專題15 生物技術(shù)實踐1（2018北京卷，4）以下高中生物學(xué)實驗中，操作不正確的是A在制作果酒的實驗中，將葡萄汁液裝滿整個發(fā)酵裝置B鑒定DNA時，將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進(jìn)行沸水浴C用蘇丹染液染色，觀察花生子葉細(xì)胞中的脂肪滴（顆粒）D用龍膽紫染液染色，觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞中的染色體【答案】A【解析】在制作果酒的實驗中，葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置，要留出1/3的空間，A錯誤；在DNA鑒定實驗中，DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍(lán)色，B正確；用蘇丹染液可以把花生子葉細(xì)胞中的脂肪顆粒染成橘黃色，C正確；用龍膽紫染液能將細(xì)胞中的染色體染成深紫色，在洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞中能清晰地觀察到，D正確。2（2018江蘇卷，8）花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是A為了防止微生物污染，過程所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB過程的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C過程逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D過程應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上【答案】C3（2018江蘇卷，14）下列關(guān)于酵母細(xì)胞固定化實驗的敘述，正確的是A用溫水使海藻酸鈉迅速溶解，待其冷卻到室溫后用于包埋細(xì)胞B進(jìn)行包埋時，用于懸浮細(xì)胞的CaCl2溶液濃度要適宜C注射器（或滴管）出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀D包埋酵母細(xì)胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性【答案】D【解析】在酵母細(xì)胞固定化實驗中，應(yīng)該用小火、間斷加熱的方式使海藻酸鈉緩慢溶解，A錯誤；將混合液用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液進(jìn)行固定化酵母細(xì)胞，CaCl2的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠，B錯誤；注射器（或滴管）出口應(yīng)與液面保持適當(dāng)?shù)木嚯x，以保證凝膠珠成為球狀，C錯誤；包埋酵母細(xì)胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀，并具有一定的彈性，D正確。4（2018江蘇卷，16）某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究，下列敘述錯誤的是A夏季生產(chǎn)果酒時，常需對罐體進(jìn)行降溫處理B乙醇為揮發(fā)性物質(zhì)，故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓D可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵【答案】B5（2018江蘇卷，17）關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實驗，下列敘述正確的是A在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑，溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色B在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑，液體由藍(lán)色變成紫色C提取DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾液D將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴后液體由無色變成藍(lán)色【答案】D【解析】甘蔗莖的組織樣液富含蔗糖，而蔗糖屬于非還原糖，且不能用斐林試劑檢測，A錯誤；大豆種子中富含蛋白質(zhì)，先后加入雙縮脲試劑A液和B液搖勻后，液體由藍(lán)色變?yōu)樽仙?，B錯誤；提取DNA時，在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾并棄去濾紙上的粘稠物，留下濾液，C錯誤；將DNA粗提物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑并水浴加熱，溶液由無色變?yōu)樗{(lán)色，D正確。6（2018江蘇卷，21）下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述，錯誤的是A洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來B洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解C在50熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶會迅速失活D加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不會影響其中酶的活性【答案】BCD【解析】加酶洗衣粉中加入的酶多是微生物發(fā)酵產(chǎn)生的,其本質(zhì)與生物體內(nèi)的酶無明顯差異，A正確；洗衣粉中的蛋白酶通常不會將添加的其他酶迅速分解，這是因為加酶洗衣粉中的酶經(jīng)過了特殊的化學(xué)物質(zhì)的包裹，使之與其他成分隔離，這些酶在遇水后，包裹層分解，酶才能發(fā)揮作用，B錯誤；加酶洗衣粉的pH值一般不大于10，在水溫4560時，能充分發(fā)揮洗滌作用，因此在50熱水中用加酶洗衣粉洗衣時，其中的酶不會失活，C錯誤；加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，會導(dǎo)致其中酶的活性降低，D錯誤。7（2017江蘇卷.10）下列關(guān)于“腐乳的制作”的實驗，敘述正確的是A控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生【答案】B【解析】溫度通過影響酶的活性影響腐乳發(fā)酵，控制發(fā)酵的溫度主要有利于毛霉等微生物的生長和腐乳發(fā)酵，A錯誤；香辛料和料酒都能抑制微生物的生長，具有防腐作用，B正確；毛霉的主要作用是產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分解成小分子化合物，C錯誤；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的，毛霉屬于真菌，D錯誤。8（2017江蘇卷.12）固定化單寧酶應(yīng)用于茶飲料加工，可消除其中的苦澀味。