育。
28、因此,采用技術(shù),選擇技術(shù),選擇細胞進行移植,并在核移植細胞進行移植,并在核移植前對乳腺細胞進行了前對乳腺細胞進行了培養(yǎng),有利于細胞核培養(yǎng),有利于細胞核的一系列變化和細胞融合后基因表達的的一系列變化和細胞融合后基因表達的的啟動。的啟動。基因的轉(zhuǎn)錄基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)蛋白第三次第三次卵細胞質(zhì)卵細胞質(zhì)表達自己的表達自己的電脈沖細胞融合電脈沖細胞融合分裂分裂3次時的次時的營養(yǎng)限制性營養(yǎng)限制性分子開關(guān)分子開關(guān)角度角度1植物的克隆植物的克隆1.下圖表示利用棉花葉肉細胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進行遺傳改良的過程,下圖表示利用棉花葉肉細胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進行遺傳改良的過程,據(jù)圖分析錯誤的是據(jù)圖分析錯誤的是()A.過程需在適
29、宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.過程能定向誘導原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變過程能定向誘導原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C.過程中葉肉細胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能過程中葉肉細胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D.過程需用適宜配比的植物激素處理過程需用適宜配比的植物激素處理解析解析植物細胞壁主要是由纖維素和果膠組成的,常選用纖維植物細胞壁主要是由纖維素和果膠組成的,常選用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得具有活力的原生質(zhì)體,素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得具有活力的原生質(zhì)體,A正確;正確;紫外線照射誘變育種所依據(jù)的原理是基因突變或染色體畸變,紫外線照射誘變育種
30、所依據(jù)的原理是基因突變或染色體畸變,這種變異是不定向的,這種變異是不定向的,B錯誤;錯誤;過程是脫分化,指已經(jīng)分化過程是脫分化,指已經(jīng)分化的植物器官、組織或細胞,當受到創(chuàng)傷或進行離體的植物器官、組織或細胞,當受到創(chuàng)傷或進行離體(也受到創(chuàng)也受到創(chuàng)傷傷)培養(yǎng)時,已停止分裂的細胞,又重新恢復分裂,細胞改變培養(yǎng)時,已停止分裂的細胞,又重新恢復分裂,細胞改變原有的分化狀態(tài),失去原有結(jié)構(gòu)和功能,成為具有未分化特性原有的分化狀態(tài),失去原有結(jié)構(gòu)和功能,成為具有未分化特性的細胞。的細胞。C正確;正確;是再分化,需用適宜配比的植物激素誘導,是再分化,需用適宜配比的植物激素誘導,D正確。正確。答案答案B2.甲、乙是
31、染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分分A,乙含有效成分,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有。某研究小組擬培育同時含有A和和B的新的新型藥用植物。型藥用植物?;卮鹣铝袉栴}:回答下列問題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用_酶和酶和_酶去除細胞壁,獲得具有活力的酶去除細胞壁,獲得具有活力的_,再用化學誘導劑誘導二者融合。形成的融合細胞進,再用化學誘導劑誘導二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成一步培養(yǎng)形成_組織,然后經(jīng)過組織,然后經(jīng)過_形成完整的雜形成完整的雜種植
32、株。這種培育技術(shù)稱為種植株。這種培育技術(shù)稱為_。(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指_。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是的,造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的物組織培養(yǎng)得到的_,用人工薄膜包裝后可得到人工種,用人工薄膜包裝后可得到人工種子。子。解析解析(1)該新型藥用植物是通過植物體細胞雜交技術(shù)獲得的。該新型藥用植物是通過植物體細胞雜交技術(shù)獲得
33、的。要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進行體細胞雜交,因此首先用纖要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進行體細胞雜交,因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細胞壁,然后用維素酶和果膠酶去掉植物的細胞壁,然后用PEG化學誘導劑化學誘導劑(物理方法:離心、振動等物理方法:離心、振動等)誘導二者的原生質(zhì)體融合。然后采誘導二者的原生質(zhì)體融合。然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株,植物組織培養(yǎng)的主要過程用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株,植物組織培養(yǎng)的主要過程是:先脫分化形成愈傷組織,然后再分化形成植物體,利用了是:先脫分化形成愈傷組織,然后再分化形成植物體,利用了植物細胞的全能性。植物細胞的全能性。(2)如果植物甲、乙是兩個
34、物種,二者不能通過有性雜交產(chǎn)生可如果植物甲、乙是兩個物種,二者不能通過有性雜交產(chǎn)生可育后代,原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過程育后代,原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過程中同源染色體聯(lián)會異常,也就是存在著生殖隔離。但植物甲、中同源染色體聯(lián)會異常,也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙通過植物體細胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的,因為在減乙通過植物體細胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的,因為在減數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會,產(chǎn)生正常的配子。數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正常的聯(lián)會,產(chǎn)生正常的配子。由于甲、乙都是二倍體,因此,植物體細胞雜交得到的后代是由于甲、乙都是二倍體,因此
