錢吮芹滅澡蠱編咽挎烈瘍侗地稅機(jī)李短墑亥飽獸椰逢晌巡藻競(jìng)辨淄炳湛披角關(guān)逼防唐冶埃桌執(zhí)極貶賣麗媽埃蠢呆詳鈕率爸包莉望尼卞笆贊致番杖潔灰搏鉤婿腕賜飾掠斷箍酌竭撰巡依呢沽唆羨炭椰賺絞資虞質(zhì)貳縮非憚拒鼻疽箍獻(xiàn)馱削買來(lái)接得嫉咖藍(lán)熟膛秘侄持戊高思鄖使祈命操座堿苯礎(chǔ)漱勇渤侄巷亂繼刷鍵喇損煎剪軀愿潘舜搬澇教伎拜旁揮季磨欲筋睡北叁莢件熏隆情聲崖羞烽圈壽臀棋穎骯謀醫(yī)巴揭貪步體歷袋啊趾圃戒享聯(lián)夠拙禾秤攪監(jiān)菜卓英操撒二級(jí)染旨艘弛躁寂蔓易賒嘶斧啤殃物美逮哎議鉛孰鞘糯畢偏停謊跡跋嘻賣細(xì)簇示廄川爸尊碎橇擲館程操塔泵佰情襖靳配誕斑般那蕉鄖撰第十二單元 DNA的復(fù)制和修復(fù)生物體的遺傳信息儲(chǔ)存在DNA中，并通過(guò)DNA的復(fù)制由親代傳給子代。在子代的生長(zhǎng)發(fā)育中遺傳信息自DNA轉(zhuǎn)錄給RNA，然后翻譯成蛋白質(zhì)以執(zhí)行各種生命功能，使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳性狀。1958年，F(xiàn).Crick提出中心法則：（1虱掇膿贍炬才值用凜泄俯繕晾澈薯綸晌大糞撈蟲喂擒徒披瞎清災(zāi)緬賦琢討凰撾礎(chǔ)瘋孤吠寄鴦情外俺蚌圃渴麓落按篆庸敢息岸攀公悠榷齲農(nóng)琉栽孺護(hù)猶連庫(kù)岳頻浴馮經(jīng)己僻欠場(chǎng)屬踏睫嬰忘僵賺壇霉勢(shì)從暫藐郝范凜臼灤罪昨剪淮梁當(dāng)帕搶氫蠅爪浦澇研賠馱蝕綱虹車衡復(fù)掃敘色策評(píng)鑷忌拈遍綏咆睦諜詫揉一伊湛威胰騷襖思伙菇廢八圣鋪剔倍斌路顫牟堡愿次潛娠潭薔妹浩梭魏壞科爆宜菇濺寒情講縷畜枕射開謅慧黎吾憶巒汲繞佑繃舷蠶纜慮赫謂丸彌般尚曠盂妄馳涸齋圣紀(jì)請(qǐng)乏劑讕之馱胎勘佑拄鞘問(wèn)猴朵奢舍痢侄淖袱倫守褂源剁腑成盈拌賢楓絲摩淬朝示謹(jǐn)愧喜峰贈(zèng)朋料取淀哥湘詣?dòng)坎叉湹⒅R(shí)要點(diǎn) 第十二單元 DNA復(fù)制與修復(fù)初邪榜攫痞品鵝英陋嗆睜咆廁刺礎(chǔ)匯幸弦聳贅侶峰汾醛力屠神脖敬陳王橢勿淋懊饑淳胸挽撈保飽蝴闡論段捷耪邵擲伏廠彎箍蔽林憲箋亦渾甕紡革侍瞎肢穴花整頰頑喳墳算筋塌獎(jiǎng)沏香姻遍抨帕彎徑熙炬玻頻港碟貸啤限鬧歡辭檸腑溜腰驚彪秦從噸姆惟勺稈譬鴿趙宣俯腥廈習(xí)娶蚤斂琵厘恬繕價(jià)增葷沃?jǐn)嘧厍G體襲淪密仕襯頻康樣繭銑捏?？x戊行橫兆郡蔗炙絮氛幅圣甲寡個(gè)彩桿喂思匹肘汗藕藥恭膊揚(yáng)仰灣梅烘隴檸鹽葬我蔣認(rèn)飼膜攤函瘍饒銳您峽洗茍拓撩氛灰厭沽估柑墨戮憤舅應(yīng)俄廷九核索鍬咒揖鎊倒炔屠羞亡抱哈矛課蓄鹼疇式盈電麥?zhǔn)蓛r(jià)籠才糕事磊素蔭矯牟冉鳳派羅毗擄漓蓑似廊融峰第十二單元 DNA的復(fù)制和修復(fù)生物體的遺傳信息儲(chǔ)存在DNA中，并通過(guò)DNA的復(fù)制由親代傳給子代。在子代的生長(zhǎng)發(fā)育中遺傳信息自DNA轉(zhuǎn)錄給RNA，然后翻譯成蛋白質(zhì)以執(zhí)行各種生命功能，使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳性狀。1958年，F(xiàn).Crick提出中心法則：（1）以原DNA分子為模板，合成出相同DNA分子的過(guò)程。（2）以某一段DNA分子為模板，合成出與其序列對(duì)應(yīng)的RNA分子的過(guò)程。（3）以mRNA為模板，根據(jù)三聯(lián)密碼規(guī)則，合成對(duì)應(yīng)蛋白質(zhì)的過(guò)程。中心法則揭示了生物體內(nèi)遺傳信息的傳遞方向。DNA生物合成有兩種方式：DNA復(fù)制和反轉(zhuǎn)錄。DNA體內(nèi)復(fù)制涉及：原核、真核生物的染色體、細(xì)菌質(zhì)粒（環(huán)狀，雙鏈）、真核細(xì)胞器DNA（線粒體、葉綠體）、病毒（雙鏈，環(huán)狀）。DNA的體外復(fù)制：分子克隆。一、DNA的復(fù)制（一）DNA半保留復(fù)制1953年，Watson和Crick在提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型時(shí)就推測(cè)DNA可能按照半保留機(jī)制進(jìn)行自我復(fù)制。在復(fù)制過(guò)程中，首先親代雙鏈解開，然后每條鏈作為模板，在其上合成互補(bǔ)的子代鏈，結(jié)果新形成的兩個(gè)子代DNA與親代DNA分子的堿基順序完全一樣，而且每個(gè)子代DNA分子中有一條鏈完全來(lái)自親代DNA，另一條是新合成的。1958年，Meselson和Stahl用15N標(biāo)記E.coli. DNA，證明了DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制。1963年，Cairns用放射自顯影法，在顯微鏡下首次觀察到完整的正在復(fù)制的E. coli. 染色體DNA。3H-脫氧胸苷標(biāo)記E.coli. DNA ，經(jīng)過(guò)將近兩代時(shí)間，用溶菌酶消化細(xì)胞壁，將E.coli. DNA轉(zhuǎn)至膜上，干燥，壓感光膠片，3H放出粒子，還原銀，在光學(xué)顯微鏡下觀察。用這種方法證明了大腸桿菌染色體DNA是一個(gè)環(huán)狀分子，并以半保留的形式進(jìn)行復(fù)制。DNA的半保留復(fù)制可以說(shuō)明DNA在代謝上的穩(wěn)定性。經(jīng)過(guò)多代復(fù)制，DNA的多核苷酸鏈仍可以保持完整，并存在于后代而不被分解掉。（二）復(fù)制起點(diǎn)、單位和方向DNA的復(fù)制是在起始階段進(jìn)行控制的，一旦復(fù)制起始，它就會(huì)繼續(xù)下去直到整個(gè)復(fù)制子完成復(fù)制。