第三節(jié) 微生物學(xué)實驗室微生物,微生物學(xué)實驗室獲得性感染:指任何與微生物實驗室有關(guān)的感染. 感染源:該實驗室研究的對象微生物和實驗室環(huán)境微生物.,一 生境特征,(一)研究對象多具有感染性 1國際上對微生物危險性的分級尚無統(tǒng)一的標準，但根據(jù)微生物對實驗室人員的危害性和外逸出實驗室后的危害程度，多將微生物的危險性分為4級.,2 我國1級危險性微生物(與WHO的級相對應(yīng))，指對實驗室工作人員和外環(huán)境非常危險、實驗室感染機會多、感染后病情嚴重、無特效藥物治療、易致死的微生物，這類微生物也可能引發(fā)大的疫情。 因此，必須在特別實驗室中操作，實驗設(shè)施要求完善、規(guī)范；操作人員必須經(jīng)過專門訓(xùn)練并具有相應(yīng)工作經(jīng)驗和水平，同時需要接種疫苗防護。,3 我國2級危險性微生物(與WHO的級相對應(yīng))，指對實驗室工作人員和外環(huán)境有特殊危險、雖然有特異性免疫制劑和特效藥物治療但能引起嚴重感染并可能導(dǎo)致死亡，或本國、本地區(qū)原本沒有的致病微生物。對實驗室和操作人員的要求與1級水平相似，實驗人員需適當免疫。,4 我國3級危險性微生物(與WHO的級相對應(yīng))，指有潛在危險性的微生物，可能引起不同程度的疾病。應(yīng)由具有一定能力的技術(shù)人員在具有良好設(shè)備的普通實驗室或有一定條件的微生物學(xué)實驗室中操作，并有標準的防護措施。,5我國4級非致病性微生物(與WHO的I級相對應(yīng))，可在普通實驗室中、經(jīng)非專門訓(xùn)練過的人員操作，不需特殊的防護措施。,(二)廢棄物多具有感染性 隔離廢棄物(與隔離病人有關(guān)的廢棄物)、傳染性病原體的培養(yǎng)物和儲存物、人血和血檢材、病理性廢棄物、手術(shù)和尸檢污染性廢棄物、污染的實驗室廢棄物、污染的利器(皮下針頭、吸管、碎玻璃及手術(shù)刀片等)、污染的器具等。,(三)微生物學(xué)實驗室是具有污染性的危險環(huán)境 WHO(1979)根據(jù)微生物學(xué)實驗室對實驗室工作人員危害性的大小，將微生物學(xué)實驗室分為三種： 微生物學(xué)基礎(chǔ)實驗室 微生物學(xué)污染實驗室：對實驗室工作人員具有中等危險性，用于研究3級微生物。,微生物學(xué)高度污染實驗室：對實驗室工作人員及公眾具有特別的危險性，用于從事研究4級(A級)病原微生物。 (四)消毒，滅菌等方法不當?shù)倪x擇性壓力,二、微生物學(xué)實驗室微生物來源、種類、分布及其衛(wèi)生學(xué)意義,(一)微生物來源與途徑 1接種器材 接種環(huán)應(yīng)完全封閉、內(nèi)徑宜23um，以防止自發(fā)反彈或菌膜破裂而灑落細菌；環(huán)桿不得長于56cm，以防止顫動而灑落細菌,2移液管 3 離心管 4攪拌、混勻和震蕩 5開啟安瓿 6感染性物質(zhì)傾注 7來自實驗者的污染,( 二)種類及其衛(wèi)生學(xué)意義 1 Pike等作過三次很有意義的調(diào)查，位于前10位的微生物種類見表149。,2 各種類型微生物學(xué)實驗室的感染發(fā)生情況 科研單位最高 加強管理和人員培訓(xùn),(三)實驗室感染的危害性 1細菌類病原微生物 (1)布魯氏菌 傳播和感染發(fā)生主要是通過感染性氣溶膠的產(chǎn)生而導(dǎo)致的，其次是直接接觸導(dǎo)致感染。 美國密執(zhí)安州立大學(xué),(2)土拉弗氏菌 l912年在美國西部加利福尼亞州研究黃鼠鼠疫時首次分離出的，當時命名為土拉桿菌,該菌對低溫抵抗力強，在氣溶膠狀態(tài)下存活率較高，經(jīng)常發(fā)生實驗室感染。,(3) 結(jié)核桿菌 在美國Utah州，實驗室工作人員結(jié)核病的年發(fā)病率為0.31000(Jacobson，1985)。而Muller(1988)報告在德國、奧地利和瑞士的77個結(jié)核病實驗室中，工作人員的感染發(fā)病率為26.31000，這大約是普通人群發(fā)病率的100倍。,(4)衣原體 對實驗室工作人員有潛在危險的衣原體有鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體和沙眼衣原體。