下列有關(guān)敘述正確的是A在單寧酶純化時可采用透析法去除雜蛋白B化學(xué)結(jié)合法比吸附法對單寧酶活性影響更小C溫度、pH 和重金屬離子都可能影響固定化單寧酶活性D酶的高效性決定固定化單寧酶不會降解茶飲料中的有益成分【答案】C9（2017江蘇卷.17）為了探究一種新型堿性纖維素酶的去污效能，研究性學(xué)習(xí)小組進(jìn)行了相關(guān)實驗，結(jié)果如下圖。由圖中實驗結(jié)果能直接得出的結(jié)論是A堿性纖維素酶對污布類型2的去污力最強(qiáng)B不同類型洗衣粉影響堿性纖維素酶的去污力C堿性纖維素酶對污布類型2、3的去污力不同D加大酶用量可以顯著提高洗衣粉的去污力【答案】C【解析】20 U/L的堿性纖維素酶處理對污布類型1，去污力為60%，30 U/L的堿性纖維素酶處理污布類型2，去污力約為80%，則單位堿性纖維素酶對污布類型1去污力最強(qiáng)，A錯誤；由于污布類型不同，不能探究不同類型的洗衣粉對堿性蛋白酶的去污力的影響，B錯誤；對污布類型2、3而言，都是Y型洗衣粉，30%的酶用量，但去污力不同，說明堿性纖維素酶對污布類型2、3 的去污力不同，C正確；該實驗沒有針對同一類型的洗衣粉加大酶用量的探究，則不能判斷加大酶用量是否提高洗衣粉的去污力，D錯誤。10（2017江蘇卷.20）下列關(guān)于“酵母細(xì)胞的固定化技術(shù)”實驗的敘述，正確的是A活化酵母時，將適量干酵母與蒸餾水混合并攪拌成糊狀B配制CaCl2 溶液時，需要邊小火加熱邊攪拌C將海藻酸鈉溶液滴加到CaCl2 溶液時，凝膠珠成形后應(yīng)即刻取出D海藻酸鈉溶液濃度過高時凝膠珠呈白色，過低時凝膠珠易呈蝌蚪狀【答案】A【解析】活化酵母時，將適量干酵母與蒸餾水混合，并攪拌成糊狀，A正確；配制CaCl2溶液時，不需進(jìn)行加熱，B錯誤；CaCl2溶液使酵母細(xì)胞可以形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，固定在凝膠珠中，需要一段時間，時間不宜過短或過長，C錯誤；海藻酸鈉溶液濃度過低時凝膠珠呈白色，過高時凝膠珠易呈蝌蚪狀，D錯誤。11（2017江蘇卷.25）下圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是A改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài)果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān)D氣體入口與氣體出口可以交換使用【答案】ABC12.（2016江蘇卷.7）下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實驗，敘述正確的是A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長 B.加料酒主要是為了滅菌，避免腐乳變質(zhì)C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌 D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用【答案】D【解析】加鹽主要是為了抑制微生物生長，防止豆腐腐敗變質(zhì)，A錯誤；加料酒主要為了使腐乳具有獨特的香味，B錯誤；發(fā)酵過程中起主要作用的是毛霉，C錯誤；實驗室制作的腐乳可能滅菌不徹底，不宜直接食用，D正確。13.（2016江蘇卷.10）定量分析是科學(xué)研究的重要方法。下列能用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)的是A.海拉細(xì)胞懸液 B.濃縮培養(yǎng)的噬菌體 C.自來水中大腸桿菌 D.蛙卵【答案】A14.（2016江蘇卷.21）（多選）為了使牛仔褲呈現(xiàn)“穿舊”效果，在工業(yè)洗衣機(jī)中用酶洗代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浮石擦洗，是目前重要的生產(chǎn)手段（工藝流程見下圖）。下列敘述中錯誤的是牛仔布仿舊的部分布中深藍(lán)色紗線布中白色紗線藍(lán)色變淡分離的染料 纖維素酶淺藍(lán)色背景穿舊效果適當(dāng)水解再染色 A纖維素酶在仿舊中的作用機(jī)理與其在洗衣粉中去污的機(jī)理相似B在上述工藝中，為重復(fù)使用纖維素酶，可選用適當(dāng)?shù)陌駝┕潭ɑ窩在上述工藝中，通過調(diào)節(jié)溫度、酸堿度、處理時間可控制仿舊顏色的深淺D纖維素酶催化葡萄糖殘基間磷酸二酯鍵的水解分解纖維素【答案】BD15.（2016江蘇卷.25）（多選）漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是 A 生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B 篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C 在涂布平板上長出的菌落，在通過劃線進(jìn)一步純化D 斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫下長期保存菌株【答案】BC【解析】生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，A錯誤；篩選生活污水中含有大量微生物，B正確；在涂布平板上長出的菌落，在通過劃線進(jìn)一步純化，C正確；斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在低溫下長期保存菌株，D錯誤。 16（2017海南卷.30）選修1：生物技術(shù)實踐（15分）綠藻A是某種單細(xì)胞綠藻，能夠合成物質(zhì)W。某小組為探究氮營養(yǎng)缺乏對綠藻A增殖及物質(zhì)W累計的影響，將等量的綠藻A分別接種在氮營養(yǎng)缺乏（實驗組）和氮營養(yǎng)正常（對照組）的兩瓶培養(yǎng)液中，并在適宜溫度和一定光強(qiáng)下培養(yǎng)。定時取樣并檢測細(xì)胞濃度和物質(zhì)W的含量，結(jié)果如圖。（1）從圖甲可知，在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中，綠藻A的種群增長曲線呈_型。（2）綜合圖甲和圖乙的信息可知，在生產(chǎn)上，若要用少量的綠藻A獲得盡可能多的物質(zhì)W，可以采取的措施是_。（3）若物質(zhì)W是類胡蘿卜素，根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機(jī)溶劑的特點，應(yīng)選擇的提取方法是_。用紙層析法可以將類胡蘿卜素與葉綠素分開，紙層析法分離的原理是_。（4）在以上研究的基礎(chǔ)上，某人擬設(shè)計實驗進(jìn)一步研究氮營養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響，則該實驗的自變量是_。（5）與在光照條件下相比，若要使綠藻A在黑暗條件下增殖，需要為其提供_（填“葡萄糖”或“纖維素”）作為營養(yǎng)物質(zhì)，原因是_?！敬鸢浮浚?）S （2）先將少量綠藻放在氮營養(yǎng)正常的培養(yǎng)液培養(yǎng)，等到細(xì)胞濃度最高時集中收集，再放在氮營養(yǎng)缺乏的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)（3）萃取 類胡蘿卜素和葉綠素在層析液（有機(jī)溶劑）中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度快，反之則慢，從而將它們分離。（4）培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度（5）葡萄糖 在黑暗下，綠藻不能進(jìn)行光合作用合成糖類（有機(jī)物），需要吸收葡萄糖為營養(yǎng)物質(zhì)，而纖維素不能被綠藻吸收利用?！