word2017屆 人教版 微生物培養(yǎng)與應(yīng)用單元測試1某學校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實驗室進展清掃和消毒處理，準備食用菌栽培所需的各種原料和用具；然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答如下問題：(1)對買回來的菌種進展擴大培養(yǎng)，首先需制備試管培養(yǎng)基，寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料：_、_、_、_、_。其中，提供氮源的是_。(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時各成分要有適宜的_。在燒杯中參加瓊脂后要不停地_，防止_。(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后將假如干個試管扎一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌，壓力_kPa，溫度_，時間_。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)_。(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意，先向鍋內(nèi)倒入_，把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時注意，接種環(huán)要在酒精燈_(填“內(nèi)或“外)焰滅菌，并且待接種環(huán)_后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近。將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長成菌落后放入_冰箱中保藏。解析：(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方為：牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂蒸餾水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL由配方即可知所需的原料；凡能為微生物生長提供所需氮(或碳)元素的物質(zhì)即為氮(或碳)源，牛肉膏、蛋白胨均含氮、碳元素。(2)在配制培養(yǎng)基時營養(yǎng)要協(xié)調(diào)，按培養(yǎng)的微生物對各種成分的需求來確定；在參加瓊脂后，要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂。(3)玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121條件下滅菌1530min。經(jīng)滅菌后的試管棉塞上沾有培養(yǎng)基后，易被雜菌污染，所以應(yīng)廢棄。(4)高壓蒸汽滅菌時，必須先參加水，待加熱至排出全部冷空氣后才能密閉高壓蒸汽滅菌鍋。(5)酒精燈外焰溫度高，滅菌效果好。接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后要先冷卻再蘸取菌種，否如此會燙死菌種，導致實驗失敗。答案：(1)牛肉膏蛋白胨蒸餾水NaCl瓊脂蛋白胨、牛肉膏(2)比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂(3)高壓蒸汽滅菌鍋1001211530min廢棄(4)適量水(5)外冷卻42有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。請分析回答如下問題：(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比擬單菌落周圍分解圈的大小。分解圈大，說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要某某驗操作應(yīng)在酒精燈_附近進展，以防止周圍環(huán)境中微生物的污染。解析：(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株，使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，通過控制碳源這種營養(yǎng)成分，來促進能高效降解原油的菌株的生長，抑制其他微生物的生長。(2)菌種純化培養(yǎng)時，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種。(3)當固體培養(yǎng)基上長出單菌落后，可通過比擬菌落周圍分解圈的大小，來判斷菌株降解原油能力的大小。一般來說，分解圈越大說明該菌株的降解能力越強，反之如此越弱。(4)實驗室培養(yǎng)微生物的過程中，常用灼燒滅菌法對接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進展滅菌；用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基、試管等進展滅菌；用干熱滅菌法對玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等進展滅菌。實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰旁進展，因為酒精燈火焰旁可形成一個無菌環(huán)境，可防止微生物的污染。答案：(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰3急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌、病毒通過消化道進入人體導致的。因此檢驗飲用水中細菌、病毒的量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答如下與檢驗飲用水有關(guān)的問題：(1)檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表進展培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為_。上圖所示的四種菌落分布中，不可能由該方法得到的是_。(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要對照組？_。為什么？_。(3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌：培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；玻璃棒、試管、燒瓶和吸管；實驗操作者的雙手。其中，需要消毒的是_，需要滅菌的是_。(4)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具有塞子的試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？_。解析：(1)平板劃線法所得菌落集中呈線狀，D的菌落分布情況可判斷為平板劃線法接種。(2)為判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格，本實驗需要對照。(3)消毒是指使用較溫和的物理或化學方法殺死物體外表或內(nèi)部的局部微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。對人的手不能進展滅菌。(4)根據(jù)題意，大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)生氣體，故可觀察有無氣泡產(chǎn)生來判斷大腸桿菌的有無。答案：(1)稀釋涂布平板法D(2)需要因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(3)(4)通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測水樣，再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37恒溫箱培養(yǎng)24h。假如試管內(nèi)有氣泡生成，如此說明水樣中有大腸桿菌，否如此，說明水樣中無大腸桿菌4(2016·某某聯(lián)考)無菌操作是微生物接種技術(shù)的關(guān)鍵；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物別離、純化、應(yīng)用過程與植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)過程中，均要無菌操作。