2019-2020年高中生物 專題檢測 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(含解析)新人教版選修1.doc
《2019-2020年高中生物 專題檢測 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(含解析)新人教版選修1.doc》由會員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《2019-2020年高中生物 專題檢測 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(含解析)新人教版選修1.doc(13頁珍藏版)》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
2019-2020年高中生物 專題檢測 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)(含解析)新人教版選修1考查知識點及角度難度及題號基礎(chǔ)中檔稍難DNA的粗提取與鑒定1、2、6、13多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA3、45、14血紅蛋白的提取和分離7、8、9、1011、1215()。A聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是用DNA聚合酶在體外擴增DNA片段的技術(shù)B在用PCR技術(shù)擴增DNA時,DNA的復(fù)制過程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似CPCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中進行,只需提供:DNA模板以及四種脫氧核苷酸DPCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)分為變性、復(fù)性和延伸解析PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進行,需提供DNA模板,分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物,四種脫氧核苷酸,耐熱的DNA聚合酶,同時通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行。答案C4PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實際上也是一種能自動調(diào)控溫度的儀器,對PCR過程中“溫度的控制”的說法錯誤的是()。A酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈B延伸的溫度必須大于退火溫度,而小于變性溫度CDNA聚合酶不能熱變性,要用耐高溫的聚合酶DDNA解旋酶不能熱變性,為了確保模板是單鏈解析PCR是體外DNA擴增,DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開。在復(fù)性后,在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度。答案D5下圖表示DNA變性和復(fù)性過程,相關(guān)說法正確的是()。A向右的過程為加熱(80100 )變性的過程B向左的過程是DNA雙鏈迅速致冷復(fù)性C變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件、實質(zhì)都相同D圖中DNA片段共有4個游離的磷酸基、4個3端解析變性后的DNA在緩慢降溫后才會復(fù)性;變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件不同、實質(zhì)相同;任一DNA片段都有兩個游離的磷酸基(5端)和兩個3端。答案A6下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實驗的敘述,正確的有()。A提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水脹破細(xì)胞B用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C蛋白質(zhì)提取和分離過程中進行透析可去除溶液中的DNAD蛋白質(zhì)可以用電泳的方法進行分離純化,但DNA不可用該方法純化解析DNA也可用電泳法分離純化;透析只能除去小分子雜質(zhì)。答案B7下列有關(guān)蛋白質(zhì)的提取和分離的操作,其中排序正確的是()。A樣品處理、凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳B樣品處理、凝膠色譜操作、純化C樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定解析蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳為實驗操作過程中的技術(shù)。答案C8下列對在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作不正確的是()。A加樣前要使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊B讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動,貼壁加樣至色譜柱頂端,不要破壞凝膠面C打開下端出口,待樣品完全進入凝膠層后直接連接緩沖液洗脫瓶開始洗脫D待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,每5 mL收集一管,連續(xù)收集流出液解析待樣品完全進入凝膠層后,關(guān)閉下端出口,小心加入緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口,進行洗脫。答案C9在蛋白質(zhì)的提取和分離中,下列對樣品處理過程的分析正確的是()。A洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機鹽B洗滌時離心速度過小,時間過短,白細(xì)胞等會沉淀,達不到分離的結(jié)果C洗滌過程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的NaCl溶液(生理鹽水)D透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)解析洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中除血紅蛋白以外的雜蛋白;洗滌時離心速度過大,時間過長,白細(xì)胞等會沉淀,達不到分離的效果;洗滌過程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液(生理鹽水)。答案D10下列是有關(guān)血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作,其中正確的是()。A可采集豬血作為實驗材料B用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞C血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時間離心D洗脫液接近色譜柱底端時開始收集流出液解析為防止細(xì)胞吸水漲破,洗滌時要用生理鹽水;釋放出血紅蛋白后,以2 000 r/min進行高速離心;在分離時,要等到紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時開始收集流出液。答案A11(xx廣州模擬)蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是()。A根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性,可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等,可通過電泳分離蛋白質(zhì)C根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小,可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)解析蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜,而溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過半透膜,因此可以將蛋白質(zhì)和溶液中的小分子物質(zhì)分離。答案A12凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG75),其中G、75的含義分別是()。