窘馕觥浚?）圖甲，與對照組比較，在氮營養(yǎng)正常培養(yǎng)液的瓶中，綠藻A的種群增長先增加后平穩(wěn)，曲線呈S型。（3）根據(jù)類胡蘿卜素不易揮發(fā)和易于溶于有機(jī)溶劑的特點，應(yīng)選擇的提取方法是萃取。類胡蘿卜素和葉綠素在層析液（有機(jī)溶劑）中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度快，反之則慢，從而將它們分離，這是紙層析法分離的原理。（4）實驗?zāi)康氖茄芯康獱I養(yǎng)缺乏程度對物質(zhì)W積累的影響，故自變量培養(yǎng)基中的氮營養(yǎng)濃度。（5）綠藻黑暗中不能光合作用合成有機(jī)物，需要吸收葡萄糖滿足生命活動的需要，而纖維素不能綠藻利用。17（2017新課標(biāo)卷.37）生物選修1：生物技術(shù)實踐（15分）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生_。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是_，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_（答出兩點即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇_（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。（3）用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2 HPO4，其作用有_（答出兩點即可）?！敬鸢浮浚?）脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物 為細(xì)胞生物生命活動提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（2）尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用（3）為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定（2）篩選分解尿素的細(xì)菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，對于“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”均含有無機(jī)氮源。（3）KH2PO4和Na2 HPO4為微生物提供P元素和無機(jī)鹽離子如鉀離子和鈉離子，還可作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定。18（2017新課標(biāo)卷.37）生物選修1：生物技術(shù)實踐（15分）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：（1）該實驗的自變量是_、_。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是_。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是_。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開?！敬鸢浮浚?）菌種發(fā)酵時間（2）好氧菌（3）延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間（4）氨基酸和肽脂肪酸和甘油【解析】（1）該實驗的自變量是菌種、發(fā)酵時間。（2）如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。（3）如果在實驗后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。（4）從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗模巨D(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视汀?9（2017新課標(biāo)卷.37）生物選修1：生物技術(shù)實踐（15分）綠色植物甲含有物質(zhì)W，該物質(zhì)為無色針狀晶體，易溶于極性有機(jī)溶劑，難溶于水，且受熱、受潮易分解。其提取流程為：植物甲粉碎加溶劑振蕩收集提取液活性炭處理過濾去除活性炭蒸餾（含回收溶劑）重結(jié)晶成品?；卮鹣铝袉栴}：（1）在提取物質(zhì)W時，最好應(yīng)選用的一種原料是_（填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”）的植物甲，不宜選用其他兩種的原因是_。（2）提取物質(zhì)W時，振蕩的作用是_。（3）活性炭具有很強(qiáng)的吸附能力，在提取過程中，用活性炭處理提取液的目的是_。（4）現(xiàn)有丙酮（沸點56 ）、乙醇（沸點約78 ）兩種溶劑，在提取物質(zhì)W時，應(yīng)選用丙酮作為提取劑，理由是_。（5）該實驗操作過程中應(yīng)注意的事項是_（答出兩點即可）?！敬鸢浮浚?）晾干高溫烘干過程中，植物甲中的物質(zhì)W易被破壞；新鮮的植物甲含水量高，用于提取的極性有機(jī)溶劑會被稀釋，進(jìn)而降低對物質(zhì)W的提取效果（2）使原料和溶劑充分混勻（3）去除提取液中的色素（4）丙酮沸點低于乙醇，蒸餾時物質(zhì)W分解較少（5）在溫度較低的情況下操作，防火20.（2016天津卷.10）（12分）天津獨流老醋歷史悠久、獨具風(fēng)味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。 （1）在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度，這是因為酶_。（2）在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高_(dá)的數(shù)量，有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）在醋酸發(fā)酵階段，獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下。發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如右圖。據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是_。 乳酸含量高是獨流老醋風(fēng)味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中，發(fā)酵缸中_層醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的變化，加劇了不同種類乳酸菌的_，淘汰了部分乳酸菌種類?！敬鸢浮浚?2分）（1）在最適溫度條件下催化能力最強(qiáng)（2）酵母菌（3）先快速增長后趨于穩(wěn)定？ 氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、PH顛倒前的B層和顛倒后的A（或不翻動，或下）種間競爭（或競爭）21.（2016課標(biāo)1卷.39） 生物選修1：生物技術(shù)實踐（15分）空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）; 制作無菌平板； 設(shè)置空白對照組和若干實驗組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于37恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。