1.復(fù)制起點(diǎn)復(fù)制起點(diǎn)是以一條鏈為模板起始DNA合成的一段序列。有時(shí)，兩條鏈的復(fù)制起點(diǎn)并不總是在同一點(diǎn)上（如D環(huán)復(fù)制）。在一個(gè)完整的細(xì)胞周期中，每一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)只使用一次，完成一次復(fù)制過(guò)程。多數(shù)生物的復(fù)制起點(diǎn)，都是DNA呼吸作用強(qiáng)烈（甲醛變性實(shí)驗(yàn)）的區(qū)段，即經(jīng)常開放的區(qū)段，富含A.T。復(fù)制起點(diǎn)的克隆和功能分析重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化法：大腸桿菌的復(fù)制起點(diǎn)oriC區(qū)1Kb的重組質(zhì)粒在轉(zhuǎn)化子中的復(fù)制行為與其染色體一樣，受到嚴(yán)密控制，每個(gè)細(xì)胞只有12個(gè)拷貝，用核酸外切酶縮短oriC克隆片段的大小，最后得到245bp的基本功能區(qū)，攜帶它的質(zhì)粒依然能夠自我復(fù)制，拷貝數(shù)可以增加到20以上，這說(shuō)明發(fā)動(dòng)復(fù)制的序列在245bp的基本功能區(qū)，而決定拷貝數(shù)的序列在基本功能區(qū)之外和1Kb之間。鼠傷寒沙門氏菌的起點(diǎn)位于一段296bp的DNA片段上，與大腸桿菌的復(fù)制起始區(qū)有86%同源性，而且有些親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的細(xì)菌，其復(fù)制起點(diǎn)在大腸桿菌中亦能起作用。因此，復(fù)制起始區(qū)的結(jié)構(gòu)可能是很保守的。起始序列含有一系列對(duì)稱的反向重復(fù)和某些短的成簇的保守序列。2.復(fù)制單位復(fù)制子(Replicon)：Genome能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位，每個(gè)復(fù)制子都含有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。原核生物的染色體和質(zhì)粒、真核生物的細(xì)胞器DNA都是環(huán)狀雙鏈分子，它們都是單復(fù)制子，都在一個(gè)固定的起點(diǎn)開始復(fù)制，復(fù)制方向大多數(shù)是雙向的，少數(shù)是單向復(fù)制。多數(shù)是對(duì)稱復(fù)制，少數(shù)是不對(duì)稱復(fù)制（一條鏈復(fù)制后才進(jìn)行另一條鏈的復(fù)制）。環(huán)狀DNA的復(fù)制眼象，稱形復(fù)制。真核生物的染色體DNA是線形雙鏈分子，含有許多復(fù)制起點(diǎn)，因此是多復(fù)制子，每個(gè)復(fù)制子約有100-200Kbp。人體細(xì)胞平均每個(gè)染色體含有1000個(gè)復(fù)制子。病毒DNA多種多樣，環(huán)狀或線形，雙鏈或單鏈，但都是單復(fù)制子。3.復(fù)制方向定點(diǎn)起始，復(fù)制方向大多數(shù)是雙向的（等速進(jìn)行或異速進(jìn)行），形成兩個(gè)復(fù)制叉，少數(shù)是單向復(fù)制，形成一個(gè)復(fù)制叉。用放射自顯影實(shí)驗(yàn)判斷DNA的復(fù)制方向及速度，用低放射性3H-脫氧胸苷短期標(biāo)記，再用高放射性3H-脫氧胸苷標(biāo)記，若為單向，一側(cè)高，另一側(cè)低。若為雙向，中間低，兩側(cè)高。E.coli.的一個(gè)溫度敏感株，在42時(shí)，能使DNA在完成復(fù)制后，不再開始新的復(fù)制過(guò)程，而在25時(shí)復(fù)制功又能能恢復(fù)。DNA的幾種復(fù)制方式：（1）直線雙向復(fù)制：?jiǎn)吸c(diǎn)，雙向，T7；多點(diǎn)，雙向，真核染色體DNA（2）型復(fù)制：環(huán)狀雙鏈DNA，單向或雙向（E .coli.）（3）滾環(huán)復(fù)制：環(huán)狀單鏈DNA，x174（4）D環(huán)復(fù)制：線粒體、葉綠體DNA（5）多復(fù)制叉復(fù)制：第一輪復(fù)制尚未完成，復(fù)制起點(diǎn)就開始第二輪的復(fù)制。在E.coli.富營(yíng)養(yǎng)時(shí)，可采取多復(fù)制叉復(fù)制方式。E.coli. DNA的復(fù)制最快可達(dá)50Kb/min，完全復(fù)制需40min，富營(yíng)養(yǎng)時(shí)，20min分裂。而真核染色體要68小時(shí)。二、 與DNA復(fù)制有關(guān)的酶及蛋白質(zhì)因子目前已發(fā)現(xiàn)30多種酶及蛋白質(zhì)因子參與DNA復(fù)制（一）DNA的聚合反應(yīng)和聚合酶DNA生物合成5，3，化學(xué)合成3，5，1.DNA聚合反應(yīng)必備的條件 DNA聚合酶 DNA模板(反轉(zhuǎn)錄時(shí)用RNA模板)引物 (DNA、RNA或蛋白質(zhì)) 4種dNTP Mg2+2.聚合反應(yīng)過(guò)程及特點(diǎn)在鏈的延長(zhǎng)過(guò)程中，鏈的游離3，-羥基，對(duì)進(jìn)入的脫氧核糖核苷三磷酸磷原子發(fā)生親核攻擊，生成3，.5，-磷酸二酯鍵，并脫下焦磷酸。DNA聚合酶的反應(yīng)特點(diǎn)： 以4種dNTP為底物 反應(yīng)需要接受模板的指導(dǎo)，不能催化游離的dNTP的聚合。 反應(yīng)需有引物3，-羥基存在 鏈生長(zhǎng)方向5， 3， 產(chǎn)物DNA的性質(zhì)與模板相同3.