動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體課前預(yù)習(xí)學(xué)案一、預(yù)習(xí)目標(biāo)預(yù)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程，了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用，并說其應(yīng)用實(shí)例?！岸?、預(yù)習(xí)內(nèi)容、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：_或_動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形一個(gè)細(xì)胞的過程，也稱細(xì)胞雜交。2、結(jié)果：形成_。3、過程：兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞_。4、意義：克服了_的不親和性，成為研究_、_、腫瘤和 _培育的重要手段。、單克隆抗體1、抗體產(chǎn)生細(xì)胞：_。 成分：_。特點(diǎn)：從_中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2、單克隆抗體的制備(1)過程 雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：_、_。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：_、_、_。、單克隆抗體的應(yīng)用1、作為診斷試劑，具有_、_、_、_的優(yōu)點(diǎn)。2、用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療_、可制成_。三、提出疑惑同學(xué)們，通過你的自主學(xué)習(xí)，你還有哪些疑惑，請把它填在下面的表格中疑惑點(diǎn)疑惑內(nèi)容課內(nèi)探究學(xué)案一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1、 掌握動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。2、 簡述動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程。3、 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用，并說其應(yīng)用實(shí)例。學(xué)習(xí)重難點(diǎn)：單克隆抗體的制備二、學(xué)習(xí)過程(一) 動(dòng)物細(xì)胞的融合探究一：動(dòng)物細(xì)胞的融合1、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的區(qū)別（學(xué)生填下表）植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性融合過程先使細(xì)胞分散開誘導(dǎo)方法電激、振動(dòng)、離心、聚乙二醇結(jié)果應(yīng)用培育植物新品種意義相同點(diǎn)原生質(zhì)體融合原理相同；原生質(zhì)體融合的方法相似2植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的主要區(qū)別是什么？3、為什么可以使用滅活的病毒促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合？4、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎？知識閱讀：閱讀課本P52中的小字，了解一下動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史。（二）單克隆抗體探究二：單克隆抗體制備的原理1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？抗體是從何來的？2、B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)？3、若要想獲得大量的單一抗體，如何做呢？4、在體外培養(yǎng)的條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無限增殖的，那么，怎樣解決這一問題的呢？5、小結(jié)以下內(nèi)容： 利用_產(chǎn)生特異性抗體的功能。 利用_無限增殖的特性。 利用_技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞。 利用_技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。探究三：單克隆抗體制備的過程1、如何獲得B淋巴細(xì)胞？2、如果把B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞放在一起時(shí)，會有幾種融合方式（類型）？3、 選擇雜交瘤細(xì)胞的兩步篩選的目的各是什么？4、如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？（教師講解為主）融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞，但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔不超過一個(gè)細(xì)胞，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體，那么上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細(xì)胞還不能保證是來自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋，一般需進(jìn)行34次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。該過程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。探究四：單克隆抗體的應(yīng)用1、單克隆抗體的應(yīng)用有哪些？2、生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點(diǎn)（三）反思總結(jié)(四)當(dāng)堂檢測1、基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的仙臺病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞 ( )AAAaa BAaBb CAabb DBBbb2、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 ( )誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A.B. C.D.3、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是( )A、可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)4、“生物導(dǎo)彈”是指( )A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體C、雜交細(xì)胞 D、B淋巴細(xì)胞課后練習(xí)與提高1、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是( )A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點(diǎn) C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程2、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱為( )A、抗體、T淋巴細(xì)胞 B、抗原、T淋巴細(xì)胞C、抗體、B淋巴細(xì)胞 D、抗原、效應(yīng)B淋巴細(xì)胞3、單克隆抗體和血清抗體相比，其優(yōu)越性在 于( )A、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強(qiáng)、免疫活性高D、單克隆抗體制備過程簡單4、單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是( ) A特異性強(qiáng)、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌5、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B都是細(xì)胞工程的技術(shù)范圍C都充分體現(xiàn)了體細(xì)胞的全能性 D都不會發(fā)生基因重組和變異6、右圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_ _處理，除去了_；由A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是_。融合完成的標(biāo)志是_。（2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用_技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（3）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自_，然后用_使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是_，所形成的D稱為_ ，A、B融合為C的過程說明了細(xì)胞膜具有_。（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了_，圖中B為 。（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有_種，用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是_。從中選擇出它的方法是_培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和_。動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案答案預(yù)習(xí)內(nèi)容：探究二：單克隆抗體制備的原理1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？抗體是從何來的？傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低，而且制備的抗體特異性差。2、B淋巴細(xì)胞有什么特點(diǎn)？B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，但每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。3、若要想獲得大量的單一抗體，如何做呢？我們必須用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，也就是通過克隆形成細(xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，即單克隆抗體第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。因?yàn)樾∈篌w內(nèi)的B淋巴細(xì)胞有很多種，因此獲得的雜交瘤細(xì)胞可能產(chǎn)生不同的抗體，需要從中篩選出能產(chǎn)生我們所需的單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，篩選的方法是專一抗體檢驗(yàn)。4、如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？（教師講解為主）融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞，但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔不超過一個(gè)細(xì)胞，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中