回答如下相關(guān)問題：(1)消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一局部對人體有害的病原菌而對被消毒的物體根本無害。如下哪些事物適用于消毒處理_。皮膚飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀ABCD以上全部(2)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進展_，接種前要進展_，在整個微生物的別離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進展。(3)在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_。如圖是利用_法進展大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的外表。為達到這一目的，操作上應(yīng)注意：每次劃線前要_；冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃；首尾區(qū)_。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(5)利用培養(yǎng)基不僅可以別離培養(yǎng)大腸桿菌，也可以進展植物組織培養(yǎng)。與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要參加_。(6)有位同學在家制作泡菜時，為防止雜菌污染而向泡菜壇中參加了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是_。解析(1)題中皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油應(yīng)做消毒處理，注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀應(yīng)做滅菌處理。(2)配制培養(yǎng)基時，各種成分在溶化后分裝前必須進展調(diào)整pH，接種前要進展高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的別離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進展。(3)在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。進展平板劃線時應(yīng)每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，首尾區(qū)不連接。(4)接種前檢測培養(yǎng)基是否被污染的方法為將未接種(接種等量無菌水)的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(5)與大腸桿菌培養(yǎng)明顯不同的是，用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要參加植物激素(生長素和細胞分裂素)。(6)制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵，但乳酸菌對青霉素敏感，參加青霉素會導致乳酸菌死亡，使發(fā)酵失敗。答案(1)A(2)調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌(3)防止外來雜菌的入侵平板劃線灼燒接種環(huán)不連接(不重疊)(4)將未接種(接種等量無菌水)的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當時間(5)植物激素(或生長素和細胞分裂素)(6)青霉素殺死了乳酸菌5、研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。為了別離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進展如圖A所示的實驗。(1)配制好的培養(yǎng)基通?？梢允褂胈法滅菌。與步驟中培養(yǎng)基成分相比，步驟中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是_。(2)接種細菌常用的方法有_。假如經(jīng)過過程后獲得的結(jié)果為圖B所示，如此所操作方法如圖_所示。(3)步驟后取樣測定石油含量的目的是_。對步驟某瓶中細菌計數(shù)的方法有兩種，一種方法是_，其菌落數(shù)可代表活菌數(shù)；另一種方法是_，該方法需要借助一塊特殊的載玻片，其名稱為_。解析(1)培養(yǎng)基滅菌用高壓蒸汽滅菌法，為篩選出能分解石油的細菌，所以石油是唯一碳源。(2)接種細菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。圖B為平板劃線法獲得的結(jié)果，如此操作方法如圖甲所示。(3)步驟進一步操作是為了篩選出分解石油能力最好的細菌，微生物計數(shù)可用稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法(血細胞計數(shù)板計數(shù)法)。答案(1)高壓蒸汽滅菌石油是唯一碳源(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法甲(3)篩選出分解石油能力最好的細菌稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)(血細胞計數(shù)板計數(shù)法)血細胞計數(shù)板(血球計數(shù)板)6(2015·高考全國卷)微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：(1)顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通?？捎胈染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用_(填“萃取法或“水蒸氣蒸餾法)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進展培養(yǎng)。(3)假如要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用_直接計數(shù)；假如要測定其活菌數(shù)量，可選用_法進展計數(shù)。(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得一樣時間內(nèi)，在35、40、45溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，如此上述三個溫度中，_條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞_設(shè)計后續(xù)實驗。解析：此題主要考查了植物油脂的染色和提取方法、選擇培養(yǎng)基的配制、微生物的計數(shù)以與確定酶的最適溫度的實驗設(shè)計等。(1)脂肪可用蘇丹染液(或蘇丹染液)進展染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，不能用水蒸氣蒸餾法提取，應(yīng)用萃取法加以提取。(2)能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物種子的腐爛物的土壤中，為了選擇培養(yǎng)，固體培養(yǎng)基上應(yīng)以油脂作為唯一碳源。(3)測定培養(yǎng)液中的微生物的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)；而要測定活菌數(shù)，如此可利用稀釋涂布平板法進展計數(shù)。(4)酶量需要最多的溫度下，其酶活力最小，即酶活力最小的溫度應(yīng)為45。三個溫度下酶活力最大的溫度是40，但40不一定是該酶的最適溫度，故應(yīng)圍繞40設(shè)計后續(xù)實驗。答案：(1)蘇丹(或蘇丹)萃取法(2)油脂(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(4)45407(2014·高考新課標全國卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹑缦聠栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中參加剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中別離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分如表)：酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注：“表示有，“表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(填“能或“不能)用于別離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_(填“能或“不能)用于別離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。