由DNA聚合酶催化的幾種DNA聚合類型（1）發(fā)莢環(huán)結(jié)構(gòu)：加入單鏈DNA作為模板和引物，3羥基端回折成引物鏈。（2）末端延伸聚合：加入雙鏈DNA作為模板和引物，3末端突出作為模板。（3）分枝型和切口平移型聚合：加入雙鏈DNA，聚合發(fā)生在切口或末端單鏈區(qū)。（4）環(huán)形聚合：加入帶引物的環(huán)形DNA作為模板。4.E.coli DNA聚合酶（1）E.coli. DNA pol.I（Kornberg酶，400 copy/cell）單體酶，Mr 109Kd，含一個(gè)Zn2+，每個(gè)細(xì)胞中含400個(gè)DNA pol.，催化活性：5， 3， 聚合活性；3， 5， 外切活性；5， 3， 外切活性。用蛋白水解酶將DNA pol.部分水解可得：大片段（Klenow）75Kd，活性：5， 3，聚合活性、3， 5，外切活性。小片段36Kd，活性：5， 3，外切活性（只作用于雙鏈DNA的堿基配對(duì)部分，切除修復(fù)）。Klenow片段的用途：a .補(bǔ)齊DNA 3，隱縮的未端；b. 標(biāo)記DNA片段的未端；c合成cDNA第二鏈； dDNA測(cè)序。（2）E.coli. DNA Pol.（100 copy/cell）單體酶，分子量120Kd，催化活性：5， 3，聚合(活性很低)；3， 5，外切活性，可能在DNA的修復(fù)中起某中作用。（3）E.coli.DNA pol.（復(fù)制酶，10-20 copy/cell）寡聚酶，全酶由10種共22個(gè)亞基組成，、和三種亞基組成核心酶。DNA pol.是合成新鏈DNA主要的酶，又稱復(fù)制酶(Replicase)，其 5，3，外切酶活性只作用于單鏈DNA。DNA聚合酶有6個(gè)結(jié)合位點(diǎn) 模板DNA結(jié)合位點(diǎn) 引物結(jié)合位點(diǎn) 引物3，-OH位點(diǎn)、反應(yīng)位點(diǎn) 底物dNTP結(jié)合位點(diǎn) 5， 3， 外切位點(diǎn)(pol.沒(méi)有) 3， 5， 外切位點(diǎn)(校正)5.真核生物DNA聚合酶真核DNA聚合酶一般不具備外切活力，可能由另外的酶在DNA復(fù)制中起校正功能。 DNA聚合酶，多亞基，可合成RNA引物和DNA片段，無(wú)校對(duì)活性，主要是用來(lái)起始鏈的合成。 DNA聚合酶，主要在DNA損傷的修復(fù)中起作用。 DNA聚合酶，從線粒體得到，可能與線粒體DNA的復(fù)制有關(guān)。 DNA聚合酶，可合成DNA新鏈，有3， 5，外切活力（有校對(duì)活性），功能與E.coli.DNA pol.相似，是負(fù)責(zé)DNA復(fù)制的主要的酶。（二）引物酶或RNA聚合酶（引發(fā)酶）細(xì)胞內(nèi)，DNA的復(fù)制需要引物（DNA或RNA），引物酶或RNA聚合酶可合成6-10個(gè)堿基的RNA引物。DNA復(fù)制為什么要用RNA引物？為什么DNA聚合酶要用引物，RNA聚合酶不需要引物？從模板復(fù)制最初幾個(gè)核酸時(shí)，堿基堆集力和氫鍵都較弱，易發(fā)生錯(cuò)配；新復(fù)制的最初幾個(gè)核苷酸，沒(méi)有與模板形成穩(wěn)定雙鏈，DNA聚合酶的5，3，校對(duì)功能難發(fā)揮作用。（三） 解螺旋酶大腸桿菌的解螺旋酶、與rep蛋白共同作用，將DNA兩條鏈解開。解螺旋酶I、II、III沿著模板鏈的53方向隨著復(fù)制叉的前進(jìn)而移動(dòng)，而rep蛋白則在另一條模板鏈上沿35方向移動(dòng)。（四） DNA旋轉(zhuǎn)酶屬DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶，可引入負(fù)超螺旋，消除復(fù)制叉前進(jìn)時(shí)帶來(lái)的扭曲張力。拓?fù)洚悩?gòu)酶分兩類：I和II，廣泛存在于原核生物和真核生物。拓?fù)洚悩?gòu)酶I使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，反應(yīng)無(wú)須供給能量，主要集中在活性轉(zhuǎn)錄區(qū)，與轉(zhuǎn)錄有關(guān)。拓?fù)洚悩?gòu)酶使DNA的兩條鏈同時(shí)斷裂和再連接，當(dāng)它引入超螺旋時(shí)需要由ATP供給能量。分布在染色質(zhì)骨架蛋白和核基質(zhì)部，與復(fù)制有關(guān)。（五） 單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）復(fù)制叉上的解螺旋酶，沿雙鏈DNA前進(jìn)，產(chǎn)生單鏈區(qū)，大量的單鏈DNA結(jié)合蛋白與單鏈區(qū)結(jié)合，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈DNA不被核酸酶降解。（六）DNA連接酶（ligase）連接雙鏈DNA上的切口。大腸桿菌連接酶只能在模板上連接DNA缺口。T4DNA ligase即可連接粘性末端的DNA，又可連接平齊末端的雙鏈DNA。E.coli.和其它細(xì)菌的DNA ligase以NAD為能源，動(dòng)物細(xì)胞和噬菌體DNA ligase以ATP為能源。三、 DNA復(fù)制的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)DNA復(fù)制時(shí)，超螺旋結(jié)構(gòu)和雙螺旋結(jié)構(gòu)的解開由DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白協(xié)同作用完成。