《高考生物考前3個(gè)月專(zhuān)題復(fù)習(xí) 專(zhuān)題11 生物技術(shù)實(shí)踐 考點(diǎn)33 微生物的利用及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高考生物考前3個(gè)月專(zhuān)題復(fù)習(xí) 專(zhuān)題11 生物技術(shù)實(shí)踐 考點(diǎn)33 微生物的利用及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用（12頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

專(zhuān)題11 生物技術(shù)實(shí)踐 [直擊考綱]　1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定。3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用。4.利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用。5.酶活力測(cè)定的一般原理和方法。6.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用。7.制備和應(yīng)用固相化酶。8.從生物材料中提取某些特定的成分。9.運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法。10.測(cè)定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì)。11.蛋白質(zhì)的提取和分離。 考點(diǎn)33　微生物的利用及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 題組一　微生物的利用 1．(2016全國(guó)乙，39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作無(wú)菌平板； ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于________________________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是________。 (2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是______________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法________(填“正確”或“不正確”)。 答案　(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂 (2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間 (3)污染　不正確 解析　(1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物，都可以作為氮源；平板為固體培養(yǎng)基，故需要加入凝固劑瓊脂。(2)實(shí)驗(yàn)探究的是教室內(nèi)“不同高度空氣”中微生物的分布，其中變量為不同高度，故需在不同高度下放置開(kāi)蓋平板。同時(shí)，為了保證單一變量，需要保證開(kāi)蓋放置時(shí)間一致。為了保證實(shí)驗(yàn)可靠性，需要設(shè)置多個(gè)平行組。(3)在完全正確的操作情況下，空白對(duì)照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落。若出現(xiàn)菌落，表明操作過(guò)程中存在雜菌污染，屬于實(shí)驗(yàn)失誤，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用。 2．(2016全國(guó)丙，39)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問(wèn)題： (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)M(jìn)行梯度稀釋的理由是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有________________和________________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出____________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20 ℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。 答案　(1)無(wú)菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落　(2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈　(3)甘油 解析　(1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)贿M(jìn)行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。(2)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的鑒別和分離；分離純化時(shí)應(yīng)挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在－20 ℃長(zhǎng)期保存時(shí)應(yīng)使用甘油管保藏法，故菌液中常需要加入一定量的甘油。 3．(2014新課標(biāo)全國(guó)Ⅱ，39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________________________；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_____________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是_________________ ________________________________________________________________________。 (3)在示意圖A和圖B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)___________的利用率。 答案　(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B　(4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 解析　(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380100＝3.8104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 000＝3.8107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康摹Ｔ诘诙渭耙院蟮膭澗€時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。 題組二　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 4．(2016全國(guó)甲，39)蘋(píng)果醋是以蘋(píng)果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的，回答下列問(wèn)題： (1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過(guò)程①和②是蘋(píng)果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的________________中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與____________試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過(guò)程③在酵母菌細(xì)胞的____________中進(jìn)行，與無(wú)氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度____________。 (2)第二階段是在醋酸菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，根據(jù)醋酸菌的呼吸作用類(lèi)型，該過(guò)程需要在________條件下才能完成。 (3)在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度________(填“低于”或“高于”)第二階段。 (4)醋酸菌屬于____________核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中__________(填“含有”或“不含有”)線粒體。 答案　(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)　重鉻酸鉀　線粒體　快 (2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 解析　(1)圖示中的過(guò)程①和②分別表示無(wú)氧呼吸的第一、第二階段，其場(chǎng)所均為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。過(guò)程③表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場(chǎng)所分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即在酵母菌細(xì)胞的線粒體中進(jìn)行。與無(wú)氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，需要在有氧條件下才能完成。(3)第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是18～25 ℃，第二階段即果醋的制作所控制的溫度范圍是30～35 ℃，所以第一階段的溫度低于第二階段。(4)醋酸菌屬于原核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復(fù)雜的細(xì)胞器。 5．(2013新課標(biāo)全國(guó)Ⅰ，39)回答下列有關(guān)泡菜制作的習(xí)題： (1)制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是__________。為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的目的是_______________________。 (2)泡菜制作過(guò)程中，乳酸發(fā)酵的過(guò)程即為乳酸菌進(jìn)行________________的過(guò)程。該過(guò)程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的______________中。 (3)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素有______、__________和__________等。 (4)從開(kāi)始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長(zhǎng)規(guī)律是________________________________，原因是__________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)殺滅雜菌　增加乳酸菌數(shù)量　(2)無(wú)氧呼吸　細(xì)胞質(zhì)　(3)溫度　腌制時(shí)間　食鹽用量　(4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少　乳酸菌比雜菌更為耐酸 解析　根據(jù)泡菜制作過(guò)程中乳酸菌的來(lái)源、呼吸類(lèi)型、呼吸產(chǎn)物所引起的環(huán)境變化回答相應(yīng)問(wèn)題，還要注意每步操作的目的以及一些相關(guān)物質(zhì)的變化。 1．微生物的培養(yǎng) (1)無(wú)菌技術(shù)：主要包括消毒和滅菌。 ①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 ②常用滅菌方法：灼燒滅菌——接種環(huán)、接種針等金屬器具；干熱滅菌——主要針對(duì)玻璃器皿等；高壓蒸汽滅菌——主要針對(duì)培養(yǎng)基等。 (2)如圖為倒平板操作過(guò)程，操作時(shí)要待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 制備固體培養(yǎng)基最后要將平板倒置，其主要目的是防止培養(yǎng)皿皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染。 (3)平板劃線操作 (4)稀釋涂布平板法：先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。如圖所示： 2．某種微生物的分離與計(jì)數(shù) (1)分離——選擇培養(yǎng)基 ①培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。 ②培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。 ③培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可以分離得到固氮微生物。 ④當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。 ⑤改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)能得到耐高溫的微生物。 (2)計(jì)數(shù) ①土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) a．篩選菌株：利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 b．計(jì)數(shù)方法：活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。前者為了增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性，需設(shè)置重復(fù)組，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 c．過(guò)程：土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。 ②分解纖維素的微生物的分離 a．實(shí)驗(yàn)原理 即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 b．流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落。 (3)鑒定方法 鑒定分解尿素的細(xì)菌 含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細(xì)菌→指示劑變紅，則該菌能分解尿素 鑒定纖維素分解菌 3.微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 項(xiàng)目 果酒和果醋的制作 腐乳制作 泡菜制作 作用菌類(lèi) 果酒：酵母菌 果醋：醋酸菌 毛霉 乳酸菌 原理 ①酵母菌在無(wú)氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇；②醋酸菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸 毛霉將蛋白質(zhì)、脂肪分解成小分子有機(jī)物 乳酸菌將糖轉(zhuǎn)化為乳酸 原料選擇 新鮮葡萄(或蘋(píng)果) 豆腐 大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜 實(shí)驗(yàn)流程 讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制 →裝壇→發(fā)酵→成品 操作注意事項(xiàng) ①材料選擇與處理；②防止發(fā)酵液污染，控制好發(fā)酵條件 ①材料用量；②防止雜菌污染；③控制溫度及酒精含量 ①泡菜壇的選擇；②腌制條件(無(wú)氧) 共同點(diǎn) 都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過(guò)程中代謝產(chǎn)物的作用或直接獲取代謝產(chǎn)物 考向一　微生物的培養(yǎng)、分離與選擇 1．