AG表示凝膠的使用量,75表示加75 g水BG表示凝膠的交聯(lián)程度,75表示需加熱75 CG表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示每克凝膠膨脹時吸水7.5 gDG表示凝膠的膨脹體積,75表示每克凝膠膨脹后體積可達75 cm3解析G表示凝膠交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸水7.5 g。答案C二、非選擇題(3小題,共40分)13(13分)DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,隨著NaCl溶液濃度的變化而變化。(1)下列NaCl溶液中能使DNA析出最徹底的一種是_;溶解度最高的一種是_。A質(zhì)量濃度為0.14 mol/L B質(zhì)量濃度為2 mol/LC質(zhì)量濃度為0.15 mol/L D質(zhì)量濃度為0.3 mol/L(2)DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以_,可以推測溶于酒精中的物質(zhì)可能有_。(3)利用DNA遇_變藍色的特性,將該物質(zhì)作為鑒定_的試劑。其實驗過程要點是向盛有_的試管中加入4 mL的_。混合均勻后,將試管置于_5 min,待試管_,觀察試管中溶液顏色的變化,這個實驗也說明DNA耐_溫。解析根據(jù)實驗原理可知DNA在質(zhì)量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在質(zhì)量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中,溶解度最高。DNA存在于染色體上,為了把DNA和其他物質(zhì)分開,利用DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的某些物質(zhì)溶于酒精的方法,除去雜質(zhì)。利用DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成藍色的特性,可以鑒定提取的DNA。答案(1)AB(2)除去雜質(zhì)某些脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類或其他大分子物質(zhì)(3)二苯胺DNADNA二苯胺試劑沸水浴中加熱冷卻后高14(11分)PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),下圖表示合成過程,請據(jù)圖分析回答下面的問題。(1)A過程高溫使DNA變性解旋,對該過程的原理敘述正確的是_。A該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵B該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵C該過程不需要解旋酶的作用D該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同(2)C過程要用到的酶是耐高溫的_。這種酶在高溫下仍保持活性,因此在PCR擴增時可以_加入,_(需要/不需要)添加。PCR反應(yīng)除提供酶外,還需要滿足的基本條件有:_。(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,控制“94 55 72 ”溫度循環(huán)3次,則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占_。解析(1)高溫所起的作用類似于解旋酶,使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣?2)C過程中PCR技術(shù)的延伸階段,當(dāng)系統(tǒng)溫度上升到72 左右,溶液中的四種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。這種DNA聚合酶在高溫下不變性,所以一次性加入即可。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點。經(jīng)過三次循環(huán),共產(chǎn)生23個DNA分子,其中有2個DNA分子含有15N標(biāo)記。答案(1)C(2)DNA聚合酶一次不需要DNA模板、兩種引物、四種脫氧核苷酸,通過控制溫度和酸堿度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行(3)25%15(16分)(2011高考信息卷)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的功能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗,來提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問題。(1)實驗前取新鮮血液,要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)在對樣品進行處理時,主要包括_、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析技術(shù)的原理是_。(3)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進行分離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的_、_以及分子的形狀等。(4)同學(xué)乙利用凝膠色譜法進行血紅蛋白分離(如圖一),他在操作中加樣的正確順序是_,在執(zhí)行圖一中所示操作時,色譜柱下端連接的尼龍管應(yīng)該_(打開或關(guān)閉)圖一加樣示意圖圖二圖三(5)圖二、圖三分別是同學(xué)甲、乙利用同一種樣品分離得到的結(jié)果,則圖三中與圖二中蛋白質(zhì)P對應(yīng)的是_。解析(1)加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。(2)對樣品的處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析的原理是小分子可以自由進出透析袋(半透膜),而大分子不能通過。(3)電泳時,影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素有蛋白質(zhì)分子大小、帶電性質(zhì)及分子的形狀等。(4)正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進行分析,可以得出是;同時進行所示環(huán)繞加樣時,應(yīng)關(guān)閉下出口。(5)SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置,此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小,與電荷無關(guān),同時加樣在“”極,通電后,樣品蛋白質(zhì)向“”極移動,分子量相對小的,移動距離大,因此從圖二的電泳結(jié)果分析,P比N、M移向“”距離大,說明P的分子量相對比較小,因此洗脫出來的時間比較長,符合圖三中的丙。答案(1)防止血液凝固(2)紅細(xì)胞的洗滌小分子可以自由進出透析袋(半透膜),而大分子不能通過(3)大小帶電性質(zhì)(4)關(guān)閉(5)丙B卷(時間:45分鐘滿分:100分)考查知識點及角度難度及題號基礎(chǔ)中檔稍難DNA的粗提取與鑒定1、2、3、47多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA5、61315血紅蛋白的提取和分離8、9、10、11、1214一、選擇題(12小題,每小題5分,共60分)1下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()。A利用DNA溶于酒精,而蛋白質(zhì)不溶于酒精,可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,輕輕攪拌后過濾,取濾液進行以后的實驗D在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離解析利用DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶于酒精,可將DNA和蛋白質(zhì)分開。溫度過高也會影響DNA的特性,如PCR技術(shù)。在物質(zhì)的量濃度為0.2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大,但加入蒸餾水后,DNA溶解度降低,DNA析出,過濾后應(yīng)取其黏稠物進行以后的實驗。蛋白酶能分解蛋白質(zhì),而不能分解DNA。