解析：(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認為它至少包括三種組分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響。用含有剛果紅的纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，由于纖維素被分解，紅色復(fù)合物無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂，為液體培養(yǎng)基，不能用于別離單菌落。含有纖維素和剛果紅(CR)的培養(yǎng)基可別離和鑒別纖維素分解菌。答案：(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于別離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌8(2014·高考新課標全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進展了細菌別離等工作?；卮鹑缦聠栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取假如干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1mL水樣稀釋100倍，；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法別離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次與以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一局部進展靜置培養(yǎng)，另一局部進展振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。解析：(1)取假如干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，可依據(jù)是否產(chǎn)生菌落確定培養(yǎng)基的滅菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式：(C÷V)×M知：1mL水樣中菌株數(shù)為()××104×107。(2)利用接種環(huán)接種時，接種環(huán)需灼燒滅菌。利用平板劃線法別離細菌時，在第二次與以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始，可以將聚集的菌體逐步稀釋以便得到單個菌落。(3)稀釋涂布平板法是用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基外表，故培養(yǎng)后產(chǎn)生的菌落應(yīng)隨機分布在培養(yǎng)基外表，即B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)液體培養(yǎng)基通過振蕩可提高溶氧量，同時使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，從而提高細菌的生長速度。答案：(1)×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)9(2013·高考新課標全國卷)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹑缦聠栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基外表，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋，用_法接種于固體培養(yǎng)基外表，在37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_。解析：此題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)將細菌接種到固體培養(yǎng)基上的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)由(1)獲取的致病菌單菌落，經(jīng)過適當稀釋，用涂布法接種至固體培養(yǎng)基外表進一步培養(yǎng)。(3)在檢測致病菌對抗生素的敏感性實驗中，假如含A種抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明周圍的致病菌死亡，該致病菌對A種抗生素敏感；假如含B種抗生素的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明致病菌對B種抗生素不敏感；假如含C種抗生素的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A的弱；假如含D種抗生素的濾紙片周圍透明圈也比含A的小，說明A、B、C、D四種抗生素的殺菌效果最顯著的為A。透明圈中出現(xiàn)的菌落為耐藥菌。(4)根據(jù)(3)中分析，為達到抗菌目的最好選用抗生素A。答案：(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A10(2014·高考某某卷，節(jié)選)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。別離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_四類，該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_。(2)純化菌株時，通常使用的劃線工具是_。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不連續(xù)地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_。(3)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是_，該實驗設(shè)計是否合理？為什么？_。解析：(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水、碳源、氮源和無機鹽；在培養(yǎng)基中參加苯磺隆作為唯一碳源，可將只能利用此碳源的菌種篩選出來。(2)純化菌株時，通常用接種環(huán)進展劃線操作；第二區(qū)域劃第一條線時，接種環(huán)灼燒后未冷卻，致使所劃第一條線上無菌落。假如第二次劃線未從第一區(qū)域末端開始，如此也會導致第二劃線區(qū)域第一條線上無菌落。(3)由圖乙可知本實驗的目的是探究能降解苯磺隆的物質(zhì)是否是該菌種所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。為使實驗設(shè)計更合理還需再設(shè)置一個對照組，將蛋白酶溶液改為等量的蒸餾水，其余設(shè)置不變。答案：(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理，缺少空白對照11(2016·某某模擬)回答如下微生物培養(yǎng)的問題：(1)如表是某培養(yǎng)液成分含量表，該培養(yǎng)液培養(yǎng)的微生物同化作用類型是_；假如用此培養(yǎng)液培養(yǎng)固氮微生物，如此應(yīng)除去的成分是_，應(yīng)參加的物質(zhì)是_。編號成分含量(NH4)HCO30.5 gKH2PO43.0 gCaSO40.5 gFeCl20.5 g維生素少許水1 000 mL(2)下表為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g100 mL牛肉膏、蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是提供_、_、_等營養(yǎng)。要用表中所給材料配制觀察細菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是_。表中各成分含量確定的原如此是_。培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進展的工作是_。