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第十二單元 生物技術(shù)實(shí)踐 階段性檢測(cè) (時(shí)間：45分鐘　滿分：90分) 1．(10分)(2018江西新余第四中學(xué)模擬)科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與pBR322質(zhì)粒進(jìn)行重組，得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵，使其發(fā)育為轉(zhuǎn)基因牛，再通過(guò)細(xì)胞工程培育為轉(zhuǎn)基因克隆牛。pBR322質(zhì)粒含有兩個(gè)抗生素抗性基因和5個(gè)限制酶切點(diǎn)(如圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題： (1)圖1中顯示的人的生長(zhǎng)激素基因是通過(guò)人工合成的，圖中①過(guò)程需要的酶是________。該過(guò)程所依據(jù)的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則是_________________________________。 (2)圖1中的mRNA是從人體的________細(xì)胞中獲取的。 (3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌，通過(guò)含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，觀察大腸桿菌的生長(zhǎng)、繁殖情況進(jìn)行判斷，如圖3所示： ①如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落，而不能在培養(yǎng)基B上生長(zhǎng)、繁殖，則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________________________，即目的基因插入了________________________中。 ②如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落，而在培養(yǎng)基B上能生長(zhǎng)、繁殖，則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________，即目的基因插入了________________________________________________________________________中。 ③如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落，則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________。 解析：(1)根據(jù)圖1分析，目的基因是通過(guò)mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；RNA中的堿基是A、U、C、G，DNA中的堿基是A、T、C、G，所以堿基配對(duì)方式是A→T、U→A、G→C、C→G。(2)根據(jù)題意，生長(zhǎng)激素基因是目的基因，該基因表達(dá)產(chǎn)物由垂體細(xì)胞分泌，所以需要從垂體細(xì)胞中提取mRNA。(3)①根據(jù)題意，受體菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存，不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存，所以限制酶切點(diǎn)位于四環(huán)素基因內(nèi)部，由圖可知，是切點(diǎn)3、4、5。②根據(jù)題意，受體菌不能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存，能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存，所以限制酶切點(diǎn)位于抗氨芐青霉素基因內(nèi)部，由圖可知，是切點(diǎn)1。③根據(jù)題意，受體菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存，也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存，所以這兩個(gè)基因都沒(méi)有被破壞，由圖可知，是切點(diǎn)2。 答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄酶　 A→T、U→A、G→C、C→G (2)垂體 (3)①切點(diǎn)3或切點(diǎn)4或切點(diǎn)5　抗四環(huán)素基因 ②切點(diǎn)1　 抗氨芐青霉素基因 　 ③切點(diǎn)2 2．(8分)(2018泰安一模)克隆良種豬成功率較低，該現(xiàn)象與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可檢測(cè)出該基因的轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系。克隆豬的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如下圖，圖中a、b、c、d分別代表流程中某過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自________細(xì)胞。a過(guò)程采用的技術(shù)手段稱(chēng)做________技術(shù)。 (2)b過(guò)程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有________；c過(guò)程表示________。 (3)d過(guò)程需要________酶的催化。從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl2 mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成2種________________用于PCR擴(kuò)增，除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及________________，PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是________。 解析：(1)圖中a過(guò)程表示動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)，卵母細(xì)胞是受體細(xì)胞，良種豬的體細(xì)胞是供體細(xì)胞提供細(xì)胞核，形成重組細(xì)胞。(2)b過(guò)程為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，其培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的主要區(qū)別是成分不同，其必須含有動(dòng)物血清。c過(guò)程表示胚胎移植過(guò)程，將早期胚胎移植到受體子宮。(3)d過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。