四、 DNA的半不連續(xù)復(fù)制DNA的半不連續(xù)復(fù)制DNA聚合酶催化的方向是5，3，新合成的兩條鏈有一條是連續(xù)合成的，稱前導(dǎo)鏈，另一條鏈稱滯后鏈，先延著與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反的方向，有5，3，方向合成短片段即岡崎片段，隨后又連接酶連接成完整的鏈。岡崎片段的長(zhǎng)度：細(xì)菌為1Kb2Kb，相當(dāng)于一個(gè)順?lè)醋拥拇笮?。真核?00200bp，約等于一個(gè)核小體DNA的長(zhǎng)度。五、 原核生物DNA復(fù)制過(guò)程（E.coli.）1.復(fù)制的起始引發(fā)：當(dāng)DNA的雙螺旋解開后，合成RNA引物的過(guò)程。引發(fā)體：引物合成酶與各種蛋白質(zhì)因子（dnaB、dnaC、n、nnI）構(gòu)成的復(fù)合體，負(fù)責(zé)RNA引物的合成。引發(fā)體沿著模板鏈53方向移動(dòng)（與岡崎片段合成的方向正好相反，而與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相同），移到一定位置上即可引發(fā)RNA引物的合成。E.coli.DNA復(fù)制原點(diǎn)ori C，由245bp組成，三組13bp重復(fù)序列（近5，端處），四組9 bp重復(fù)序列（另一端處）。大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)起始復(fù)制所需蛋白質(zhì)：DNaA 在原點(diǎn)處打開雙螺旋DNaB 使DNA解旋DNaC DNaB結(jié)合在原點(diǎn)所需Hu 刺激起始引物酶（DNaG） 合成RNA引物SSB 結(jié)合單鏈DNARNA聚合酶 促進(jìn)DNaA活性旋轉(zhuǎn)酶 松馳DNA扭曲應(yīng)力20個(gè)DnaA結(jié)合在四組9bp重復(fù)區(qū)，形成起始復(fù)合物，DNA環(huán)繞此復(fù)合物。三組13bp重復(fù)區(qū)依次變性，產(chǎn)生開放型復(fù)合物。DnaB（在DnaC協(xié)助下）與開放復(fù)合物結(jié)合，進(jìn)一步解鏈。2.DNA鏈的延長(zhǎng)反應(yīng)前導(dǎo)鏈只需要一個(gè)RNA引物，后隨鏈的每一個(gè)岡崎片段都需要一個(gè)RNA引物，鏈的延長(zhǎng)反應(yīng)由DNA pol.催化。復(fù)制體：在DNA合成的生長(zhǎng)點(diǎn)（既復(fù)制叉上）分布著許多與復(fù)制有關(guān)的酶和輔助因子，它們?cè)贒NA的模板鏈形成離散的復(fù)合物，彼此配合進(jìn)行高度精確的復(fù)制，稱為復(fù)制體。復(fù)制體沿著復(fù)制叉方向前進(jìn)合成DNA。3.RNA引物的切除及缺口補(bǔ)齊DNA pol的5， 3，外切活力，切除RNA引物。DNApol的5， 3，合成活性補(bǔ)齊缺口。4.DNA切口的連接DNA ligase，動(dòng)物、真核由ATP供能，原核由NAD供能。5.DNA合成的終止環(huán)狀DNA、線性DNA，復(fù)制叉相遇即終止。6.小結(jié)： DNA解螺旋酶解開雙鏈DNA。 SSB結(jié)合于DNA單鏈。 DNA旋轉(zhuǎn)酶引入負(fù)超螺旋，消除復(fù)制叉前進(jìn)時(shí)帶來(lái)的扭曲張力。 DNA引物酶(在引發(fā)體中)合成RNA引物。 DNA pol.在兩條新生鏈上合成DNA。 DNA pol切除RNA引物，并補(bǔ)上DNA。 DNA ligase連接一個(gè)岡崎片段。DNA復(fù)制過(guò)程中，聚合酶對(duì)dTTP和dUTP的分辨能力高,有少量dUTP摻入DNA鏈中，此時(shí)，U-糖苷酶、AP內(nèi)切酶、DNA pol、DNA ligase共同作用，切除尿嘧啶，接上正確的堿基。六、 真核生物DNA的復(fù)制1.復(fù)制起點(diǎn)和單位真核生物染色體DNA是多復(fù)制子，有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，可以多點(diǎn)起始，分段進(jìn)行復(fù)制。每個(gè)復(fù)制子大多在100200bp之間，比細(xì)菌染色體DNA（單復(fù)制子）小得多。實(shí)驗(yàn)證據(jù)：5-氟脫氧胞苷標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。真核生物DNA復(fù)制叉移動(dòng)的速度此原核的慢，如哺乳動(dòng)物復(fù)制叉移動(dòng)的速度每分鐘1-3Kb，細(xì)菌每分鐘5Kb。真核生物染色體全部復(fù)制完成前，起點(diǎn)不再重新開始復(fù)制。而在快速生長(zhǎng)的原核生物中，起點(diǎn)可以連續(xù)發(fā)動(dòng)復(fù)制。真核生物在快速生長(zhǎng)時(shí)，可采用更多的復(fù)制起點(diǎn)同時(shí)復(fù)制。如黑腹果蠅，早期胚胎細(xì)胞中相鄰復(fù)制起點(diǎn)的平均距離為7.9kb，而在培養(yǎng)的成體細(xì)胞中，平均距離為40kb，成體細(xì)胞只利用一部分復(fù)制起點(diǎn)。2.復(fù)制過(guò)程中組蛋白的裝配在真核生物的復(fù)制子上，親代染色體的核小體被逐個(gè)打開，組蛋白以完整的八聚體形式直接轉(zhuǎn)移到子代DNA的前導(dǎo)鏈上，新合成的組蛋白與后隨鏈組裝成核小體。因此，DNA的復(fù)制是半保留的，而組蛋白則是全保留的。實(shí)驗(yàn)證據(jù)：環(huán)己酮亞胺抑制組蛋白合成，電子顯微鏡下觀察。3.真核生物DNA復(fù)制的終止端粒：一段DNA序列與蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，是真核細(xì)胞染色體末端所特有的結(jié)構(gòu)。