從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌感染的方法是_、_、_等。(3)微生物接種的方法很多，最常用的是_和_。解析：(1)培養(yǎng)基中不含有機碳源，可判斷培養(yǎng)的生物同化類型為自養(yǎng)型；假如用此培養(yǎng)液培養(yǎng)固氮微生物，如此應(yīng)除去氮源(NH4)HCO3，但需參加有機物提供碳源。(2)根據(jù)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量配制培養(yǎng)基的成分，假如需觀察細菌菌落狀況需用固體培養(yǎng)基，還需添加瓊脂；微生物培養(yǎng)時需對培養(yǎng)基、接種工具進展無菌處理，并進展嚴格的無菌操作。(3)常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。答案：(1)自養(yǎng)型(NH4)HCO3(或)有機物(2)碳源氮源維生素(或磷酸鹽等)瓊脂(凝固劑)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌燒灼接種環(huán)酒精棉擦手(或棉塞塞試管口、在火焰旁接種)(3)平板劃線法稀釋涂布平板法12(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進展_(填“消毒或“滅菌)；操作者的雙手需進展清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。(3)假如用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、屢次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進展初步的_。(5)假如用大腸桿菌進展實驗，使用過的培養(yǎng)基與培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。解析：(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點，培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進展滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進展清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表，進展培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。(4)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征進展初步的鑒定。(5)因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，并可能導致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀，使用過的培養(yǎng)基與其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。答案：(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例適宜(4)鑒定(或分類)(5)滅菌13(2016·某某統(tǒng)考)人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染。土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源?，F(xiàn)對土壤中的這類細菌進展別離實驗，請回答如下問題：(1)別離培養(yǎng)細菌時必須進展無菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有_、_和_。(2)將樣液進展一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在_旁進展操作。接種后的培養(yǎng)皿進展_，并在37的_中培養(yǎng)。(3)用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。假如培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細菌，其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的_使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，明確該菌株利用尿素的能力_。(4)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)()A多B少C相等D幾乎為零解析：(2)微生物培養(yǎng)注意嚴格按照無菌操作步驟。為防止培養(yǎng)皿中水汽蒸騰凝在蓋子上再滴下來導致污染，所以將接種后的培養(yǎng)基倒置后再進展恒溫培養(yǎng)。(3)參加酚紅指示劑后在分解尿素細菌菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶，以鑒別細菌的分解能力，屬于鑒別培養(yǎng)基。(4)以尿素為氮源的培養(yǎng)基中僅分解尿素的細菌能存活，故菌落數(shù)較少。答案：(1)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌干熱滅菌(2)酒精燈火焰倒置恒溫培養(yǎng)箱(3)鑒別氨越強(4)B14從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣富集培養(yǎng)純種別離性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，再按一定的方法別離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從_環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待別離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而別離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇_的培養(yǎng)基，并在_條件下培養(yǎng)。(3)接種前要對培養(yǎng)基進展_處理。在整個微生物的別離和培養(yǎng)中，一定要注意在_條件下進展。(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是_，圖B效果的接種方法是_。一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_，應(yīng)當怎樣操作才可防止此種現(xiàn)象？_。(5)如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是_，應(yīng)該保持_(至少答兩項)等不變。解析：此題考查微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)與實驗過程的須知事項。(1)篩選菌種應(yīng)從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找，故培養(yǎng)嗜鹽菌應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件應(yīng)能促進目的菌的生長、繁殖。(3)微生物的別離與培養(yǎng)中必須保證無菌，包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。(4)純化培養(yǎng)中，接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，后一種方法形成的菌落分布較均勻，前一種方法形成的菌落分布不均勻，先劃線的局部菌落密集甚至相連，后劃線的局部菌落分布稀疏。(5)探究溫度對酶活性的影響時，溫度為自變量，酶活性為因變量，其他變量如底物和酶的用量、pH、反響時間等均為無關(guān)變量。答案：(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫(3)高壓蒸汽滅菌無菌(4)稀釋涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高增大稀釋倍數(shù)(或培養(yǎng)過程被雜菌污染嚴格無菌操作；或用接種環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒有滅菌每劃一個新的區(qū)域前都要對接種環(huán)進展滅菌處理)(原因與操作要對應(yīng))(5)溫度纖維素的量與濃度、反響時間、pH15(2016·某某統(tǒng)考)利用微生物分解淀粉生產(chǎn)糖漿具有廣闊的應(yīng)用前景。