（2）步驟中，實驗組的操作是_。（3）若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將30（即36-6）個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_（填“正確”或“不正確”）?！敬鸢浮浚?）牛肉膏、蛋白胨 瓊脂（2）將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間（3）污染 不正確【解析】（1）依據(jù)配制培養(yǎng)基的成分可知：該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于牛肉膏、蛋白胨。因為該實驗是 “用平板收集教室空氣中的微生物”，所使用的培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，配制時，需加入凝固劑，據(jù)此推知：該培養(yǎng)基中的成分X通常是瓊脂。 22.（2016四川卷.10）（12分）圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成 色。（2）在5個細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105 的土壤樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是 ，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 108個；與血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較 。 （3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為 ，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含 個氨基酸?！敬鸢浮浚?）尿素 酚紅 紅 （2）稀釋涂布平板法 1.75 少 （3）UGA 115【解析】（1）由于篩選產(chǎn)脲酶，脲酶能夠催化尿素分解為氨，故應(yīng)以尿素為唯一氮源，培養(yǎng)基中可以加入酚紅指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色。23.（2016新課標(biāo)2卷.39)生物選修1：生物技術(shù)實踐（15分）蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的，回答下列為題：（1）酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程和是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的_中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與_試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗；過程在酵母菌細(xì)胞的_中進(jìn)行，與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增值速度_。（2）第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在_條件下才能完成。（3）在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度_（填“低于”或“高于”）第二階段。（4）醋酸桿菌屬于_核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中（填“含有”或“不含有”）線粒體?！敬鸢浮浚?5分）（1）細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 重鉻酸甲 線粒體 快（2）有氧 （3）低于 （4）原 不含有【解析】（1）圖示中的過程和分別表示無氧呼吸的第一、第二階段，其場所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸甲溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。過程表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即在酵母菌細(xì)胞的線粒體中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。（2）醋酸桿菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，需要在有氧條件下才能完成。（3）第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是1825，第二階段即果醋的制作所控制的溫度范圍是3035，所以第一階段的溫度低于第二階段的。（4）醋酸桿菌屬于原核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器。24.（2016新課標(biāo)卷.39）某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用_對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是_。（2）推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有_和_。分離純化時應(yīng)挑選出_的菌落作為候選菌。（3）乳酸菌在-20長期保存時，菌液中常需要加入一定量的_（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）。【答案】（1）無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落（2）鑒別乳酸菌 中和產(chǎn)生的乳酸 具有透明圈（3）甘油（2）由題意可知，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。由此可推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌；根據(jù)產(chǎn)酸菌在含CaCO3的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明的原理，分離純化時應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，然后用平板劃線法進(jìn)一步分離純化。 25.（2016江蘇卷.29）（9分）為了探索海藻酸鈉固定化對綠球藻生長的影響，以及固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用，科研人員用篩選到的一株綠球藻進(jìn)行試驗，流程及結(jié)果如下。請回答下列問題：（1）實驗中的海藻酸鈉作用是 ，CaC l2的作用是 。（2）為洗去凝膠球上殘余的CaC l2和其他污染物，并保持綠球藻活性，宜采用 洗滌。圖1 中1. 0%海藻酸鈉組培養(yǎng)24 h 后,移去凝膠球,溶液呈綠色,原因是_。（3）為探索固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用，應(yīng)選用濃度為 海藻酸鈉制備凝膠球。（4）圖2中空白凝膠球組Zn2+濃度下降的原因是 。