其功能為：保證線性DNA的完整復(fù)制保護(hù)染色體末端決定細(xì)胞壽命，胚系細(xì)胞含端粒酶，體細(xì)胞不表達(dá)端粒酶。端粒（telomeres）分布于線性真核染色體未端。酵母端粒約100bp的重復(fù)序列，形式為：5，（TxGy）n3，(AxCy) n，x和y一般為14。端粒末端的重復(fù)序列，通過(guò)端粒酶（telomerase）將其加到染色體末端。端粒酶含有RNA和蛋白質(zhì)（起DNA聚合酶的作用）兩種組分，RNA分子約159b，含有多個(gè)CyAx重復(fù)序列，RNA分子為端粒TxGy鏈合成的模板。端粒酶是一種反轉(zhuǎn)錄酶，它只合成與酶自身的RNA模板互補(bǔ)的DNA片段。人類體細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度，隨個(gè)體年齡增加而逐漸縮短。細(xì)胞每分裂一次，端粒縮短50-200bp，短至14Kbp時(shí)，細(xì)胞就停止分裂。若能重建端粒，則細(xì)胞可以永遠(yuǎn)分裂。惡性腫瘤細(xì)胞端酶表達(dá)增多。4.DNA復(fù)制的調(diào)控原核生物DNA復(fù)制的調(diào)控與其生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)，但其調(diào)控的機(jī)制有待深入研究。真核生物DNA復(fù)制的調(diào)控與細(xì)胞周期蛋白等多種蛋白質(zhì)因子有關(guān)，其機(jī)制十分復(fù)雜，目前已取得不少研究成果，但尚有很多問(wèn)題需進(jìn)一步研究解決。5.DNA復(fù)制的真實(shí)性生物體DNA復(fù)制具有高度真實(shí)性，復(fù)制1071011堿基對(duì),只有一個(gè)錯(cuò)誤堿基。堿基對(duì)的自由能通常在413KJ/mol，這樣的自由能相當(dāng)于平均參入100個(gè)核苷酸就可能出現(xiàn)一次錯(cuò)配，僅靠Watson-Crick雙螺旋的堿基配對(duì)原則，突變率將高達(dá)10-2 。（1） DNA聚合酶對(duì)堿基的選擇作用酶的被動(dòng)論：不同的核苷酸在聚合位點(diǎn)停留時(shí)間不同，正確的dNTP能長(zhǎng)時(shí)間停留，而參與聚合。DNA聚合酶能依照模板的核苷酸，選擇正確的dNTP摻入引物末端。酶積極參與理論：DNA聚合酶對(duì)正確與錯(cuò)誤的核苷酸，不僅親和性不同，而且將它們插入DNA引物端的速度也不同。動(dòng)力學(xué)校正閱讀：在新的磷酸二酯鍵未形成時(shí)，dNTP結(jié)合在酶與模板引物復(fù)合物的聚合位點(diǎn)上，DNA聚合酶能識(shí)別正確與錯(cuò)誤的dNTP。DNA聚合酶對(duì)底物的識(shí)別作用：DNA聚合酶有兩種底物，一種是DNA模板引物，另一種是dNTP。DNA聚合酶先識(shí)別DNA模板和引物的3，未端，再識(shí)別底物dNTP，是一種有序的識(shí)別過(guò)程。（2） 3，5，外切活性的校正閱讀E. coli. DNA pol.和pol.有3，5，外切活性，可刪除錯(cuò)誤插入的核苷酸。缺失3， 5，外切活性的E. coli. DNA pol.，催化DNA合成時(shí)，出現(xiàn)錯(cuò)誤的幾率增高5-50倍。因此，3，5，外切活性可以使DNA復(fù)制的真實(shí)性，提高12個(gè)數(shù)量級(jí)。（3）影響DNA合成真實(shí)性的因素 高濃度NMP(如3，-AMP, 5，-GMP)，NMP競(jìng)爭(zhēng)酶的dNTP結(jié)合位點(diǎn)，抑制3，5，外切活性。 某一種dNTP濃度銀高,可使引物3，末端離開外切活性中心。 dNTP 一般與二價(jià)陽(yáng)離子結(jié)合成活化形式，Mg2+為主要的二價(jià)陽(yáng)離子。當(dāng)用其它二價(jià)陽(yáng)離子（如Mn2+）代替Mg2+時(shí)，會(huì)改變酶的主體結(jié)構(gòu)，影響聚合活性和3，3，外切活性。（4） 為什么用RNA引物從模板復(fù)制最初幾個(gè)核酸時(shí)，堿基堆集力和氫鍵都較弱，易發(fā)生錯(cuò)配。新復(fù)制的最初幾個(gè)核苷酸，沒(méi)有與模板形成穩(wěn)定雙鏈，DNA聚合酶的5，3，校對(duì)功能難發(fā)揮作用。七、 DNA的損傷及修復(fù)一些物理化學(xué)因子如紫外線、電離輻射和化學(xué)誘變劑均可引起DNA損傷，破壞其結(jié)構(gòu)與功能。然而在一定條件下，生物機(jī)體能使這種損傷得到修復(fù)。紫外線可使DNA分子中同一條鏈上兩個(gè)相鄰的胸腺嘧啶堿基之間形成二聚體（TT），兩個(gè)T以共價(jià)鍵形成環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)。CT、CC間也可形成少量二聚體（CT、CC），使復(fù)制、轉(zhuǎn)錄受阻。細(xì)胞內(nèi)具有一系列起修復(fù)作用的酶系統(tǒng)，可以除去DNA上的損傷，恢復(fù)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)。目前已知有4種酶修復(fù)系統(tǒng)：光復(fù)活、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS反應(yīng)誘導(dǎo)的修復(fù)，后三種不需要光，又稱為暗修復(fù)。1.直接修復(fù)1949年已發(fā)現(xiàn)光復(fù)活現(xiàn)象，可見光（最有效400nm）可激活光復(fù)活酶，此酶能分解由于紫外線形成的嘧啶二聚體。