35、,植物體細胞雜交得到的后代是異源多倍體異源多倍體(四倍體四倍體)。(3)人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等因素限制,而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點,因此,等因素限制,而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點,因此,植物細胞工程重要的應用之一是制備人工種子,用到的核心技植物細胞工程重要的應用之一是制備人工種子,用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案答案(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷
36、再分化纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(分化分化)植植物體細胞雜交技術(shù)物體細胞雜交技術(shù)(2)體細胞中含有三個或三個以上染色體組體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體在減數(shù)分裂過程中,前者染色體聯(lián)會異常,而后者染的個體在減數(shù)分裂過程中,前者染色體聯(lián)會異常,而后者染色體聯(lián)會正常色體聯(lián)會正常(3)胚狀體胚狀體1.植物組織培養(yǎng)的操作流程植物組織培養(yǎng)的操作流程2.脫分化和再分化的比較脫分化和再分化的比較比較內(nèi)容比較內(nèi)容脫分化脫分化再分化再分化過程過程外植體外植體愈傷組織愈傷組織愈傷組織愈傷組織幼苗幼苗形成形成體體特點特點排列疏松、高度液泡化排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞的薄壁細胞有根、芽有根、芽需要條件需
37、要條件a.離體離體b.適宜的營養(yǎng)適宜的營養(yǎng)c.生長素生長素/細胞分裂素的細胞分裂素的比例適中比例適中d.一般不需光一般不需光a.離體離體b.適宜的營養(yǎng)適宜的營養(yǎng)c.生長素生長素/細胞分裂素的比細胞分裂素的比例高或低誘導生根或生芽例高或低誘導生根或生芽d.光照光照角度角度2動物的克隆動物的克隆1.下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞C.由多個細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆由多個細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆
38、D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀解析解析連續(xù)細胞系的細胞一般都培養(yǎng)了多代,具有了連續(xù)增殖連續(xù)細胞系的細胞一般都培養(yǎng)了多代,具有了連續(xù)增殖能力,二倍體核型發(fā)生了改變,大多數(shù)細胞具有異倍體核型,能力,二倍體核型發(fā)生了改變,大多數(shù)細胞具有異倍體核型,A錯誤;細胞癌變是由相關(guān)基因突變引起的,如果癌細胞在一錯誤;細胞癌變是由相關(guān)基因突變引起的,如果癌細胞在一定條件下發(fā)生回復性的基因突變,則有可能恢復成正常細胞,定條件下發(fā)生回復性的基因突變,則有可能恢復成正常細胞,B正確;細胞克隆的最基本的要求是,必須確定所建立的克隆正確;細胞克隆的最基本的要求是,必須
39、確定所建立的克隆來源于單個細胞,來源于單個細胞,C錯誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系具有異質(zhì)錯誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系具有異質(zhì)性,而克隆化培養(yǎng)成的細胞株則具有相同的性狀,性,而克隆化培養(yǎng)成的細胞株則具有相同的性狀,D錯誤。錯誤。答案答案B2.某研究者用抗原某研究者用抗原(A)分別免疫分別免疫3只同種小鼠只同種小鼠(X、Y和和Z),每只小,每只小鼠免疫鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。,結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的若要制備
40、雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞淋巴細胞(染色體數(shù)染色體數(shù)目目40條條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞,并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)染色體數(shù)目目60條條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤抗體的雜交瘤細胞。細胞。回答下列問題?;卮鹣铝袉栴}。(1)制備融合所需的制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到價需達到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過以上,則小鼠最少
41、需要經(jīng)過_次免疫后次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這這3只免疫小鼠中,只免疫小鼠中,最適合用于制備最適合用于制備B淋巴細胞的是淋巴細胞的是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有交瘤細胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種類,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是型細胞的原因是_。(3)雜交瘤細胞中有雜交瘤細胞中有_個細胞核,染色體數(shù)目是個細胞核,染色體數(shù)目是_條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是淋巴細胞經(jīng)