,(5) Q熱立克次體 對干燥環(huán)境有明顯的抵抗力,對人半數(shù)吸入感染劑量小,ID50為10個菌. Q熱立克次體感染主要來自于動物實驗室. (6)其他細菌 在美國，于1941年、1951年和1958年先后發(fā)生3次炭疽桿菌污染實驗室的空氣，導(dǎo)致工作人員吸人感染性氣溶膠而致病的病例。,2 病毒類病原體 (1)天花病毒 歐洲和北美發(fā)達國家都在20世紀50年代基本消滅了天花，但在6070年代，卻發(fā)生多起實驗室感染或醫(yī)院、實驗室外逸而傳播感染的事故。 1978年英國伯明翰大學(xué),(2)漢坦病毒 我國從19641988年先后發(fā)生20多例實驗室感染，分析可能是空氣傳播引起的吸人感染。 漢城大學(xué) 日本,三微生物學(xué)實驗室微生物學(xué)的檢測及其衛(wèi)生標準,1微生物學(xué)實驗室的空氣微生物學(xué)檢測及其衛(wèi)生標準 與室內(nèi)空氣微生物檢測及其衛(wèi)生標準基本相同,2微生物學(xué)實驗室的物體表面微生物學(xué)檢測及其衛(wèi)生標準 與公共場所微生物的檢測及其衛(wèi)生標準基本相同 3高壓蒸汽滅菌質(zhì)量控制 有化學(xué)方法和生物方法。,四微生物學(xué)實驗室微生物的污染及其預(yù)防,1 污染 (1)微生物氣溶膠經(jīng)呼吸道感染 (2)接觸感染,2 預(yù)防措施 (1)空氣的消毒 (2)物體表面的消毒,(3)技術(shù)操作環(huán)節(jié) 應(yīng)注意的技術(shù)操作過程主要有：注射、接種、混勻、研磨、移液、離心、傾倒、開封和搬運等.,(4)設(shè)施保障 1)實驗室建筑結(jié)構(gòu)與布局合理 根據(jù)研究對象的危害級別不同，也相應(yīng)將微生物學(xué)實驗室分為P1P4四個級別,2)裝備生物安全柜(biological safety cabinet，BSC) 根據(jù)實驗室的P級別和實驗要求的不同，有一級BSC。 I級氣流單向由外至內(nèi)，僅保護實驗者； 級分A、B兩型，氣流方向包括過濾的垂直氣流和操作口進入的氣幕流，外排氣體經(jīng)高效濾器過濾，此柜可以保護工作人員安全也可以保證試驗材料不受外面微生物的污染。,A型安全柜有70%的風(fēng)量在柜內(nèi)過濾循環(huán)，不能用于易燃物、化學(xué)毒物及有放射性物質(zhì)的操作。 B型柜設(shè)計為70%的風(fēng)量過濾后外排，因此可以用于某些化學(xué)毒物的試驗。 級生物安全柜為密閉型，進入和外排氣體都經(jīng)高效過濾，柜內(nèi)為負壓，通過特制的密封乳膠手套操作。,(5)制度保障 實驗室管理條例、進出實驗室程序要求、個人防護規(guī)則、技術(shù)操作規(guī)范等。,(6 )免疫接種和應(yīng)急措施保障 1）免疫接種,并建立醫(yī)療保障系統(tǒng)，負責(zé)實驗室工作人員的疫苗接種、日常疾病監(jiān)查、實驗事故病例的隔離、救治及醫(yī)療檔案的保存。 2）實驗室內(nèi)備常用的救急包，應(yīng)注意及時清點補充。急救藥物：消毒液、洗眼液、含漱消毒藥、抗毒素血清,3)患嚴重急性呼吸道疾病、懷孕早期（4個月以內(nèi)）、抵抗力下降、感染性增高或感染后會出現(xiàn)非常嚴重后果的工作人員，可暫不做病原微生物工作或調(diào)離強毒室。,第四節(jié) 極端環(huán)境中的微生物,在高溫、低溫、高酸、高堿、高鹽、高壓或高輻射、低營養(yǎng)等環(huán)境中，大部分微生物都不適宜生存，仍然有少數(shù)的微生物在頑強地生活著，這類微生物被稱為極端環(huán)境微生物或極端微生物。,一極端環(huán)境的生境特征,1高溫生境 如溫泉、陸地或海底火山附近、堆肥、家庭及工業(yè)上使用的熱水及冷卻水等。,2低溫生境 地球的南北極地區(qū)、冰窖、終年積雪的高山、深海和凍土地區(qū)均為低溫生境。 3高酸生境 指pH 5以下的生境。 4 高堿生境 一般指pH 9以上的生境。,5高鹽生境 指含2以上至接近飽和濃度NaCl的生境。 6高壓生境 在海洋深處以及深油井中還分布著一些嗜壓微生物，壓力達一千多個大氣壓，在常壓下它們卻是不能生存的。,