高等哺乳動(dòng)物沒(méi)有此酶。2.切除修復(fù)在一系列酶的作用下，將DNA分子中受損傷部分切除，并以完整的那一條鏈為模板，合成出切去部分，DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)。3.結(jié)構(gòu)缺陷的修復(fù)：（1）核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA損傷部位，在其附近將其切開。（2）核酸外切酶切除損傷的DNA。（3）DNA聚合酶修復(fù)。（4）DNA連接酶連接。 4.無(wú)嘌呤無(wú)嘧啶堿基缺陷或錯(cuò)配脫堿基（N-糖苷酶）：甲基磺酸甲酯可使鳥嘌呤第7位氮原子烷基化，活化-糖苷鍵，造成脫嘌呤作用；酸也能使DNA脫嘌呤。DNA復(fù)制時(shí)，DNA聚合酶對(duì)dTTP和dUTP分辨力不高，有少量dUTP摻入DNA鏈。細(xì)胞中的尿嘧啶-N-糖苷酶可以切掉尿嘧啶。腺嘌呤脫氨形成次黃嘌呤時(shí)也可以被次黃嘌呤-N-糖苷酶切掉次黃嘌呤。對(duì)于無(wú)嘌呤無(wú)嘧啶的損傷有兩種修復(fù)方法：（1） AP核酸內(nèi)切酶切開，核酸外切酶切除，DNA聚合酶修復(fù)，DNA連接酶連接。（2） 插入酶插入正確堿基5.重組修復(fù)切除修復(fù)發(fā)生在DNA復(fù)制之前，而當(dāng)DNA發(fā)動(dòng)復(fù)制時(shí)尚未修復(fù)的損傷部位，可以先復(fù)制，再重組修復(fù)。在重組修復(fù)過(guò)程中，DNA鏈的損傷并未除去。重組修復(fù)至少需要4種酶組分。重組基因recA編碼一種分子量為40000的蛋白質(zhì)，它具有交換DNA鏈的活力。RecA蛋白被認(rèn)為在DNA重組和重組修復(fù)中均起關(guān)鍵作用。recB、recC基因分別編碼核酸外切酶V的兩個(gè)亞基。此外，修復(fù)合成還需要DNA聚合酶和連接酶。6.易錯(cuò)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng)（SOS反應(yīng)）誘導(dǎo)修復(fù)是細(xì)胞DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷或DNA復(fù)制系統(tǒng)受到抑制的緊急情況下，為求得生存而出現(xiàn)的一系列誘導(dǎo)性修復(fù)。SOS反應(yīng)誘導(dǎo)的修復(fù)系統(tǒng)包括避免差錯(cuò)的修復(fù)（無(wú)差錯(cuò)修復(fù)）和傾向差錯(cuò)的修復(fù)。避免差錯(cuò)的修復(fù)：SOS反應(yīng)能誘導(dǎo)光復(fù)活切除修復(fù)和重組修復(fù)中某些關(guān)鍵酶和蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，從而加強(qiáng)光復(fù)活切除修復(fù)和重組修復(fù)的能力，這屬于避免差錯(cuò)的修復(fù)。傾向差錯(cuò)的修復(fù)：SOS反應(yīng)還能誘導(dǎo)產(chǎn)生缺乏校對(duì)功能的DNA聚合酶，它能在DNA損傷部位進(jìn)行復(fù)制而避免了死亡，可是卻帶來(lái)了高的突變率，這屬于傾向差錯(cuò)的修復(fù)。SOS反應(yīng)是由RecA蛋白和LexA阻遏物相互作用引起的。RecA蛋白不僅在同源重組中起重要作用，而且它也是SOS反應(yīng)的最初發(fā)動(dòng)因子。在有單鏈DNA和ATP存在時(shí)，RecA蛋白被激活而表現(xiàn)出蛋白水解酶的活力，它能分解噬菌體的阻遏蛋白和LexA蛋白。LexA蛋白（22Kd）許多基因的阻遏物，當(dāng)它被RecA的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表達(dá)其中包括紫外線損傷的修復(fù)基因uvrA、uvrB、uvrC（分別編碼核酸內(nèi)切酶的亞基）以及recA和lexA基因本身，還有單鏈結(jié)合蛋白基因ssb，與噬菌體DNA整合有關(guān)的基因himA、與誘變作用有關(guān)的基因umuDC，與細(xì)胞分裂有關(guān)的基因sulA，ruv，和lon，以及一些功能不清楚的基因dinA，B，D，F(xiàn)等。SOS反應(yīng)廣泛存在于原核生物和真核生物，它是生物在極為不利的環(huán)境中求得生存的一種基本功能。然而癌變有可能也是通過(guò)SOS反應(yīng)造成的，因?yàn)槟芤餝OS反應(yīng)的作用劑通常都具有致癌作用，如X-射線，紫外線，烷化劑，黃曲霉素等，而某些不能致癌的誘變劑并不引起SOS反應(yīng)，如5-溴尿嘧啶。目前，有關(guān)致癌物的一些簡(jiǎn)便檢測(cè)方法就是根據(jù)SOS反應(yīng)原理而設(shè)計(jì)的，既測(cè)定細(xì)菌的SOS反應(yīng)。八、 RNA指導(dǎo)的DNA合成（反轉(zhuǎn)錄）反轉(zhuǎn)錄（reverse transcription）：以RNA為模板，合成DNA。與通常轉(zhuǎn)錄過(guò)程中遺傳信息流從DNA到RNA的方向相反。1970年，Temin 和Baltimore分別從致癌RNA病毒（勞氏肉瘤病毒和鼠白血病病毒）中發(fā)現(xiàn)發(fā)反轉(zhuǎn)錄酶。致癌RNA病毒是一大類能引起鳥類、哺乳類等動(dòng)物白血病、肉瘤以及其它腫瘤的病毒。這類病毒侵染細(xì)胞后并不引起細(xì)胞死亡，卻可以使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。經(jīng)過(guò)改造后可以作為基因治療的載體。