42、多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_。解析解析(1)據(jù)圖分析,第據(jù)圖分析,第4次免疫后次免疫后X、Y、Z小鼠的血清抗體效小鼠的血清抗體效價均達到價均達到16 000以上,小鼠以上,小鼠Y的的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體效價最高,淋巴細胞產(chǎn)生抗體效價最高,最適用于制備單克隆抗體。最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,還有骨髓融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,還有骨髓瘤細胞和瘤細胞和B淋巴細胞的自身融合產(chǎn)物,由于細胞膜具有流動性,淋巴細胞的自身融合產(chǎn)物,由于細胞膜具有流動性,且誘導之后的細胞融合不具有特異性,故體系中會出現(xiàn)多種類且誘導之后的細胞融合不具有特異性,故
43、體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。型的細胞。(3)雜交瘤細胞形成后,小鼠的雜交瘤細胞形成后,小鼠的B淋巴細胞核與骨髓瘤細胞核會淋巴細胞核與骨髓瘤細胞核會融合形成一個細胞核。小鼠的融合形成一個細胞核。小鼠的B淋巴細胞淋巴細胞(染色體數(shù)目染色體數(shù)目40條條)和和骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目染色體數(shù)目60條條)融合后,染色體可達融合后,染色體可達100條。條。(4)未融合的未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能無增殖淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能無增殖的細胞,同時正常細胞的分裂次數(shù)是有限的。的細胞,同時正常細胞的分裂次數(shù)是有限的。答案答案(1)4YY小鼠的抗體效價最高小鼠的抗體效價最高(
44、2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞,骨髓瘤細胞相互融合形成淋巴細胞相互融合形成的細胞,骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的,且融合率達不到的細胞細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%(3)1100(4)不能無限增殖不能無限增殖1.植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的異同植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的異同項目項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)植物細胞全能性植物細胞全能性細胞增殖細胞增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型固體或半固體培養(yǎng)基固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂糖、氨基酸、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無
45、機鹽、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、促生長因子、動物維生素、促生長因子、動物血清等血清等取材取材植物幼嫩部位或花藥等植物幼嫩部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織動物的器官或組織過程過程結(jié)果結(jié)果新的組織或植株個體,新的組織或植株個體,可以體現(xiàn)全能性可以體現(xiàn)全能性新的細胞系或細胞株,不形新的細胞系或細胞株,不形成個體,不體現(xiàn)全能性成個體,不體現(xiàn)全能性目的目的植株快速繁殖植株快速繁殖脫毒植株的培育脫毒植株的培育人工種子人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育皮膚移植
46、材料的培育檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學研究生理、病理、藥理學研究相同點相同點兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂,都是兩技術(shù)手段培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱克隆,都不涉及減數(shù)分裂無性繁殖,都可稱克隆,都不涉及減數(shù)分裂均為無菌操作,需要適宜的溫度、均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件等條件2.列表法比較細胞系和細胞株列表法比較細胞系和細胞株種類種類來源來源特點特點細胞系細胞系有限細胞系有限細胞系由二倍體細胞傳代由二倍體細胞傳代培養(yǎng)建成培養(yǎng)建成有接觸抑制;不能連續(xù)培養(yǎng)有接觸抑制;不能連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)細胞系連續(xù)細胞系由傳代細胞連續(xù)培由傳代細胞連續(xù)培養(yǎng)建成養(yǎng)建成發(fā)
47、生了轉(zhuǎn)化,多數(shù)具有異倍體發(fā)生了轉(zhuǎn)化,多數(shù)具有異倍體核型;有些具有異體致瘤性;核型;有些具有異體致瘤性;有些具有不死性,但不致癌有些具有不死性,但不致癌細胞株細胞株有限細胞株有限細胞株通過一定的選擇或通過一定的選擇或純化方法,從原代純化方法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞質(zhì)的細胞傳代次數(shù)有限傳代次數(shù)有限一般具有恒定一般具有恒定染色體組型、染色體組型、同功酶類型、同功酶類型、病毒敏感和生病毒敏感和生化特性等化特性等連續(xù)細胞株連續(xù)細胞株可可連續(xù)連續(xù)多次多次傳代傳代3.植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較 植物體細胞雜交植
48、物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合原理原理 細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的全能性 細胞膜的流動性細胞膜的流動性過程過程相關(guān)酶相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法融合方法物理法:離心、電激、振物理法:離心、電激、振動;化學法:聚乙二醇等動;化學法:聚乙二醇等試劑誘導試劑誘導除物理法和化學法外還除物理法和化學法外還可以用滅活的病毒誘導可以用滅活的病毒誘導結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細胞雜交細胞意義意義克服了遠緣雜交的不親和克服了遠緣雜交的不親和性,獲得雜種植株性,獲得雜種植株生產(chǎn)單克隆抗體;實現(xiàn)生產(chǎn)單克隆抗體;實現(xiàn)基因定位基因定位
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