編制說(shuō)明項(xiàng)目名稱：動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)方法 項(xiàng)目編號(hào)： 內(nèi)質(zhì)監(jiān)標(biāo)函（2018）154號(hào)-107號(hào) 編制單位： 呼和浩特海關(guān) 編制時(shí)間： 2018.6-2019.12 一、 工作簡(jiǎn)況本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)關(guān)于下達(dá)2018年第一批內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知內(nèi)質(zhì)監(jiān)標(biāo)函（2018）154號(hào)，本標(biāo)準(zhǔn)是由呼和浩特海關(guān)提出并歸口，項(xiàng)目計(jì)劃編號(hào)為107號(hào)。呼和浩特海關(guān)牽頭成立由相關(guān)領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員和具有標(biāo)準(zhǔn)化專業(yè)知識(shí)的人員組成的標(biāo)準(zhǔn)起草組。起草組在充分調(diào)查研究、綜合分析和試驗(yàn)驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，起草標(biāo)準(zhǔn)初稿和編制說(shuō)明，并廣泛征求意見(jiàn)。對(duì)意見(jiàn)進(jìn)行匯總整理，修改完善標(biāo)準(zhǔn)初稿，形成地方標(biāo)準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿。第一起草單位：中華人民共和國(guó)呼和浩特海關(guān)；第二起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)；第三起草單位：鄂爾多斯市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心；第四起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院。主要起草人：趙治國(guó)、郭曉宇、張曉東、敖威華、王海艷、崔強(qiáng)、陳林軍、延涵、李軍燕、羅曉平。二、標(biāo)準(zhǔn)制定的背景及意義動(dòng)物墊料與動(dòng)物關(guān)系密切。近年來(lái)隨著生物科學(xué)研究的飛速發(fā)展，動(dòng)物作為其研究中不可缺少的重要組成部分，備受各國(guó)政府的重視和科學(xué)家的關(guān)注。墊料是為動(dòng)物營(yíng)造舒適的人工環(huán)境，進(jìn)行環(huán)境控制的基礎(chǔ)條件和必要材料，是對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生直接作用和影響的環(huán)境因素。動(dòng)物墊料與動(dòng)物健康、福利息息相關(guān)，同時(shí)也對(duì)養(yǎng)殖業(yè)、動(dòng)物及其相關(guān)科研方面甚至社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展有十分重大的影響。因此，墊料的質(zhì)量評(píng)定與控制非常必要。 我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)化、商品化尚處于初級(jí)階段。歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家早已實(shí)行墊料商品化生產(chǎn)，有專業(yè)的工廠，并且各道工序的質(zhì)量要求非常嚴(yán)格。但我國(guó)對(duì)動(dòng)物墊料的研究還處于初級(jí)階段，與墊料相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道甚少，墊料生產(chǎn)監(jiān)管環(huán)節(jié)薄弱，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)缺乏。近年來(lái)我國(guó)政府及從業(yè)人員逐漸認(rèn)識(shí)到動(dòng)物墊料中存在的問(wèn)題，開始對(duì)墊料質(zhì)量評(píng)價(jià)方面的問(wèn)題進(jìn)行改進(jìn)。因此要想使動(dòng)物的質(zhì)量管理與國(guó)際接軌，動(dòng)物墊料生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化就顯得至關(guān)重要。我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量管理相對(duì)滯后，影響相關(guān)行業(yè)發(fā)展。我國(guó)對(duì)動(dòng)物墊料的研究才剛剛起步，現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)管理?xiàng)l例中，對(duì)動(dòng)物墊料的標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)定幾乎空白，稀數(shù)資料對(duì)于墊料的規(guī)定只有：應(yīng)選用吸濕性好、塵埃少、無(wú)異味、無(wú)毒性、無(wú)油脂的材料；須經(jīng)消毒、滅菌后方可使用。如此籠統(tǒng)的規(guī)定在一定程度上制約了我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)不能緊跟國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)限制了藥品、生物制品、動(dòng)物等產(chǎn)品的出口，還使科研論文將不能被同行接受。因此要想提高相關(guān)學(xué)科競(jìng)爭(zhēng)力，就必須加強(qiáng)墊料標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量管理，從動(dòng)物墊料微生物指標(biāo)監(jiān)測(cè)入手。我國(guó)動(dòng)物墊料微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)幾乎空白，亟待建立相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。近年來(lái)，我國(guó)政府及從業(yè)人員逐漸認(rèn)識(shí)到動(dòng)物墊料對(duì)動(dòng)物健康及下游產(chǎn)業(yè)的重大意義，墊料相關(guān)研究報(bào)道逐年增多，積累了一定的理論基礎(chǔ)。但目前，我國(guó)尚未對(duì)國(guó)內(nèi)墊料質(zhì)量建立統(tǒng)一評(píng)價(jià)體系、風(fēng)險(xiǎn)分析、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及配套法規(guī)。其中，墊料中微生物特別是致病微生物的含量對(duì)動(dòng)物健康、福利和產(chǎn)品等影響重大，但目前動(dòng)物墊料中微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)屬于空白，亟待建立科學(xué)完善的動(dòng)物墊料微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，該工作將對(duì)國(guó)內(nèi)墊料建立統(tǒng)一質(zhì)量評(píng)價(jià)體系、風(fēng)險(xiǎn)分析及產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)等有力促進(jìn)。