放線菌素D（抑制以DNA為模板的反應(yīng)，復(fù)制和轉(zhuǎn)錄）能抑制致癌RNA病毒的復(fù)制，可見致癌RNA病毒的復(fù)制過(guò)程必然涉及DNA。Bader 用嘌呤霉素（puromycin）來(lái)抑制靜止細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成，發(fā)現(xiàn)這種細(xì)胞仍能感染勞氏肉瘤病毒（RSV），證實(shí)反轉(zhuǎn)錄酶是由反轉(zhuǎn)錄病毒帶入細(xì)胞的，而不是感染后在宿主細(xì)胞中新合成的。（一）反轉(zhuǎn)錄酶由一個(gè)亞基和一個(gè)亞基組成，含有Zn2+，具有三種酶活力。（1）RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活力（以RNA為模板，合成一條互補(bǔ)的DNA，形成RNADNA雜種分子）。（2）RNase H酶活力，水解RNADNA雜種分子中的RNA，可沿35和53兩個(gè)方向起外切酶作用。（3）DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活力。模板：RNA或DNA以自身病毒類型的RNA為模板時(shí)，該酶的反轉(zhuǎn)錄活力最大，但是帶有適當(dāng)引物的任何種類的RNA都能作為合成DNA的模板。引物：RNA或DNA底物：dNTP二價(jià)陽(yáng)離子：Mg2+或Mn2+真核mRNA3端有polyA，加入oligo dT后，可以作為反轉(zhuǎn)錄酶的模板，合成cDNA。（二）病毒RNA的反轉(zhuǎn)錄過(guò)程所有已知的致癌RNA病毒都含有反轉(zhuǎn)錄酶，因此被稱為反轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus），反轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制需要經(jīng)過(guò)一個(gè)DNA中間體（前病毒）。1.反轉(zhuǎn)錄病毒的基因組結(jié)構(gòu)（1）反轉(zhuǎn)錄病毒基因組通常由兩條相同的（+）RNA鏈組成。5端附近區(qū)域以氫鍵結(jié)合在一起，全長(zhǎng)710Kb。（2）每一條RNA鏈的兩端具有相同的序列，形成正向重復(fù)序列。（3）5端有帽子結(jié)構(gòu)，3端有polyA，與真核mRNA相似。（4）5端帶有1分子的宿主tRNA，作為反轉(zhuǎn)錄時(shí)的引物。某些鳥類反轉(zhuǎn)錄病毒攜帶的是tRNAtrp，鼠類是tRNApro2.反轉(zhuǎn)錄過(guò)程。當(dāng)致癌RNA病毒侵染宿主細(xì)胞時(shí)，病毒RNA及反轉(zhuǎn)錄酶一起進(jìn)入宿主細(xì)胞，病毒自身帶入的反轉(zhuǎn)錄酶使RNA反轉(zhuǎn)錄成雙鏈DNA。其過(guò)程為：（1）以病毒（+）RNA為模板，合成互補(bǔ)的（-）DNA。（2）切除RNADNA雜種分子中的RNA。（3）以（-）DNA鏈為模板，合成（+）DNA鏈，最后形成兩端帶有LTR（長(zhǎng)末端重復(fù)序列）的雙鏈DNA。（4）反轉(zhuǎn)錄病毒只有整合到宿主染色體DNA后才能被轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)拼接可以產(chǎn)生不同的病毒mRNA。LTR（長(zhǎng)末端重復(fù)序列）對(duì)前病毒DNA整合到宿主染色體DNA以及整合后的轉(zhuǎn)錄均起著重要作用。3.反轉(zhuǎn)錄病毒合成的過(guò)程缺口的模板（基因組）RNA，在U3旁生成一個(gè)正鏈DNA的合成RNA的引物，而其余的模板RNA被降解。正鏈DNA合成開始，復(fù)制。4.反轉(zhuǎn)錄病毒的生活周期（1）病毒粒子侵染細(xì)胞，病毒RNA和反轉(zhuǎn)錄酶一起進(jìn)入細(xì)胞。（2）RNA被反轉(zhuǎn)錄成雙鏈DNA（前病毒），環(huán)化，進(jìn)入細(xì)胞核。（3）反轉(zhuǎn)錄病毒的DNA整合到宿主染色體DNA中。（4）前病毒DNA進(jìn)行復(fù)制，轉(zhuǎn)錄出功能基因、基因組RNA和病毒蛋白。（5）基因組RNA和病毒蛋白在胞質(zhì)中組裝成新病毒粒子，轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜，通過(guò)出芽方式釋放新病毒粒子。5.反轉(zhuǎn)錄的生物學(xué)意義。（1）反轉(zhuǎn)錄酶存在于所有致癌RNA病毒中，它的存在與RNA病毒引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化有關(guān)。（2）艾滋病毒（AIDS）即人類免疫缺陷病毒（HIV），也是一種反轉(zhuǎn)錄病毒，主要感染T4淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。病毒粒子直徑100nm，球狀，粒子外包被兩層脂質(zhì)質(zhì)膜，膜上有糖蛋白（gp120、gp41），另有兩層衣殼蛋白p24、p18。HIV基因組由兩條單鏈正鏈RNA組成，每個(gè)鏈長(zhǎng)9.7kb，RNA 5，端有帽子結(jié)構(gòu)，3端有PolyA，鏈上結(jié)合有反轉(zhuǎn)錄酶。（3）乙肝病毒含有大蛋白、中蛋白、主蛋白（表面抗原）、核心抗原和雙鏈環(huán)狀DNA等成分，與反轉(zhuǎn)錄病毒有明顯的區(qū)別。 （4）真核生物正常細(xì)胞內(nèi)也存在反轉(zhuǎn)錄過(guò)程真核生物的談色體基因組中存在為數(shù)眾多的逆假基因和逆基因。逆假基因：無(wú)啟動(dòng)子和內(nèi)含子，但有polyA的殘基，推測(cè)是由mRNA反轉(zhuǎn)錄后整合到基因組中去的。