生物 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 新人教版選修1
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生物 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 新人教版選修1
專題專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)課題課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段片段項(xiàng)目項(xiàng)目DNA復(fù)制復(fù)制PCR擴(kuò)增擴(kuò)增不同點(diǎn)不同點(diǎn)時(shí)期時(shí)期細(xì)胞有絲分裂細(xì)胞有絲分裂間期和減數(shù)第間期和減數(shù)第一次分裂前的一次分裂前的間期間期體外隨時(shí)進(jìn)行體外隨時(shí)進(jìn)行場(chǎng)所場(chǎng)所活細(xì)胞內(nèi)活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞外細(xì)胞外酶酶解旋酶、解旋酶、DNA聚合酶聚合酶耐高溫的耐高溫的DNA聚合酶聚合酶(Taq DNA聚合酶聚合酶)不同點(diǎn)不同點(diǎn)是否是否有有RNA轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄伴有伴有RNA轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生引物產(chǎn)生引物無無RNA轉(zhuǎn)錄,需轉(zhuǎn)錄,需加入兩種引物加入兩種引物特點(diǎn)特點(diǎn)邊解旋邊復(fù)制,邊解旋邊復(fù)制,半保留復(fù)制半保留復(fù)制體外迅速擴(kuò)增體外迅速擴(kuò)增是否需是否需緩沖液緩沖液不需緩沖液不需緩沖液嚴(yán)格配制嚴(yán)格配制10倍濃倍濃縮擴(kuò)增緩沖液縮擴(kuò)增緩沖液設(shè)備設(shè)備無無嚴(yán)格控制溫度變嚴(yán)格控制溫度變化的溫控設(shè)備化的溫控設(shè)備相同點(diǎn)相同點(diǎn)原料原料4種脫氧核苷酸種脫氧核苷酸(A、G、C、T)復(fù)制復(fù)制原理原理嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,半保留復(fù)制半保留復(fù)制模板模板以以DNA母鏈為模板母鏈為模板引物引物都需要分別與兩條模板鏈相結(jié)都需要分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物合的兩種引物