2.生物技術(shù)實踐(B)1.(2018杭州學軍中學模擬)回答下列有關(guān)果膠、果汁和果膠酶等相關(guān)的問題：(1)果膠是植物細胞壁的主要成分，起著將植物細胞_在一起的作用。制作果汁時可加入果膠酶和_以分解果膠，提高果汁出汁率和澄清度。(2)果膠酶可從黑曲霉中提取，下列適于黑曲霉擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是_(A.蛋白胨和酵母提取物培養(yǎng)基B.尿素固體培養(yǎng)基C.MS培養(yǎng)基D.添加蔗糖的豆芽汁培養(yǎng)基)。由于果膠酶溶于水，不利于重復使用，可通過物理或化學方法將果膠酶固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有_的制劑。(3)用果汁制作果酒，以果汁為原料，加入一定比例的蔗糖的目的是_。最后倒入酵母懸液，混勻，加蓋；發(fā)酵開始時，由于微生物的需氧呼吸會使發(fā)酵瓶內(nèi)出現(xiàn)_，原因是_。答案(1)粘合果膠甲酯酶(2)D酶活性(3)提高果酒的酒精和糖的含量負壓需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳比氧氣易溶于水2.(2018寧波鎮(zhèn)海中學期中)請回答與“大腸桿菌的培養(yǎng)與分離”實驗有關(guān)的問題：(1)大腸桿菌是革蘭氏_、兼性厭氧的腸道桿菌，一般對人無害。實驗室利用_培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)后使用灼燒、冷卻后的_進行劃線分離，這種_的分離是用于篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。(2)若要將大腸桿菌臨時保存，一般接種在_上，37 培養(yǎng)24 h后，置于_(A.20 B.4 C.4 D.37 )環(huán)境條件下保存。答案(1)陰性LB液體接種環(huán)單菌落(2)斜面C解析(1)大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌；在實驗室中擴大培養(yǎng)大腸桿菌時常用LB液體培養(yǎng)基；接種時需對接種環(huán)灼燒滅菌；采用劃線分離法篩選出高表達量單菌落。(2)若要將大腸桿菌臨時保存，一般接種在斜面培養(yǎng)基上，37 培養(yǎng)24 h后，并置于4 環(huán)境條件下保存。3.在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細菌的實驗中先將10升湖水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請回答下列問題：(1)可以通過提高培養(yǎng)基中_的濃度，篩選被調(diào)查細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_培養(yǎng)基。(2)要提高實驗結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設置的對照組是_。為檢驗(1)中篩選方法的效果，可以設置的對照組是_。(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。為防止冷凝水影響細菌的生長需將培養(yǎng)皿_培養(yǎng)。(4)根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)，可以計算湖水中該種細菌的密度，但計算的數(shù)據(jù)要比實際活菌的數(shù)目少，原因是_。答案(1)鹽(或NaCl)選擇(2)未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)皿未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)(3)高壓蒸汽滅菌倒置(4)當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落4.(原創(chuàng))釀酒、造醋是我國的傳統(tǒng)技藝，為了探究與改進制造工藝，進行了相關(guān)研究。請回答有關(guān)問題：(1)目的菌株篩選后應該利用_培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)，_是消除污染雜菌的通用方法。(2)制作葡萄酒過程中，為了使酵母菌迅速發(fā)生作用，可加少量_混勻。將葡萄漿放入發(fā)酵瓶，裝量不超過_(A.1/2B.2/3C.3/4D.100%)，當發(fā)酵瓶_表示發(fā)酵完畢。(3)醋的制作中發(fā)酵瓶中裝鋸末至_，將適量的醋化醋桿菌培養(yǎng)物加在酒水混合物中混勻，并調(diào)pH至_后，倒入發(fā)酵瓶。答案(1)液體單菌落的分離(2)蔗糖B停止出現(xiàn)氣泡(3)八分滿7.05.下圖為葡萄酒生產(chǎn)工藝流程簡圖，請據(jù)圖回答下面的問題：(1)流程中“方框”處的內(nèi)容依次為_、_。(2)果酒釀造過程中如果果汁滅菌不合格，含有醋化醋桿菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋化醋桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說明理由：_。(3)果酒制作離不開酵母菌，與醋化醋桿菌比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點是_(A.有細胞壁B.有細胞膜C.有核糖體D.有成形的細胞核)。(4)若要提高果酒的產(chǎn)量，發(fā)酵過程中關(guān)鍵要控制好哪些條件？_(至少填寫2項)。答案(1)沖洗滅菌(2)不能。因醋化醋桿菌是好氧型細菌，而果酒發(fā)酵時是無氧環(huán)境(3)D(4)適宜的溫度、pH、通氣量6.尿素是一種高濃度氮肥，長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂糖1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學_(填“能”或“不能”)分離出土壤中分解尿素的細菌，原因是_。(2)要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用_法接種。(3)接種前要對培養(yǎng)基進行_處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在_條件下進行。(4)某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_，應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_。答案(1)不能培養(yǎng)基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源(2)涂布分離(3)滅菌無菌(4)菌液濃度過高對菌液進行梯度稀釋(加大稀釋倍數(shù))7.請回答下列與微生物培養(yǎng)、發(fā)酵過程相關(guān)的問題：(1)在“分離以尿素為氮源的微生物”的實驗中，配制好的尿素固體培養(yǎng)基加上封口膜后用_方法滅菌，冷卻后加入用G6玻璃砂漏斗過濾的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用_浸泡，并抽濾去酸，再用_沖洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實驗中，可以用_(A.50%乙醇B.70%乙醇C.90%乙醇D.95%乙醇)鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或_中提取，配制這些微生物的培養(yǎng)基時需要將pH調(diào)至_。(3)在“用果汁制作果酒”實驗中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的_。答案(1)高壓蒸汽滅菌1 mol/L的HCl蒸餾水(2)D蘋果青霉中性偏酸(3)蔗糖8.生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。請回答下列問題：(1)培養(yǎng)大腸桿菌所用的LB培養(yǎng)基一般用_法滅菌。檢驗大腸桿菌的含量時，通常用_將水樣進行一系列的梯度稀釋。(2)將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀_到LB固體培養(yǎng)基，_于恒溫培養(yǎng)箱，在_ 條件下進行培養(yǎng)。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時_(填“需要”或“不需要”)設置對照組。(3)下圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是_。A.步驟倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置B.步驟接種環(huán)在火焰上灼燒后迅速蘸取菌液劃線C.步驟多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落D.步驟恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對大腸桿菌進行計數(shù)答案(1)高壓蒸汽滅菌無菌水(2)涂布倒置37需要(3)C9.請回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實驗有關(guān)的問題：(1)果膠是細胞壁的重要組成成分，其化學本質(zhì)是_(填寫如下選項)，它在細胞壁形成過程中的主要作用是將相鄰的細胞_在一起。A.蛋白質(zhì) B.脂質(zhì)C.核酸 D.多糖(2)制取果汁時，先用果膠酶將果膠分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，再用_酶處理，可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時，果汁的出汁率、澄清度與酶的_高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進行_處理，從而得到干制品。答案(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果膠甲酯活性(3)脫水(沉淀)解析(1)果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成的，其化學本質(zhì)屬于多糖。果膠起著將植物細胞粘合在一起的作用。(2)果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)。要使果汁更澄清，應同時使用果膠酶和果膠甲酯酶。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時，果汁的出汁率、澄清度與酶的活性高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進行沉淀處理，從而得到干制品。