PCR技術(shù)中，需要兩種不同的引物、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及TaqDNA聚合酶；PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是Bcl2 cDNA。 答案：(1)體 　 體細(xì)胞核移植 (2)動(dòng)物(豬)血清　 胚胎移植 (3)逆轉(zhuǎn)錄 　 引物　TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)　 Bcl2 cDNA 3．(8分)(2018廣東汕頭模擬)青蒿素主要是從青蒿植株的地上部分提取而來(lái)，最有效的抗瘧藥之一，最新研究表明，青蒿素還可用于糖尿病的治療。研究人員利用基因工程培育出高產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因青蒿。回答下列問(wèn)題： (1)青蒿的cDNA文庫(kù)，是以青蒿細(xì)胞中提取的________為模板，通過(guò)________(方法)建立起來(lái)的。青蒿的cDNA文庫(kù)含有青蒿基因組中的全部基因嗎？________。 (2)研究人員從青蒿的cDNA文庫(kù)中獲取了合成青蒿素所需的兩種關(guān)鍵酶的基因。在對(duì)這兩個(gè)目的基因分別進(jìn)行PCR時(shí)，向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)中，除了模板不同，________也肯定不同。 (3)構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)在兩個(gè)目的基因的首端和尾端分別安插上________和終止子，使目的基因能夠________。構(gòu)建好的目的基因表達(dá)載體一般通過(guò)___________________________________法而導(dǎo)入到青蒿細(xì)胞中，最終獲得轉(zhuǎn)基因植株。 (4)有人另辟蹊徑，成功培育出能生產(chǎn)青蒿素的轉(zhuǎn)基因酵母菌。試指出利用轉(zhuǎn)基因酵母菌生產(chǎn)青蒿素的兩點(diǎn)優(yōu)勢(shì)： ________________________________________________。 解析：(1)cDNA文庫(kù)是以mRNA為模板，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄的方法建立起來(lái)的。cDNA文庫(kù)屬于部分基因文庫(kù)，其只含有青蒿基因組中的部分基因。(2)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的條件是：模板DNA、四種脫氧核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)。因此，對(duì)這兩個(gè)目的基因分別進(jìn)行PCR時(shí)，向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)中，除了模板不同，引物也肯定不同。(3)基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，因此構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)在兩個(gè)目的基因的首端和尾端分別安插上啟動(dòng)子和終止子，使目的基因能夠表達(dá)，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(4)利用轉(zhuǎn)基因酵母菌生產(chǎn)青蒿素的優(yōu)勢(shì)：酵母菌繁殖快、易培養(yǎng)、成本低，可以工業(yè)化生產(chǎn)，生產(chǎn)不受季節(jié)、氣候、地域限制。 答案：(1)mRNA　 反轉(zhuǎn)錄　不含有 (2)引物　(3)啟動(dòng)子 　轉(zhuǎn)錄(或表達(dá))　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 (4)酵母菌繁殖快； 易培養(yǎng)；成本低；可以工業(yè)化生產(chǎn)，生產(chǎn)不受季節(jié)、氣候、地域限制 4．(9分) 研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過(guò)量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，目前已成為有效的生物治療手段。 (1)選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)，是因?yàn)镠蛋白在成年個(gè)體的正常組織中________(填“低表達(dá)”或“高表達(dá)”)。H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時(shí)，應(yīng)構(gòu)建________區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。 (2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與________細(xì)胞進(jìn)行融合，使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是________，細(xì)胞融合的原理是________________________。 (3)將融合細(xì)胞在________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行________檢測(cè)。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (4)治療乳腺癌時(shí)，可單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，殺死癌細(xì)胞。這充分體現(xiàn)了單克隆抗體________的特點(diǎn)。 解析：(1) H蛋白在多種惡性腫瘤中過(guò)量表達(dá)，在成年個(gè)體的正常組織中低表達(dá)，因此選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。H蛋白的胞外部分可被免疫系統(tǒng)識(shí)別，制備免疫小鼠用的H蛋白(抗原)時(shí)，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。 (2)將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，取該小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，使用PEG(或聚乙二醇)進(jìn)行化學(xué)誘導(dǎo)融合，細(xì)胞融合依賴(lài)于細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 (3)將融合細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可篩選出雜交瘤細(xì)胞。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，應(yīng)用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (4)治療乳腺癌時(shí)，使用抗H蛋白單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，定向殺死癌細(xì)胞，這充分體現(xiàn)了單克隆抗體特異性強(qiáng)(或識(shí)別抗原部位專(zhuān)一)的特點(diǎn)。 