動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌對(duì)動(dòng)物的危害極大。動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是影響動(dòng)物健康和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的國(guó)際公認(rèn)的重要環(huán)境因素之一，因此動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)十分重要。該菌廣泛存在于自然界中，在4的環(huán)境中仍可生長(zhǎng)繁殖，已知牛、羊等40多種哺乳動(dòng)物與20多種禽類可被該菌感染，可從魚類、蜱類、蠅類及甲殼動(dòng)物分離該菌并可引起多種動(dòng)物發(fā)病，是反芻動(dòng)物腦炎及流產(chǎn)的常見(jiàn)原因。同樣，該菌對(duì)公共衛(wèi)生意義重大，WHO將其列為21世紀(jì)四大食源性致病菌之一。1%5%的正常人及10%20%的屠宰場(chǎng)工作人員為無(wú)癥狀腸道帶菌，病菌由消化道排出，廣泛污染泥土、水及周圍環(huán)境。該菌感染能引起人畜李斯特氏菌病，感染后主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多。2014年7月，國(guó)家風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心開展的單增李斯特氏菌(L. monocytogenes)感染病例監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，監(jiān)測(cè)病例數(shù)7534人，陽(yáng)性病例14人。建立動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，保障動(dòng)物健康急不可待。動(dòng)物墊料與動(dòng)物糞便直接接觸，容易滋生細(xì)菌，從而威脅動(dòng)物的健康與福利，并且對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展與國(guó)際間動(dòng)物及產(chǎn)品貿(mào)易帶來(lái)巨大的影響，甚至威脅到人類社會(huì)的生產(chǎn)與生活。但是對(duì)于動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)幾乎空白，還沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和方法，所以建立動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)已刻不容緩。本實(shí)驗(yàn)室具有多年微生物檢測(cè)的經(jīng)驗(yàn)，本方法的開發(fā)和應(yīng)用，在檢測(cè)技術(shù)方面填補(bǔ)我區(qū)的空白、彌補(bǔ)了自治區(qū)沒(méi)有現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的不足，能夠使動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)更加高效、準(zhǔn)確、安全。本方法的開發(fā)和應(yīng)用將會(huì)使我區(qū)在動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)先進(jìn)性方面達(dá)到國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平，為我區(qū)動(dòng)物墊料質(zhì)量安全管理部門更快更好的管控提供可靠保障。因此，加強(qiáng)動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)對(duì)確保全區(qū)農(nóng)業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。三、主要起草過(guò)程2018.06-2018.09 地標(biāo)前期基礎(chǔ)工作：收集動(dòng)物墊料樣本，查閱單核細(xì)胞增生李斯特氏菌資料，檢索單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)的相關(guān)文獻(xiàn)及標(biāo)準(zhǔn)。2018.10-2019.09 前期實(shí)驗(yàn)條件的摸索：包括前處理方法的優(yōu)化、對(duì)照，不同墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢出率，最終確定實(shí)驗(yàn)方案，編寫編制說(shuō)明。2019.10-2019.11 驗(yàn)證單位進(jìn)行驗(yàn)證。2019.12 編寫地標(biāo)并定初稿。四、現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)遵循GB/T 1.1-2009 標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫和GB/T 20001.4-2015 標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)則編寫。還參照相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編寫指南的要求。在編制本標(biāo)準(zhǔn)的過(guò)程中參考了以下標(biāo)準(zhǔn)：ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain-Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. Part 1: Detection method、 AOAC Official Method 993.12Listeria monocytogenes in Milk and Dairy Products、FDA Bacteriological Analytical ManualChapter 10Detection ofListeria monocytogenesin Foods and Environmental Samples, and Enumeration ofListeria monocytogenesin Foods、GB 14925-2010實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施、GB 4789.30-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)、GB/T 33682 基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒別微生物方法通則、GB/T 22429食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗(yàn) 酶聯(lián)免疫法、NY/T 1902-2010飼料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)。