結(jié)合圖1和圖2分析，固定化藻的實驗組2448h間Zn2+濃度下降速度較快的主要原因是 ；7296h間Zn2+濃度下降速度較慢的原因有 ?！敬鸢浮浚?）包埋綠球藻（包埋劑） 與海藻酸鈉反應(yīng)形成形成凝膠球（凝固劑） （2）培養(yǎng)液（生理鹽水） 海藻酸鈉濃度過低（凝膠球孔徑過大）（3）2.0% （4）凝膠球吸附Zn2+ 綠球藻生長（增殖）速度快 綠球藻生長（增殖）速度減慢，溶液中Zn2+濃度較低26.（2016海南卷.30）回答下列問題：（1）蛋白酶甲、乙、丙三者的活性隨pH的變化如圖所示。通常，用清水洗滌衣服上的新鮮血跡時，不應(yīng)該使用開水，原因是_。若要去除衣服上的血漬，應(yīng)選擇含有_（填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”）的堿性洗衣粉，理由是_。（2）某同學(xué)為了洗去衣服上的油漬，洗衣時在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，該同學(xué)的做法_（填“合理”或“不合理”），理由是_。（3）已知溶液的pH可以影響酶的活性，請推測pH影響某種蛋白酶活性的原因可能是其影響了酶和底物分子中_（填“羧基和氨基”、“氨基和甲基”、“羧基和甲基”或“甲基和甲基”）等基團(tuán)的解離狀態(tài)?！敬鸢浮浚?5分）（1）開水使血中的蛋白質(zhì)變性而沉淀，難以清洗（3分）蛋白酶丙（1分）堿性條件下只有蛋白酶丙有活性（4分）（2）不合理（1分） 蛋白酶會降解脂肪酶（4分）（3）羧基和氨基（2分）27.（2016上海卷.四）回答下列有關(guān)微生物和酶工程的問題?？莶菅挎邨U菌盛產(chǎn)蛋白酶，后者在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價值，且已大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。44. 在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時，培養(yǎng)基營養(yǎng)成分應(yīng)包括水和_（用序號組合回答）。淀粉蛋白質(zhì)生長因子葡萄糖無機(jī)鹽為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產(chǎn)株，將分別浸過不同菌株(ae)的分泌物提取液及無菌水（f）的無菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基表面；在37恒溫箱中放置23天，結(jié)果如圖17.45. 大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化首選的菌株是_；菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區(qū)的原因是_。圖18 顯示枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其酶活性。在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對發(fā)酵液在6070保溫一定時間，再制備酶制劑。46.在6070保溫一定時間的作用是_。A.誘導(dǎo)蛋白酶的熱穩(wěn)定性B.有利于發(fā)揮蛋白酶的最佳活性C.裂解枯草芽孢桿菌細(xì)胞D.大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性47.枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為_(選擇正確的序號并排序)。過濾干燥破碎濃縮【答案】44./45.a不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足；合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足；分泌的蛋白酶活性低46.D47.47. 枯草芽孢桿菌蛋白酶可以分泌到細(xì)胞外，因此不需破碎過程，經(jīng)過濾、濃縮、干燥程序即可?！究键c定位】本題考查微生物培養(yǎng)和酶工程的相關(guān)知識?！久麕燑c睛】本題考查枯草芽孢桿菌蛋白酶的制備。屬于容易題。解題關(guān)鍵是明確微生物培養(yǎng)的基本條件。本題易錯點是45題第二空和47題。45題第二空錯因在于考慮不周，47題錯因在于未能注意枯草芽孢桿菌蛋白酶可以分泌到細(xì)胞外。28（2018全國卷，37）回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：（1）分離培養(yǎng)酵母菌通常使用_（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用_滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進(jìn)_（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)_（填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”）。（3）制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是_?！敬鸢浮浚?）麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體 （2）菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生 （3）酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟【解析】（1）麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。（2）酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細(xì)胞增殖快；若進(jìn)行無氧培養(yǎng)，進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。（3）制作面包時，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。29（2018海南卷，30）葡萄酒是葡萄汁經(jīng)酵母菌發(fā)酵而成的。釀制葡萄酒的兩個簡易裝置如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩(wěn)定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優(yōu)點是（答出兩點即可）。（2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是（答出兩點即可）。（3）某同學(xué)若用乙裝置進(jìn)行發(fā)酵，并設(shè)置兩個不同處理組（乙A和乙B），乙A裝置中保留一定量的氧氣，乙B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內(nèi)乙A和乙B中酒精含量的變化趨勢及乙A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。圖中曲線、依次表示、含量的變化趨勢。（4）從細(xì)胞呼吸類型看，酵母菌屬于生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于（填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”）生物?！