(2016江蘇，25)漆酶屬于木質(zhì)降解酶類(lèi)，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是(多選)(　　) A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品 B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過(guò)劃線進(jìn)一步純化 D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株 答案　BC 解析　漆酶降解“木質(zhì)”，則漆酶菌株多存在于“木質(zhì)”豐富的場(chǎng)所，生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，A錯(cuò)誤；產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素，在篩選培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株，篩選時(shí)可通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落，B正確；在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過(guò)劃線進(jìn)一步純化，C正確；斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在低溫下長(zhǎng)期保存菌株，D錯(cuò)誤。 2．(2016四川，10)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以__________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加__________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周?chē)闹甘緞⒆兂蒧_______色。 (2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過(guò)程采取的接種方法是________________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較________。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_(kāi)_________，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含__________個(gè)氨基酸。 答案　(1)尿素　酚紅　紅　(2)稀釋涂布平板法　1.75　少　(3)UGA　115 解析　(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，使酚紅指示劑變紅色。(2)用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的接種方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為(156＋178＋191)/30.1105＝1.75108。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，故用此方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)偏少。(3)密碼子由三個(gè)相鄰的堿基組成，271個(gè)堿基和后面2個(gè)堿基一起共構(gòu)成91個(gè)密碼子，插入的70個(gè)核苷酸和后面2個(gè)堿基一起共構(gòu)成24個(gè)密碼子，緊隨其后是UGA，應(yīng)為終止密碼，翻譯結(jié)束，因此表達(dá)的蛋白質(zhì)含115個(gè)氨基酸。 3．(2014四川，10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。 (1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、________________四類(lèi)，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_____________________________ ________________________________________________________________________。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和________________，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成________保存?zhèn)溆谩? (3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有___________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_____________________，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？______________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽　只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖　(2)細(xì)胞分裂素　母液　(3)接種環(huán)?、俳臃N環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)　不合理，缺少空白對(duì)照 解析　(1)微生物生長(zhǎng)繁殖需要的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽四類(lèi)。根據(jù)題意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，該實(shí)驗(yàn)的目的是探索其降解機(jī)制，因此，需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故選擇培養(yǎng)時(shí)為了排除其他碳源的干擾，培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，用于調(diào)節(jié)植物細(xì)胞再分化；這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是無(wú)菌接種環(huán)。劃線的平板培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，而其他劃線上有菌落。造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端開(kāi)始。(4)根據(jù)圖乙所示實(shí)驗(yàn)中的上清液加入蛋白酶溶液推測(cè)，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄磕康木晔欠衲芊置诮到獗交锹〉牡鞍踪|(zhì)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對(duì)照。 考向二　傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 4．(2016江蘇，7)下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是(　　) A．加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分，利于毛霉生長(zhǎng) B．加料酒主要是為了滅菌，避免腐乳變質(zhì) C．發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的是乳酸桿菌 D．