綜合參考了國(guó)內(nèi)外與單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，力求該標(biāo)準(zhǔn)能夠高效準(zhǔn)確的檢測(cè)墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，同時(shí)兼顧標(biāo)準(zhǔn)的廣泛應(yīng)用。本標(biāo)準(zhǔn)完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，不存在任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)相違背之處。相關(guān)強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)2項(xiàng)：GB 14925-2010 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施，本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備和環(huán)境的技術(shù)要求及檢測(cè)方法，同時(shí)規(guī)定了墊料、飲水和籠具的原則要求。但針對(duì)墊料該標(biāo)準(zhǔn)僅規(guī)定了“墊料的材質(zhì)應(yīng)符合動(dòng)物的健康和福利要求，應(yīng)滿足吸濕性好、塵埃少、無(wú)異味、無(wú)毒性、無(wú)油脂、耐高溫、耐高壓等條件；墊料必須經(jīng)滅菌處理后方可使用” 。GB 4789.30-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)。本地標(biāo)適用于墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，明確規(guī)定了不同類別墊料取樣方法，標(biāo)準(zhǔn)中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌鑒定過(guò)程增加了新的鑒定手段，確保檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。5、 主要內(nèi)容及檢測(cè)方法的確定5.1 取樣方法的確定及優(yōu)化根據(jù)動(dòng)物墊料的物理性狀將其分為顆粒狀/粉末狀墊料和平面狀墊料，針對(duì)不同性狀的墊料采取不同的取樣方法。5.1.1 顆粒狀或粉末墊料樣品取樣方法國(guó)內(nèi)外食品和飼料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)法中常用的取樣方法為稱取法，本標(biāo)準(zhǔn)中針對(duì)顆粒狀或粉末墊料樣品（木屑、玉米芯、秸稈、紙屑等）參考通用做法采用稱取25 g的方法進(jìn)行取樣。5.1.2 平面墊料樣品取樣方法針對(duì)平面墊料（膠墊、托盤等）采用表面涂抹取樣法，無(wú)菌操作將涂抹25 cm2-100 cm2平面樣品的棉拭子置入裝有 25 mL-100 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌容器中，混勻作為原液。5.2 稀釋液和培養(yǎng)基的選擇5.2.1 預(yù)增菌稀釋液的選擇國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)和資料中用到的預(yù)增菌稀釋液主要有：緩沖李斯特氏菌增菌肉湯(BLEB)、Fraser增菌肉湯、胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯（TSB-YE）、UVM肉湯、李氏增菌肉湯（LB）等液體培養(yǎng)基，除UVM肉湯抑制非目標(biāo)菌的作用稍差一點(diǎn)，其它幾種增菌液效果差異不明顯。墊料中營(yíng)養(yǎng)成分不豐富，存在的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌容易以亞損傷狀態(tài)存在，如果用抑菌作用太強(qiáng)的液體培養(yǎng)基進(jìn)行一步增菌，容易導(dǎo)致目標(biāo)菌死亡，因此，本方法選擇使用 Fraser肉湯基礎(chǔ)，分別添加了不同量的吖啶黃素、萘啶酮酸（具有抑菌作用）制成Half Fraser肉湯和Fraser肉湯，進(jìn)行2步液體增菌，同時(shí)抑制非目標(biāo)菌增殖。另外，該增菌液添加了七葉苷和檸檬酸鐵銨，李斯特氏菌可以水解七葉苷，與培養(yǎng)基中的鐵離子反應(yīng)，使培養(yǎng)基變黑，可直觀的從培養(yǎng)液的顏色就可以判斷是否有李斯特氏菌的生長(zhǎng)。5.2.2 分離培養(yǎng)基國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用的分離培養(yǎng)基為：牛津瓊脂（OXA）、PALCAM 瓊脂、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基和胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂（TSA-YE），前3種培養(yǎng)基均具有較好的選擇性，也是國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用的分離培養(yǎng)基，但單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在OXA瓊脂和顯色培養(yǎng)基上的形態(tài)更易識(shí)別，TSA-YE培養(yǎng)基常用于該菌純培養(yǎng)。因此，本標(biāo)準(zhǔn)選用OXA瓊脂和單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基用于分離培養(yǎng)，TSA-YE培養(yǎng)基用于純化培養(yǎng)。5.3 典型或可疑菌落的鑒定本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)典型或可疑菌落的鑒定過(guò)程，參考了國(guó)內(nèi)外單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和藥典等成熟做法，綜合了溶血試驗(yàn)、生化試驗(yàn)及輔助設(shè)備鑒定等必要鑒定過(guò)程，在傳統(tǒng)鑒定方法基礎(chǔ)上，將全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)鑒定法和飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定法增加到標(biāo)準(zhǔn)中，做到了與國(guó)際接軌，縮短檢測(cè)時(shí)間，增加檢測(cè)通量，提升檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率，減少檢測(cè)人員工作量。