敬鸢浮浚?）不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染（2）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出（3）乙A中的氧氣乙B中的酒精乙A中的酒精（4）兼性厭氧異養(yǎng)（3）分析題意可知，圖中曲線、依次表示乙A中的氧氣、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的變化趨勢。（4）從細(xì)胞呼吸類型看，酵母菌屬于兼性厭氧生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于異養(yǎng)生物。30（2018全國卷，37）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：（1）在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具_(dá)（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_。（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_，在照射前，適量噴灑_，可強(qiáng)化消毒效果。（4）水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過_（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。（5）某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是_?！敬鸢浮浚?）可以 （2）在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少 （3）破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液（4）氯氣 （5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡【解析】（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 （2）煮沸消毒法即在100時煮沸56min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在7075時煮30min或在80時煮15min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。（3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 （5）采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。31（2018全國卷，37）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制_的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有_ （答出兩點即可）。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有_（答出兩點即可）。（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_。（4）甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的偏落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是_?！敬鸢浮浚?）細(xì)菌選擇 （2）碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸 （3）碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈（4）乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差【解析】（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細(xì)菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（4）乙同學(xué)結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。32（2018江蘇卷，31）酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題：（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的，及時對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行滅菌。（2）取步驟中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟中將溫度約（在25 、50 或80 中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。（3）挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有。a為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株（4）步驟中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1 000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，用2516型血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上色細(xì)胞的個數(shù)應(yīng)不少于，才能達(dá)到每毫升3109個活細(xì)胞的預(yù)期密度?！敬鸢浮浚?）pH 高壓蒸汽（濕熱）（2）50 （3）a、b、d（4）氧氣 無 30【解析】（1）配制培養(yǎng)基的操作步驟為稱量溶化定容調(diào)pH培養(yǎng)基的分裝包扎滅菌，因此微生物的培養(yǎng)基配制好后應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH，再分裝。常見的滅菌方法有：干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌。培養(yǎng)基適宜用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（2）在步驟中，待培養(yǎng)基冷卻至50左右時進(jìn)行倒平板。（3）在劃線過程中，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，以防止雜菌污染，a正確；劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則將不能形成正常菌落，b正確；該實驗的目的是獲得利用工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母菌，不需要測定酵母菌中的甲醇含量，c錯誤；培養(yǎng)基中的甲醇濃度越高，此種培養(yǎng)基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越強(qiáng)，因此可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株，d正確。