實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用 答案　D 解析　加鹽主要是為了抑制微生物生長(zhǎng)，防止豆腐腐敗變質(zhì)，A錯(cuò)誤；加料酒主要為了使腐乳具有獨(dú)特的香味，B錯(cuò)誤；發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的是毛霉，C錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳可能滅菌不徹底，不宜直接食用，D正確。 5．紅方是腐乳的一種。請(qǐng)回答與其制作有關(guān)的下列問(wèn)題： (1)補(bǔ)充制作紅方的實(shí)驗(yàn)流程：①__________________→②加鹽腌制→③______________→④密封腌制。 (2)在實(shí)驗(yàn)流程①中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應(yīng)控制在____________℃，并保持一定的________。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來(lái)自空氣中的______________。 (3)在實(shí)驗(yàn)流程②操作中，向長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時(shí)，鹽還能____________________________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。 (4)在實(shí)驗(yàn)流程③用到的輔料中，鹵湯是由________及各種__________配制而成的。此外，紅方因加入了______而呈深紅色。 答案　(1)豆腐上長(zhǎng)出毛霉　加鹵湯裝瓶 (2)15～18　濕度　毛霉孢子 (3)抑制微生物的生長(zhǎng) (4)酒　香辛料　紅曲 解析　(1)制作紅方的實(shí)驗(yàn)流程：①豆腐上長(zhǎng)出毛霉→②加鹽腌制→③加鹵湯裝瓶→④密封腌制。 (2)在實(shí)驗(yàn)流程①豆腐上長(zhǎng)出毛霉中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應(yīng)控制在15～18 ℃，并保持一定的濕度。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來(lái)自空氣中的毛霉孢子。 (3)在實(shí)驗(yàn)流程②加鹽腌制操作中，向長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時(shí)，鹽還能抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。 (4)在實(shí)驗(yàn)流程③加鹵湯裝瓶用到的輔料中，鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。此外，紅方因加入了紅曲而呈深紅色。 6．葡萄酒和葡萄醋深受人們的喜愛(ài)。請(qǐng)根據(jù)利用葡萄汁生產(chǎn)葡萄酒和葡萄醋的實(shí)驗(yàn)，回答下列問(wèn)題： (1)某實(shí)驗(yàn)小組嘗試使用罐頭瓶在常溫(213) ℃下制作葡萄酒。開(kāi)始時(shí)，向消過(guò)毒的罐頭瓶中加入新鮮的葡萄汁。葡萄汁裝入瓶中時(shí)，要留出大約的空間，酵母菌進(jìn)行呼吸作用的方式有________________________。在以后的過(guò)程中，每隔12 h左右，要將瓶蓋擰松一次(不是打開(kāi)瓶蓋)，此后再擰緊。擰緊瓶蓋時(shí)，酵母菌進(jìn)行呼吸作用方式的總反應(yīng)式是____________________________________________。 (2)從野生酵母菌群中分離純化酵母菌，常使用的接種方法是平板劃線法和_____________________兩種。若要想計(jì)數(shù)酵母菌活菌的個(gè)數(shù)，使所得的估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作和多次重復(fù)外，還應(yīng)經(jīng)過(guò)____________的過(guò)程，保證待測(cè)樣品的濃度比較合適。 (3)在果汁加工過(guò)程中，可添加______________________酶來(lái)提高出汁率和清澈度。葡萄的皮、子中含有原花青素、葡萄皮紅素和大量葡萄風(fēng)味物質(zhì)等，這些物質(zhì)易溶于乙醇和乙酸乙酯中，因此，常采用________的方法來(lái)分離提取。 (4)醋酸菌是生產(chǎn)葡萄醋必用的菌種，可以從食醋中分離得到純化的醋酸菌。擴(kuò)大培養(yǎng)醋酸菌時(shí)，為了防止培養(yǎng)皿皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基上造成污染，一般是等待平板冷卻凝固后將____________進(jìn)行培養(yǎng)。 (5)酵母菌和醋酸菌中，屬于原核生物的是____________。 答案　(1)有氧呼吸和無(wú)氧呼吸　C6H12O62CO2＋2C2H5OH＋能量 (2)稀釋涂布平板法　稀釋(或梯度稀釋) (3)纖維素酶、果膠　萃取 (4)平板倒置 (5)醋酸菌 解析　(1)酵母菌進(jìn)行呼吸作用的方式有有氧呼吸和無(wú)氧呼吸。擰緊瓶蓋，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸，總反應(yīng)式是：C6H12O62CO2＋2C2H5OH＋能量。 (2)從野生酵母菌群中分離純化酵母菌，常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種。若要想計(jì)數(shù)酵母菌活菌的個(gè)數(shù)，使所得的估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作和多次重復(fù)外，還應(yīng)經(jīng)過(guò)系列稀釋(或梯度稀釋)的過(guò)程，保證待測(cè)樣品的濃度比較合適。 (3)在果汁加工過(guò)程中，可添加纖維素酶、果膠酶來(lái)提高出汁率和清澈度。葡萄的皮、子中含有原花青素、葡萄皮紅素和大量葡萄風(fēng)味物質(zhì)等，這些物質(zhì)易溶于乙醇和乙酸乙酯中，因此，常采用萃取的方法來(lái)分離提取。 (4)擴(kuò)大培養(yǎng)醋酸菌時(shí)，為了防止培養(yǎng)皿皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基上造成污染，一般是等待平板冷卻凝固后將平板倒置進(jìn)行培養(yǎng)。 (5)醋酸菌是原核生物，酵母菌是真核生物。 7．生物技術(shù)在日常生活中應(yīng)用非常廣泛，回答下列與生物技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題： (1)泡菜不能急著吃，是因?yàn)榕莶酥谱鬟^(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，實(shí)驗(yàn)室常采用________法來(lái)檢測(cè)泡菜中亞硝酸鹽的含量，亞硝酸鹽在適宜條件下可以和相關(guān)試劑反應(yīng)生成__________色染料。 (2)各地制作腐乳的原料和菌種相同，但風(fēng)味迥異，主要是通過(guò)控制______________來(lái)實(shí)現(xiàn)的。 (3)制作果醋和葡萄糖酒使用的微生物在結(jié)構(gòu)上不同，主要是前者_(dá)______________。 答案　(1)比色　玫瑰紅　(2)發(fā)酵的條件　(3)無(wú)成形的細(xì)胞核或無(wú)核膜 解析　(1)實(shí)驗(yàn)室常采用比色法來(lái)檢測(cè)泡菜中亞硝酸鹽的含量，亞硝酸鹽在鹽酸酸化條件下可以和對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成玫瑰紅色染料。 (2)各地腐乳風(fēng)味迥異，在原料和菌種相同時(shí)，可通過(guò)控制發(fā)酵的條件制作出不同風(fēng)味的腐乳。 (3)制作果醋時(shí)使用的醋酸菌是原核生物，由原核細(xì)胞組成，沒(méi)有成形的細(xì)胞核；制作果酒時(shí)的菌種酵母菌為真核生物，由真核細(xì)胞組成，有成形的細(xì)胞核。