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2019-2020年高中生物同步培優(yōu)資料 微專題1 基因工程練習(xí) 新人教版選修3 1.基因工程利用某目的基因（圖甲）和P1噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA。限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點分別是BglⅡ、EcoR I和Sau3AI。下列分析錯誤的是（） A.構(gòu)建重組DNA時，可用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因和Pl噬菌體載體 B．構(gòu)建重組DNA時，可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌體載體 C.圖乙中的P1 噬菌體載體只用EcoR I切割后，含有2個游離的磷酸基團 D．用EcoR I切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA 2. PU和GATA為兩種蛋白質(zhì)，是細(xì)胞內(nèi)可以識別基因的特定序列，繼而激活相關(guān)基因的表達(dá)，由此推測，PU和GATA的結(jié)構(gòu)更接近下列蛋白質(zhì)中的（） A.限制酶 B．蛋白酶 C.淀粉酶 D. DNA連接酶 3．目的基因與運載體結(jié)合所需的條件是（） ①同一種限制酶②具有標(biāo)記基因的質(zhì)粒③RNA聚合酶④目的基因⑤DNA連接酶⑥四種脫氧核苷酸 ⑦ATP A．①②③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑥⑦ C.①②③④⑤ D.①②④⑤⑦ 4．下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是（） A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動物、植物或微生物 B.限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶及載體是基因工程中常用的工具酶 C.若檢測培育的抗蟲棉花是否成功，可用相應(yīng)的病菌侵染棉花植株 D．載體上的抗性基因有利于檢測目的基因是否插入到受體細(xì)胞的染色體上 5．限制性內(nèi)切酶的特點是（） A.只能識別GAATTC序列 B.識別特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位點 C.識別黏性末端 D．切割質(zhì)粒DNA的標(biāo)記基因 6.下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是（） A．質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器 B.質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子 C.質(zhì)粒只有在導(dǎo)入宿主細(xì)胞后才能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制 D．細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細(xì)胞外獨立進行的 7.基因工程技術(shù)也稱DNA重組技術(shù)，其實施必須具備的4個必要條件是（） A.工具酶、目的基因、載體、受體細(xì)胞 B．重組DNA,RNA聚合酶、限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶 C.模板DNA,信使RNA、質(zhì)粒、受體細(xì)胞 D.目的基因、限制性內(nèi)切酶、載體、受體細(xì)胞 8.下圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI,BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因。tetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動子,T為終止子，ori為復(fù)制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI,BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。 據(jù)圖回答： （1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 、 、 三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行 (2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 (3)目的基因表達(dá)時,RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是 ，其合成的產(chǎn)物是 (4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是 微專題1 基因工程 1．解析：選D。據(jù)圖可知，目的基因兩側(cè)和載體上都有三種限制酶的切割位點，但BglⅡ和Sau3A I可以同時使用，故A正確；由于目的基因兩側(cè)和載體上都有三種限制酶的切割位點,EcoR I可以與BglⅡ 或 Sau3A I同時使用，故B正確；若圖乙中的P1 噬菌體載體只用EcoRI 切割，可形成1個切口，含有2個游離的磷酸基團，故C正確；此時，可能形成目的基因-目的基因、目的基因-載體、載體-載體至少3種重組DNA，故D錯誤。 2.解析：選A。由于PU和GATA可以識別基因的特定序列，從這方面來分析，其結(jié)構(gòu)應(yīng)該接近限制酶，因為限制酶也能識別基因中特定的脫氧核苷酸序列，故A正確。 3．解析：選D。目的基因與運載體結(jié)合需要用同一種限制酶切割形成相同的黏性末端，然后用DNA連接酶將兩者連接，形成重組質(zhì)粒；常用的運載體是質(zhì)粒，質(zhì)粒必須符合一定的條件：有復(fù)制原點、有多個限制酶切割位點、有抗生素抗性基因或熒光標(biāo)記基因等；目的基因與運載體的結(jié)合需要消耗能量，直接來源是ATP。綜上所述，故D正確。 4.解析：選A?；蚬こ讨心康幕蚝褪荏w細(xì)胞均可來自動、植物或微生物，故A正確；常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，載體是基因工程的工具，不是工具酶，故B錯誤；若檢測抗蟲棉是否成功，可以讓害蟲進食棉花的葉片，觀察害蟲是否死亡，不是用病菌侵染，故C錯誤；載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，不能確定是否在染色體上，故D錯誤。 5．解析：選B。限制性內(nèi)切酶有很多種類，有的能識別序列GAATTC,有的能識別其他序列，A錯。但都能識別特定的序列，B對。有的能識別黏性末端，有的識別平末端，C錯。實驗中，一般不選擇切割標(biāo)記基因的酶，D錯。 6.解析：選B。質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子，不屬于細(xì)胞器，故A錯誤，B正確；質(zhì)粒是安全的，對受體細(xì)胞無害，并能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制，故C、D錯誤。 7.解析：選A?；蚬こ淌前凑杖藗兊囊庠福岩环N生物的個別基因（目的基因）復(fù)制出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞（受體細(xì)胞）里，定向地改造生物的遺傳性狀?；虿僮鞯墓ぞ呙甘窍拗菩詢?nèi)切酶和DNA連接酶，基因進入受體細(xì)胞的運輸工具是載體，故A正確。 8.解析：用同一種限制酶分別切質(zhì)粒和含有目的基因的DNA。會切出相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接后，會出現(xiàn)目的基因一載體連接物，載體一載體連接物、目的基因一目的基因連接物三種連接物，再通過篩選才能夠獲得目的基因一載體連接物。用EcoRI酶切時，切點在tetR四環(huán)素抗性基因中，破壞了質(zhì)粒中的四環(huán)素抗性基因，載體一載體連接物能夠使tetR 四環(huán)素抗性基因恢復(fù)完整，基因能夠表達(dá)，含有載體一載體連接物宿主細(xì)胞細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能夠正常生長。ampR 為青霉素抗性基因，存在于質(zhì)粒中，在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，并沒有被破壞，所以含有目的基因一載體連接物和載體一載體連接物的宿主細(xì)胞接種到青霉素的培養(yǎng)基中，能正常生長。P啟動子是基因結(jié)構(gòu)中RNA聚合酶的識別和結(jié)合位點，其作用是催化以DNA的一條鏈為模板，轉(zhuǎn)錄形成RNA的過程。用EcoRI和BamHI對目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體進行酶切，切出的末端不同，從而防止任意連接。 答案：（1）目的基因一載體連接物 載體一載體連接物 目的基因一目的基因連接物分離純化（其他合理答案也給分） （2）雷區(qū)體一載體連接物 目的基因一載體連接物、載體一載體連接物 (3)啟動子 mRNA (4)EcoRI和BamHI