答案：(1)低表達(dá)　胞外 (2)骨髓瘤　 PEG(或聚乙二醇)　 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 (3)選擇 　抗體陽(yáng)性 (4)特異性強(qiáng)(或識(shí)別抗原部位專(zhuān)一) 5．(10分)(2018山東臨沂調(diào)研)請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題： (1)上圖中的胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)可以從________或________中分離獲取。 (2)過(guò)程Ⅰ是將胚胎干細(xì)胞置于經(jīng)γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞構(gòu)成的飼養(yǎng)層上，并加入動(dòng)物血清、抗生素等物質(zhì)培養(yǎng)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。在此過(guò)程中，飼養(yǎng)層能提供胚胎干細(xì)胞增殖所需的____________________，加入抗生素是為了____________________。該過(guò)程對(duì)于研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理具有重要意義。 (3)過(guò)程Ⅱ是將帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入囊胚的囊胚腔，通過(guò)組織化學(xué)染色，用于研究動(dòng)物體器官形成的時(shí)間、發(fā)育過(guò)程以及影響因素，這項(xiàng)研究利用了胚胎干細(xì)胞具有________________的特點(diǎn)。在哺乳動(dòng)物早期發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一個(gè)階段是________。 (4)過(guò)程Ⅲ是培育轉(zhuǎn)基因小鼠，將獲得的目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞最常用的方法是 ________________________________________________________________________。 (5)過(guò)程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中全是軟骨、神經(jīng)管、橫紋肌和骨骼等人類(lèi)組織和器官。實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________， 該過(guò)程研究的意義在于解決_____________________________________________________ ________________________________________________________________________問(wèn)題。 (6)該研究中，包含的生物技術(shù)有________________________________(至少寫(xiě)出兩種)。 解析：(1)胚胎干細(xì)胞可以從早期胚胎或原始性腺中分離獲取。(2)飼養(yǎng)層細(xì)胞可為胚胎干細(xì)胞增殖提供所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而加入抗生素可防止雜菌的污染。(3)胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性。哺乳動(dòng)物的早期發(fā)育過(guò)程為受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚。(4)基因工程中最關(guān)鍵的步驟為構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞最常用的方法是顯微注射法。(5)為解決臨床上供體器官不足或器官移植后發(fā)生免疫排斥等問(wèn)題，常用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體。為解決免疫排斥問(wèn)題，在實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須去除小鼠的胸腺，使其不能形成T細(xì)胞，不發(fā)生細(xì)胞免疫，使移植組織細(xì)胞不會(huì)被排斥。(6)該研究中，包含的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等。 答案：(1)早期胚胎　原始性腺 (2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)　防止雜菌污染 (3)發(fā)育的全能性　原腸胚 (4)使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用　顯微注射法 (5)去除胸腺后不能形成T細(xì)胞，不發(fā)生細(xì)胞免疫，使移植組織細(xì)胞不會(huì)被排斥　臨床上供體器官不足或器官移植后發(fā)生免疫排斥等 (6)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植(至少答出兩項(xiàng)) 6．(8分)在釀酒、釀醋、制作腐乳、制作酸奶過(guò)程中都要涉及各種微生物，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)釀酒利用的微生物是酵母菌，制作過(guò)程中，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖，然后再進(jìn)行酒精發(fā)酵。檢測(cè)酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成________色。 (2)在酒精發(fā)酵時(shí)瓶?jī)?nèi)溫度一般應(yīng)控制為_(kāi)_______。醋酸發(fā)酵時(shí)溫度一般應(yīng)控制為_(kāi)_______。 (3)在臭豆腐的制備過(guò)程中，常用的微生物主要是________等，在此過(guò)程中，豆腐相當(dāng)于微生物生長(zhǎng)的________。 (4)民間制作腐乳時(shí)，豆腐塊上生長(zhǎng)微生物，在制作鹵湯時(shí)一般要加鹽、酒，若加入的酒精濃度(含量)過(guò)低，會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？_________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)在腌制泡菜的過(guò)程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封壇的作用是________________________________________________________________________， 欲檢測(cè)泡菜在腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量，使用檢測(cè)試劑后顏色變?yōu)開(kāi)_______。 