課題1DNA的粗提取與鑒定基礎(chǔ)鞏固1下列各項(xiàng)中不宜選作DNA提取材料的是()A.洋蔥表皮細(xì)胞 B.鮮豌豆種子C.人的成熟紅細(xì)胞D.雞血細(xì)胞液解析:作為DNA提取材料的首要條件是DNA含量豐富,而哺乳動物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,所以不宜選作實(shí)驗(yàn)材料。答案:C2若選擇的實(shí)驗(yàn)材料為植物細(xì)胞,破碎細(xì)胞時(shí)要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑的目的是()A.利于DNA的溶解B.瓦解細(xì)胞膜C.分離DNA和蛋白質(zhì)D.溶解蛋白質(zhì)解析:洗滌劑是一種離子去污劑,能瓦解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。答案:B3DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)中在破碎血細(xì)胞時(shí),要加入 20 mL 的蒸餾水,其作用是()A.溶解DNAB.使血細(xì)胞破裂,DNA釋放C.稀釋血液,防止凝固D.有利于攪拌解析:一般用低滲溶液,如蒸餾水,使細(xì)胞過度吸水而破裂,從而使細(xì)胞中的DNA釋放出來。答案:B4在除去雜質(zhì)時(shí)將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,這樣做的目的是()A.使DNA變性B.使蛋白質(zhì)變性C.使DNA和蛋白質(zhì)變性D.分解蛋白質(zhì)解析:大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080 的高溫,而DNA在80 以上才變性。在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,目的是使蛋白質(zhì)變性,然后分離得到DNA。答案:B5某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn),操作錯誤的是()A.加入洗滌劑后,進(jìn)行充分的研磨B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析:提取洋蔥的DNA時(shí),加入一定量的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,A項(xiàng)錯誤;蛋白酶能夠分解研磨液中的蛋白質(zhì)以純化DNA,B項(xiàng)正確;加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌以防止因DNA斷裂而不能形成絮狀沉淀,C項(xiàng)正確;加入二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 5 min,以觀察顏色是否變藍(lán),D項(xiàng)正確。答案:A6在提取DNA的過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是()A.不易破碎B.減少DNA的損失C.增加DNA的含量D.容易刷洗解析:DNA易吸附在玻璃管上,造成DNA量的損失。答案:B7在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品的濃度及其名稱分別是()物質(zhì)的量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液物質(zhì)的量濃度為0.015 mol/L的NaCl溶液A.B.C.D.解析:初步析出DNA和提取純凈的DNA所用的藥品的濃度及其名稱分別是物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L 的NaCl溶液和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液。答案:B8“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,A、B、C、D、E五個(gè)小組除下表中所列處理方法不同外,其他操作步驟均相同且正確,但實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻不同。組別實(shí)驗(yàn)材料提取核物質(zhì)時(shí)加入的溶液去除雜質(zhì)時(shí)加入的溶液DNA鑒定時(shí)加入的試劑A雞血蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(25 )二苯胺B菜花蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(冷卻)雙縮脲C人血漿蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(冷卻)二苯胺D人血細(xì)胞2 mol/L的氯化鈉0.14 mol/L的氯化鈉雙縮脲E雞血蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液(冷卻)二苯胺(1)實(shí)驗(yàn)材料選擇錯誤的組別是,其原因是  。 (2)實(shí)驗(yàn)步驟(不包括實(shí)驗(yàn)材料)均正確,但得不到DNA的組別是。 (3)沸水浴中試管顏色變藍(lán)的組別是;藍(lán)色較淡的是,其原因是  。 (4)B組實(shí)驗(yàn)不成功的最主要原因是 。 解析:(1)人的血漿中沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),人成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,在這些材料中不能得到DNA或得到的DNA很少。(2)血細(xì)胞中有少量的白細(xì)胞,其中有DNA,所以只有C組人血漿中沒有DNA。(3)冷卻的酒精溶液對DNA有較好的凝集效果,而A組中為25 的酒精溶液。(4)菜花細(xì)胞外有細(xì)胞壁起保護(hù)作用,在蒸餾水中不會破裂,所以不能得到DNA。答案:(1)C、D人的血漿中沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),人成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,選用這些材料得不到DNA或得到的DNA很少(2)C(3)A、EA冷卻的酒精溶液對DNA的凝集效果較佳,該組使用的是25 的酒精溶液(4)菜花細(xì)胞在蒸餾水中不能被破壞,得不到DNA(應(yīng)采用研磨的方法)能力提升1在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中,下列相關(guān)敘述正確的是()A.用蒸餾水將NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度調(diào)至0.14 mol/L,濾去析出物B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分雜質(zhì)C.將絲狀物溶解在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D.用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同解析:當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA溶解度最小,析出物中含有大量的DNA。將絲狀DNA溶解在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L 的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑沸水浴加熱后呈藍(lán)色。用菜花替代雞血作實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)操作步驟不完全相同,處理菜花時(shí),先加入洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨。答案:B2玻璃棒攪拌出的較純凈的DNA的顏色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)顯現(xiàn)的顏色分別是()A.黃色、紫色B.白色、磚紅色C.白色、藍(lán)色D.藍(lán)色、磚紅色解析:DNA在體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精中析出時(shí)的顏色為白色,DNA遇二苯胺(沸水浴)顯現(xiàn)的顏色為藍(lán)色。答案:C3下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離B.利用高溫能使DNA變性,卻對蛋白質(zhì)沒有任何影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離C.利用DNA在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最大的特點(diǎn),可將DNA與蛋白質(zhì)分離D.