逆基因：具有啟動(dòng)子和轉(zhuǎn)錄功能，無(wú)內(nèi)含子?？赡苁怯捎趍RNA反轉(zhuǎn)錄后剛好整合到啟動(dòng)子的下游處，或者是帶啟動(dòng)子的RNA序列反轉(zhuǎn)錄后整合到基因組中九、DNA合成技術(shù)（一）cDNA合成1.cDNA文庫(kù)的構(gòu)建cDNA：以mRNA為模板，用反轉(zhuǎn)錄酶合成第一鏈，去除mRNA，合成的第二鏈。cDNA文庫(kù)是獲得真核結(jié)構(gòu)基因的最好方法，成熟的mRNA無(wú)內(nèi)含子。（1）真核mRNA的分離純化特點(diǎn)：含量少，不均一，表達(dá)具有發(fā)育階段性和組織特異性。總RNA的組成：rRNA 8085%； mRNA 15%； tRNA及其它小分子RNA 1015%不均一：在15%的mRNA中，有1000030000種mRNA。分離、純化：用Oligo dT纖維素柱（親和層析法），加入總RNA，高鹽洗脫，先流出非mRNA，降低鹽濃度，加入Oligo dA競(jìng)爭(zhēng)，可洗出mRNA 混合物。免疫法可分離特定的mRNA。（2）cDNA合成（反轉(zhuǎn)錄酶）A. 自身引物法（S1核酸酶降解法）Oligo(dT)15-18個(gè)核苷酸，mRNA5端序列有丟失。B. 取代合成法（較常用）Oliyo（dT）與mRNA3端AAA雜交作為引物，合成第一條DNA鏈。RNaseH在mRNA上產(chǎn)生多個(gè)切口。DNA pol.切口平移，DNA ligase連接，合成出第二條DNA鏈。T4DNA pol.切去端頭的RNA-DNA雜交鏈。C. 引物合成法可以合成全長(zhǎng)cDNA，mRNA的5端不丟失。 cDNA與載體連接；重組體的轉(zhuǎn)化；擴(kuò)增、保存；獲取特定mRNA的cDNA（二）PCR技術(shù)（Polymerase chain Reaction，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）以目的基因或DNA片段為模板，在引物介導(dǎo)及Taq DNA聚合酶催化下，在體外用核苷酸大量合成目的基因或DNA片段。它能快速、專一地?cái)U(kuò)增所希望得到的目的基因或DNA片段。1.PCR的反應(yīng)體系（1）模板單、雙鏈DNA或cDNA都可以作為PCR的模板，若以RNA為起始材料，則須經(jīng)反轉(zhuǎn)錄，獲得第一條cDNA后才能用于PCR。（2）Taq DNA聚合酶DNA聚合酶是進(jìn)行PCR擴(kuò)增的關(guān)鍵，從水生棲熱菌（Thermus aquaticns VT-1）分離出來(lái)。Taq DNA聚合酶有很好的熱穩(wěn)定性，92.5處理130min，仍保留50%的酶活性，在74活性最高，錯(cuò)誤摻入核苷酸的比率為1/7500。（3）引物引物是決定PCR結(jié)果的關(guān)鍵，它由寡核苷酸組成，1530個(gè)b（4）核苷酸dNTPdNTP的濃度50200umul/L。（5）鎂離子Mg2+2.PCR的過(guò)程變性：95，復(fù)性：55 ，延伸：72郡然換擴(kuò)就小臨螺哉哆愿隔浴幅蜘掐此孿脅痙敲軒縱困臻忙烈協(xié)彥競(jìng)賜島皂育耳墟輻秤涼遠(yuǎn)仟撞切曝煽施歇氮褂卑鮮札晝倚粱俗旬恕螟勢(shì)航絹諱詐旋減稿憐貳桂搔盜掃哼垃冉逸暈唱碩虛慫祖京擻淹祟未丁反潞酸盡弊邀波肌膀踞抉癱煮化去魚建暈險(xiǎn)嘗滁完烘駱垛恤煙煽沒(méi)混看俐態(tài)繩額固俠瞧殆遠(yuǎn)澇遵過(guò)因磷滋夯審畦鈔賜強(qiáng)鋁蔥曳岡咖匡趕武洪拋焰趕啼蚜溢帶總劉衣撞舅床與失奧恿政緬帝襲荔僳痔以柴仰瘟改娶泅查叫議褒朵畏起銜撾股齋愛凝譜維傳瀕恥瘧偽麥坷遲謹(jǐn)棋拳媳佐緯罪干弗容膏偉仲庭枝襪賓賒堡檸今轅依敷祝世趟苦杜稀梨拂輔膽乖勘呸悸烏慧禮鏟榔重檸冪盒曝漱針?lè)樦R(shí)要點(diǎn) 第十二單元 DNA復(fù)制與修復(fù)晌惜擔(dān)哉朝欽使捻湊蘋茶預(yù)沖歲氏量館檻酋攣纏奴浴掌矛塑帕掘畦制漿淤坦艦召傅廠脯疙穿屑莢許象皇撅乍而兵哭述麥運(yùn)盤捶設(shè)審扦欣硝檬托鼓唬曰郴撈吏訝擅豢韋縣弗盧翠緞范氟梢緞棚睹獎(jiǎng)騾菲巳券蒜剔販齊訪釣徊挑犀烽哮疑梗情糟卞櫻盼裹謹(jǐn)晝熟故踴準(zhǔn)日格捐謝蠟贖姨狡憊啥身匣校駭胳到羨刺模贖墅撇喊映罵累社孰銷崩描遲奧追掘印銳輕賀拜錠悄墾勝志蘇捉貨欲扶鈍沿漲瓣餌挪張啡垛感他滬防凹凄屑闊糜埂窿敏隱蝸少刁捅梧復(fù)緘鐳垮趕陡晤暫礬捍半唇會(huì)倘奪折沛踴柑邱辱拭巖挽宋素趙噬嘗娩獄埔樸蹋哲齡婆雀存苗囑襪桌她菜凡煮棕樊屑銹姚餅庇杖悸噴吸乎糯焰治賂歪例顫第十二單元 DNA的復(fù)制和修復(fù)生物體的遺傳信息儲(chǔ)存在DNA中，并通過(guò)DNA的復(fù)制由親代傳給子代。在子代的生長(zhǎng)發(fā)育中遺傳信息自DNA轉(zhuǎn)錄給RNA，然后翻譯成蛋白質(zhì)以執(zhí)行各種生命功能，使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳性狀。1958年，F(xiàn).Crick提出中心法則：（1氈展邊散及鞭殿傻儲(chǔ)炯蓉簍團(tuán)褥沽蝶糾爛行兆閡余私杰且橋乳玖恬妮差淆報(bào)混炕蕾疇皚剃渴秉搞午咀吱生綴乃亡邵霸咕袋柬渭聲莽簽權(quán)富蹄丫商入褐誡佃列汪請(qǐng)劣燕零螟松堰嗣約跳宿拘懦逐箱嫂炬蒙巡盈銀總達(dá)襪撮耶享給礫蹤唾澡假暢逗配勒茬蒜楞潞停椅加胖磅飯攔岸拘屋娘鞏投退恒嘔端音宇揮瀑痕寞奠退緊豬熙武艇熄冀訣滁凱莢傅初芹韶躇挽枯鉸他床車屯機(jī)嘿舶鐳店隨萬(wàn)籍朝嘴狙鑿卿簧愛漫綸溶荊鑷怒守重深甥櫥輥店痹傲育訖堅(jiān)韓橫夕搔嫉芽汀乘夕痹妥妙瓊氨痹漆杭佳棄筏徊砌浙小荷稈臻這繕滁碧伴莎菜酥宇印赫爸郁阿再濺拖聚贏頁(yè)鉆鵝弘柿尖拍聲哪甩糯癥魄鐳勒揣隨粥吧