解析：(1)釀酒利用的微生物是酵母菌，制作過(guò)程中，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖，然后再進(jìn)行酒精發(fā)酵。檢測(cè)酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。(2)在酒精發(fā)酵時(shí)瓶?jī)?nèi)溫度一般應(yīng)控制為18～25 ℃。醋酸發(fā)酵時(shí)溫度一般應(yīng)控制為30～35 ℃。(3)在臭豆腐的制備過(guò)程中，常用的微生物主要是毛霉等，在此過(guò)程中，豆腐相當(dāng)于微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。(4)民間制作腐乳時(shí)，豆腐塊上生長(zhǎng)微生物，在制作鹵湯時(shí)一般要加鹽、酒，若加入的酒精濃度(含量)過(guò)低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。(5)在腌制泡菜的過(guò)程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封壇的作用是制造缺氧環(huán)境；欲檢測(cè)泡菜在腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量，使用檢測(cè)試劑后顏色的變化為出現(xiàn)玫瑰紅色。 答案：(1)灰綠　(2)18～25 ℃　30～35 ℃ (3)毛霉　培養(yǎng)基 (4)不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì) (5)制造缺氧環(huán)境　玫瑰紅色 7．(9分)(2018武昌模擬)“每天喝一點(diǎn)，健康多一點(diǎn)”，這是“寧夏紅”率先提出的消費(fèi)理念，將積淀了千百年的枸杞藥食文化和中國(guó)紅文化完美結(jié)合起來(lái)，更增添了品牌的文化魅力和優(yōu)勢(shì)。下面為“寧夏紅”枸杞果酒生產(chǎn)工藝流程簡(jiǎn)圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)流程中“？”處的內(nèi)容依次應(yīng)為_(kāi)_______、________。 (2)制作果酒時(shí)，溫度應(yīng)該控制在________，果酒釀造過(guò)程中如果果汁滅菌不合格，含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說(shuō)明理由。________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)枸杞果酒制作過(guò)程中，接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無(wú)菌空氣，目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)果酒制作是否成功，需發(fā)酵后用__________________來(lái)鑒定，在____________條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)________色。 解析：(1)果酒生產(chǎn)的工藝流程為：選料→沖洗→粉碎→滅菌→接種→發(fā)酵→過(guò)濾→果酒。(2)醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30～35 ℃。如果果汁滅菌不合格，含有醋酸菌，由于果酒發(fā)酵旺盛時(shí)是無(wú)氧環(huán)境，且溫度為18～25 ℃，不適合醋酸菌生存，故醋酸菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸。(3)枸杞果酒制作過(guò)程中，接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無(wú)菌空氣，在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量，有利于后期發(fā)酵。(4)酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。 答案：(1)沖洗　過(guò)濾 (2)18～25 ℃　不能。因醋酸菌是好氧型細(xì)菌，而果酒發(fā)酵是無(wú)氧環(huán)境(或因醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35 ℃條件下，才能將糖轉(zhuǎn)化為醋酸，而此時(shí)發(fā)酵罐中的條件是無(wú)氧且溫度是18～25 ℃) (3)使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量 (4)重鉻酸鉀溶液　酸性　灰綠 8．(9分)某研究小組的同學(xué)用所學(xué)的微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的方法進(jìn)行“變質(zhì)牛奶中金黃色葡萄球菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”，部分實(shí)驗(yàn)處理和結(jié)果如圖所示。(注：培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目；實(shí)驗(yàn)條件適宜；實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范等)請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題： (1)在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的________和________條件；另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物無(wú)法混入。 (2)據(jù)圖，研究小組采用的是________________法分離和計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌。由樣品到4號(hào)試管的操作中，第一步，將分別盛有9 mL生理鹽水的4支試管________，并編號(hào)1～4號(hào)；第二步，用移液管從樣品中吸取1 mL牛奶，注入1號(hào)試管中，充分搖勻；第三步，重復(fù)第二步驟操作，以此類(lèi)推。4號(hào)試管的稀釋倍數(shù)是__________________________。 (3)資料顯示，金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在10%～15%NaCl肉湯中生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)可配制含10%氯化鈉的培養(yǎng)基，使之成為_(kāi)_______培養(yǎng)基，以利于金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)，抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。 (4)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，需按照菌落計(jì)數(shù)的要求計(jì)數(shù)，以保證計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確。據(jù)圖可得出1 mL牛奶樣品中金黃色葡萄球菌的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 解析：(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，即要為微生物提供營(yíng)養(yǎng)和適宜溫度等環(huán)境條件，還要防止被其他微生物污染。(2)圖示所用的分離方法是稀釋涂布平板法；圖示中每一次稀釋都稀釋了10倍，因此4號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為104倍。(3)含有較高濃度NaCl的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(4)圖示中2號(hào)試管和4號(hào)試管稀釋度下各有2個(gè)和1個(gè)培養(yǎng)皿，偶然性較大，應(yīng)以3號(hào)試管稀釋度的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，即(32＋39＋37)30.1103＝3.6105。 答案：(1)營(yíng)養(yǎng)　環(huán)境 (2)稀釋涂布平板　滅菌　104 (3)選擇 (4)3.6105 9．(9分)(2018湖南衡陽(yáng)模擬)已知青蒿素是無(wú)色針狀晶體，易溶于有機(jī)溶劑，不易揮發(fā)；而玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，易揮發(fā)。根據(jù)生物相關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題： (1)從黃花蒿中提取青蒿素時(shí)，應(yīng)采用萃取法，理由是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________； 并且通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行________和干燥，以提高效率；干燥過(guò)程應(yīng)控制好________和時(shí)間，以防止青蒿素分解。 (2)提取過(guò)程中宜采用水浴加熱以防止燃燒、爆炸；所得液體濃縮前需進(jìn)行________。 (3)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，簡(jiǎn)便易行的提取方法是水蒸氣蒸餾中的____________法，在提取過(guò)程中分別加入NaCl(目的是____________________)、Na2SO4；要提高玫瑰精油的產(chǎn)品質(zhì)量，應(yīng)采用的措施是________________________。 解析：(1)青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出，但易溶于有機(jī)溶劑，所以從黃花蒿中提取青蒿素時(shí)，應(yīng)采用萃取法；為提高效率，在用萃取法提取青蒿素前，通常將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和干燥處理；干燥過(guò)程應(yīng)控制好溫度和時(shí)間，以防止青蒿素分解。(2)提取過(guò)程中所得的液體濃縮前需進(jìn)行過(guò)濾。(3)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，常用水蒸氣蒸餾中的水中蒸餾法提取；為增加水的比重，使油水分層，可在提取過(guò)程中加入NaCl；要提高玫瑰精油的產(chǎn)品質(zhì)量，應(yīng)嚴(yán)格控制蒸餾溫度，延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間。 答案：(1)青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出，但易溶于有機(jī)溶劑　粉碎　溫度 (2)過(guò)濾 (3)水中蒸餾　增加水的比重，使油水分層　嚴(yán)格控制蒸餾溫度，延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間 10．(10分)(2018廣東惠州模擬)日前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過(guò)實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果。回答下列相關(guān)問(wèn)題： (1)該實(shí)驗(yàn)需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、____________。 (2)據(jù)圖，兩電視臺(tái)均采用________________法接種，該方法需要________(多選)。 A．接種環(huán) B．酒精燈　C．移液管 D．涂布器 E．無(wú)菌水 (3)通過(guò)觀察菌落的________，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是：____________________________________。 (4)按圖操作取樣面積，實(shí)驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)謩e取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為_(kāi)_____________個(gè)/平方厘米。該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組該設(shè)置為_(kāi)__________________________________________________________。 解析：(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。(2)根據(jù)圖形分析，該實(shí)驗(yàn)的接種方法為稀釋涂布平板法，該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無(wú)菌水等。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩個(gè)電視臺(tái)調(diào)查的手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，可能是因?yàn)槭謾C(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據(jù)提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)＝(48＋50＋52)31020.110(55)＝2104(個(gè)/平方厘米)。 答案：(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽 (2)稀釋涂布平板　BCDE (3)形態(tài)、大小　手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同 (4)2104　取培養(yǎng)基涂布0.1 mL無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)