在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離解析:DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,A項(xiàng)不正確。蛋白質(zhì)比DNA對溫度的耐受性更差,因此更容易變性,B項(xiàng)不正確。DNA在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,而蛋白質(zhì)在該濃度的NaCl溶液中溶解度較大,因此可將DNA與蛋白質(zhì)分離,C項(xiàng)不正確。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白質(zhì)水解,而對DNA沒有影響,因此,可將DNA與蛋白質(zhì)分離,D項(xiàng)正確。答案:D4在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)過程中,有兩次DNA沉淀析出,其依據(jù)的原理是()DNA在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低DNA在冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精中能沉淀析出A.兩次都是B.兩次都是C.第一次是,第二次是D.第一次是,第二次是解析:第一次沉淀析出是用濃NaCl溶液溶解核內(nèi)DNA之后,加蒸餾水稀釋NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至0.14 mol/L,使DNA溶解度最低而析出;第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DNA物質(zhì),達(dá)到提純DNA的目的。答案:C5從植物中提取DNA,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好,如果看不到絲狀物沉淀、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色等,其可能原因是()植物細(xì)胞中DNA含量低研磨不充分過濾不充分體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液的量過大A.B.C.D.解析:若實(shí)驗(yàn)中看不到絲狀物沉淀、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色等,說明DNA提取量少。不同植物,其細(xì)胞中DNA含量不同,但不一定都低。酒精溶液的作用是溶解雜質(zhì)而不是溶解DNA,因此酒精溶液用量過大,不會導(dǎo)致DNA含量減少。研磨不充分和過濾不充分,會導(dǎo)致DNA提取量減少。答案:D6將粗提取的DNA絲狀物分別加入到物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液、物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L 的NaCl溶液、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液中,然后用放有紗布的漏斗過濾,分別得到濾液P、Q、R以及存留在紗布上的黏稠物p、q、r,其中由于含DNA少可以丟棄的是()A.P、Q、RB.p、q、rC.P、q、RD.p、Q、r解析:將粗提取的DNA絲狀物加入物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L 的NaCl溶液中,DNA析出,過濾后DNA存在于紗布上(p),雜質(zhì)存在于濾液(P)中;加入物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中,DNA溶解,過濾后DNA存在于濾液(Q)中,雜質(zhì)(q)存在于紗布上;加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液中,DNA析出,過濾后DNA存在于紗布上(r),雜質(zhì)存在于濾液(R)中。答案:C7回答下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的問題。下圖為該實(shí)驗(yàn)過程中的一些重要操作示意圖。(1)正確的操作順序是。(請用字母和箭頭表示) (2)上圖C、E步驟都加入蒸餾水,但其目的不同,分別是和。 (3)上圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過的,該步驟的目的是 。 (4)為鑒定A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可滴加試劑后沸水浴,如果出現(xiàn)則證明該絲狀物的主要成分為DNA。 解析:(1)圖中A步驟為往含DNA的濃NaCl溶液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,目的是提取較純凈的DNA。B步驟為單層紗布過濾,目的是獲得含DNA的濾液。C步驟為往雞血細(xì)胞液中添加蒸餾水,目的是破碎細(xì)胞,釋放核物質(zhì)。D步驟為往物質(zhì)的量濃度為2 mol/L NaCl溶液中加入DNA絲狀物,目的是溶解DNA。E步驟為往DNA濃NaCl溶液中加入蒸餾水,目的是降低NaCl溶液的濃度,析出DNA。根據(jù)DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)流程:破碎細(xì)胞(釋放DNA)過濾溶解核內(nèi)DNA過濾析出DNA過濾DNA再溶解提取含雜質(zhì)較少的DNA?？梢耘袛嗾_的操作順序?yàn)镃BEDA。(2)C步驟為往雞血細(xì)胞液中添加蒸餾水,目的是破碎細(xì)胞,釋放核物質(zhì)。E步驟為往含DNA的濃NaCl溶液中加入蒸餾水,目的是降低NaCl溶液的濃度,析出DNA。(3)A步驟為往含DNA的濃NaCl溶液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液,目的是提取較純凈的DNA。因?yàn)镈NA在冷卻的酒精溶液中溶解度更低,因此需要將酒精溶液充分預(yù)冷后使用。(4)鑒定DNA可以利用二苯胺試劑,DNA與該試劑在沸水浴的條件下變藍(lán)色。答案:(1)CBEDA(2)加速細(xì)胞的破裂降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出(3)充分預(yù)冷提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA(4)二苯胺藍(lán)色8某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,具體步驟如下。材料處理:稱取新鮮的菜花、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20 、另一組置于-20 條件下保存24 h。DNA粗提取:第一步,將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL 研磨液,充分研磨,用兩層紗布過濾,取濾液備用;第二步,先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上;第三步,取6支試管,分別加入等量的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L 的NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表:材料保存溫度/菜花辣椒蒜黃20+-20+(注:“+”越多表示藍(lán)色越深)分析上述實(shí)驗(yàn)過程,回答下列問題。(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是 。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了防止 。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。結(jié)論1:與20 相比,相同實(shí)驗(yàn)材料在-20 條件下保存,DNA的提取量較多。結(jié)論2: 。 針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉? 。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是  , 然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析:(1)分析表格可知,實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔骄坎牧虾捅４鏈囟葘NA提取量的影響。(2)DNA分子為鏈狀,很容易斷裂,所以應(yīng)緩緩地向一個(gè)方向攪拌。(3)分析表格可看出,同種材料在-20 時(shí)DNA提取量較多,不同材料在同種溫度下保存時(shí),蒜黃的DNA提取量最多。低溫下酶活性較低,DNA降解慢。(4)根據(jù)題意,可用氯仿將DNA溶液中的蛋白質(zhì)析出,進(jìn)一步提高DNA的純度。答案:(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時(shí)間,吸取上清液