某研究所為了從長期種植馬鈴薯的土壤中別離出能夠高效分解淀粉的細菌，進展了如下實驗。請進一步完善實驗內(nèi)容并回答相關(guān)問題：(1)實驗步驟：配制以_為碳源的固體培養(yǎng)基，為了使培養(yǎng)基凝固成固體，應(yīng)該向培養(yǎng)基中參加的物質(zhì)是_。將土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)_和透明圈。將接種針用_法滅菌后，從中的培養(yǎng)基上挑取一定量細菌，接種至_(填“固體、“半固體或“液體)培養(yǎng)基，在恒溫搖床上培養(yǎng)24h，使細菌大量繁殖。取與培養(yǎng)基中一樣的成分與配比，并參加少量碘液，使制作的培養(yǎng)基呈藍紫色，滅菌并調(diào)節(jié)pH，用_法將過程所獲得大量繁殖的細菌接種到該培養(yǎng)基上。培養(yǎng)一段時間后，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化與其X圍的大小，周圍出現(xiàn)_的菌落即為初選菌落，經(jīng)進一步別離、純化后即可達到實驗?zāi)康摹?2)上述實驗步驟中，倒平板和接種的操作都應(yīng)在超凈臺上的_附近進展。(3)上述實驗步驟中，從用途看，所用培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基，和所用培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。解析：(1)欲篩選出能高效分解淀粉的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只有淀粉為唯一碳源，而無其他碳源；將土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)菌落和透明圈；為了防止雜菌的污染，接種過程中要進展無菌操作，如對接種針進展灼燒處理，從中的培養(yǎng)基上挑取一定量細菌，接種至液體培養(yǎng)基進展有氧發(fā)酵；用稀釋涂布平板法將過程所獲得大量繁殖的細菌接種到題中制作的培養(yǎng)基上；培養(yǎng)一段時間后，淀粉分解菌菌落周圍會出現(xiàn)透明圈。(2)整個實驗操作應(yīng)是無菌的，倒平板和接種的操作都應(yīng)在超凈臺上的酒精燈火焰附近進展。(3)從用途看，所用培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，和所用培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。答案：(1)淀粉瓊脂菌落灼燒液體稀釋涂布平板(涂布別離)較大透明圈(淺色X圍大)(2)酒精燈火焰(3)選擇鑒別(鑒定)16金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關(guān)問題：(1)按細胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于_生物，從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進展_呼吸。(2)7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分包括_，用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進展選擇培養(yǎng)的主要目的是_。(3)操作中在血平板上的接種方法是_，接種操作前后需要對接種工具進展_滅菌。(4)在制備血平板時需將pH調(diào)節(jié)至_(填“微酸性或“微堿性)后滅菌，待培養(yǎng)基_后，再參加適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于_培養(yǎng)基。(5)經(jīng)屢次規(guī)X操作、重復(fù)實驗，血平板上均出現(xiàn)_的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供給商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進展完善，完善的方案是_。解析：(1)金黃色葡萄球菌是一種細菌，屬于原核生物。培養(yǎng)過程無密閉處理，故它進展有氧呼吸。(2)7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供生長所需要的碳源、氮源、水和無機鹽。用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進展選擇培養(yǎng)是為了增加高度耐鹽性的金黃色葡萄球菌的數(shù)量。(3)圖示用的接種工具是接種環(huán)，說明在血平板上接種的方法是平板劃線法。接種工具在接種前后都要進展滅菌處理。(4)金黃色葡萄球菌的生長環(huán)境為弱堿性，培養(yǎng)基在滅菌前要先調(diào)節(jié)pH，因金黃色葡萄球菌能破壞紅細胞，使其褪色，血平板上出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，說明有金黃色葡萄球菌，故血平板是鑒別培養(yǎng)基。(5)為增強實驗結(jié)論的嚴謹性，應(yīng)增加空白對照組。答案：(1)原核有氧(2)碳源、氮源、水和無機鹽增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量(3)平板劃線法灼燒(4)微堿性冷卻鑒別(5)周圍存在透明圈設(shè)置不加鮮牛奶但其他操作均一樣的對照組17(2016·某某模擬)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以與微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下列圖。請分析回答如下問題：(1)培養(yǎng)基中參加化合物A的目的是_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌的代謝類型是_。(3)在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌的關(guān)鍵是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線的方法進展接種，此過程中所用的接種工具是_，操作時采用_滅菌的方法。(5)實驗完畢后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進展滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是_。(6)某同學計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌的總數(shù)，他選用104、105、106稀釋液進展平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是_，此對照實驗的目的是_。解析：(1)在選擇培養(yǎng)基中參加特定物質(zhì)，可以篩選出特定的細菌。(2)根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方，“目的菌生長所需的氮源和碳源只能來自培養(yǎng)基中的化合物A。異養(yǎng)需氧型細菌在培養(yǎng)時需要振蕩。(3)獲得純凈特定“目的菌的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。(4)平板劃線的方法進展接種，此過程中所用的接種工具是接種環(huán)，操作時一般采用灼燒滅菌。(5)為防止造成環(huán)境污染，實驗完畢后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進展滅菌處理才能倒掉。(6)計數(shù)目的菌數(shù)量時，注意設(shè)置一組不接種的空白培養(yǎng)基對照實驗，此對照實驗的目的是證明培養(yǎng)基制備過程中未被雜菌污染。答案：(1)篩選目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)防止外來雜菌入侵(4)接種環(huán)灼燒(5)防止造成環(huán)境污染(6)不接種的空白培養(yǎng)基證明培養(yǎng)基制備過程中無雜菌污染10 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