5.4 培養(yǎng)時(shí)間和溫度單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在4 45 均能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度30 37 ，國(guó)內(nèi)外多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)均采用30 1 預(yù)增菌，在36 1 進(jìn)行選擇性瓊脂平板培養(yǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)將繼續(xù)采用以上培養(yǎng)溫度對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌進(jìn)行檢測(cè)培養(yǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)各種培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間也與國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用時(shí)間相統(tǒng)一。5.5 其他 本標(biāo)準(zhǔn)增加了單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)過(guò)程中回避人員及相關(guān)生物安全措施，確保檢測(cè)工作中不造成人員感染，避免環(huán)境污染。六、方法驗(yàn)證為驗(yàn)證本方法的有效性和適用性，選擇5家不同行業(yè)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)本方法進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證內(nèi)容為方法的適用性、準(zhǔn)確度、檢出率及相關(guān)樣品的檢測(cè)，結(jié)果顯示該方法穩(wěn)定可靠，符合相關(guān)要求。七、結(jié)論綜上所述，本標(biāo)準(zhǔn)在制定過(guò)程中所涉及到的各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均經(jīng)過(guò)方法學(xué)的驗(yàn)證，并切實(shí)可行，完全達(dá)到了編制標(biāo)準(zhǔn)的要求。八、重大意見(jiàn)分歧的處理依據(jù)和結(jié)果未發(fā)生。九、國(guó)內(nèi)外情況簡(jiǎn)要說(shuō)明國(guó)內(nèi)尚沒(méi)有建立統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。檢索國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)1項(xiàng)和地方標(biāo)準(zhǔn)3項(xiàng)：GB 14925-2010 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施、江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T 2129-2012 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料、北京市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T 1126-2014實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料和河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/T 2547-2017實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道尚未發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古自治區(qū)內(nèi)有相關(guān)單位從事這項(xiàng)研究。10、 標(biāo)準(zhǔn)草稿征求意見(jiàn)情況匯總表序號(hào)意見(jiàn)提出單位/專家采納不采納（說(shuō)明原因）1建議在標(biāo)準(zhǔn)適當(dāng)位置增加“單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)流程圖”。包頭海關(guān)技術(shù)中心（原包頭出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/張鵬翔采納2建議將新型“飛行時(shí)間質(zhì)譜法”加入到標(biāo)準(zhǔn)。赤峰海關(guān)技術(shù)中心（原赤峰出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/曹旭采納3無(wú)修改建議。二連浩特海關(guān)技術(shù)中心（原二連浩特出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/楊帆4無(wú)修改建議。滿洲里海關(guān)技術(shù)中心（原滿洲里出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/楊東來(lái)參考文獻(xiàn)：1 GB/T 1.1-2009 標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則2 GB/T 20001.4-2015 標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)3 GB 14925-2010 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施4 GB 4789.30-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)5 SN/T 3872-2014 出口食品中四種致病菌檢測(cè)方法 MALDI-TOF-MS法6 SN/T 2552.12-2010 乳及乳制品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法 第12部分：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)與計(jì)數(shù)7 食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 阪崎腸桿菌和單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，DBS13/ 003-2015.8 NY/T 1902-2010 飼料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)9 DB32/T 2129-2012 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料10 DB11/T 1126-2014實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料11 ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain-Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp.12 AOAC Official Method 993.12 Listeria monocytogenes in milk and Dairy products.13 Bacteriological Analytical Manual Chapter 10, Detection ofListeria monocytogenesin Foods and Environmental Samples, and Enumeration ofListeria monocytogenesin Foods.