答案D2若從植物細(xì)胞中提取DNA,發(fā)現(xiàn)實驗效果不好,如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時不顯示顏色反應(yīng)等。其可能的原因是()。植物細(xì)胞中DNA含量低研磨不充分過濾不充分體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精的量過大A B C D導(dǎo)析細(xì)胞釋放DNA析出DNADNA解析研磨不充分會使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少;過濾不充分,也會導(dǎo)致提取的DNA量過少;若用于沉淀DNA的酒精量過少,也會導(dǎo)致DNA的沉淀量少,影響實驗效果。答案D3在提取DNA的過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是()。A不易破碎 B減少DNA的損失C增加DNA的含量 D容易涮洗解析DNA容易吸附在玻璃容器上,所以在提取過程中為了減少DNA的損失,最好使用塑料燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。答案B4從雞血細(xì)胞濾液中提取DNA所用的提取液是()。ANaCl溶液 B酒精C二苯胺 D檸檬酸鈉解析本題考查各試劑在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中的作用:NaCl溶液:溶解、析出DNA;酒精:溶解蛋白質(zhì),提純DNA;二苯胺:鑒定DNA;檸檬酸鈉:防止血液凝固。答案A5PCR反應(yīng)的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。下列防止污染的辦法中不包括的是()。A將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進行B吸樣槍吸樣要慢,吸樣時盡量一次性完成,槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用,以免交叉污染C所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝,以減少重復(fù)加樣次數(shù),避免污染機會DPCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存,不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱解析所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝,一次性用完,避免因多次使用造成污染。答案C6在PCR實驗操作中,下列說法不正確的是()。A在微量離心管中添加各種試劑時,只需一個槍頭B離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止液體外溢C用手輕彈離心管壁的目的是使反應(yīng)液充分混合D離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果導(dǎo)析PCR操作步驟:準(zhǔn)備移液混合離心反應(yīng)。解析在微量離心管中添加各種試劑時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須更換,確保實驗的準(zhǔn)確性;離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止實驗中脫落或液體外溢;離心10 s的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果。答案A7(2011江蘇南京一模)下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離的敘述中,錯誤的是()。A可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取到DNA和蛋白質(zhì)B用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除部分雜質(zhì)C透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性D進一步分離與純化血紅蛋白可用凝膠色譜法、離心法、電泳法等解析提取DNA的方法是利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。利用這一特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}溶液,就能使DNA充分溶解,使雜質(zhì)沉淀,或相反。提取蛋白質(zhì)的方法有透析法。進一步分離DNA和蛋白質(zhì)可利用DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶解于酒精這一原理。哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和其他膜結(jié)構(gòu),而DNA的提取實驗需要獲取較多DNA,因此一般不用哺乳動物的血(包括豬血)做實驗,所以蒸餾水漲破細(xì)胞的方法不適用于豬血提取DNA。答案A8下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的敘述中,錯誤的是()。A透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性B采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來C離心沉降法通過控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離D蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷相同的電極移動解析蛋白質(zhì)在電場中應(yīng)向與其自身所帶電荷相反的電極移動。答案D9根據(jù)血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳圖譜示意圖分析,所帶負(fù)電荷最多的球蛋白是()。A1球蛋白 B2球蛋白C球蛋白 D球蛋白解析根據(jù)電泳的原理進行分析。帶電粒子在電場中向與其電性相反的電極泳動的現(xiàn)象稱為電泳,因此,移動越慢的,所帶負(fù)電荷就越少(點樣是在負(fù)極)。答案A10釋放血紅蛋白時,下列有關(guān)紅細(xì)胞膜破裂的原因中,不包括的是()。A紅細(xì)胞吸水膨脹 B磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢鐲血紅蛋白的變性 D甲苯對細(xì)胞膜的溶解解析紅細(xì)胞洗滌去除血漿蛋白后,再加入一定量的蒸餾水,利用滲透作用原理,使紅細(xì)胞吸水漲破。同時,加入甲苯有助于對膜的溶解。B項可以加速膜的破裂。答案C11細(xì)胞破碎后,各種蛋白質(zhì)就會被釋放出來,再根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性進行提取。下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中,不正確的是()。A酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取B水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)提取C脂溶性蛋白質(zhì)可用有機溶劑提取D堿性蛋白質(zhì)可用強酸性溶液提取解析提取蛋白質(zhì)的基本原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì),加入不同的試劑,使蛋白質(zhì)溶于試劑中而提取蛋白質(zhì)。強酸、強堿都會使蛋白質(zhì)變性而沉淀。答案D12凝膠柱的制作常用玻璃管,在選擇玻璃管時應(yīng)該考慮的因素有()。玻璃管的高度玻璃管的直徑樣品的體積緩沖溶液的pHA B C D解析影響分離度的主要因素是層析柱的柱高,但在選擇玻璃管時,也要考慮玻璃管的直徑,保證柱高與直徑的比為51101。樣品的體積也要考慮,緩沖溶液的pH不影響選擇玻璃管。答案A二、非選擇題(3小題,共40分)13(10分)在遺傳病及刑偵破案中常需要對樣品DNA進行分析,PCR技術(shù)能快速擴增DNA片段,在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝,有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行分析研究的問題。據(jù)圖回答相關(guān)問題。(1)在相應(yīng)的橫線上寫出引物,并在復(fù)性這一步驟中將引物置于合適的位置。(2)在相應(yīng)的橫線上寫出循環(huán)一次后生成的DNA分子。(3)若將作為原料的4中脫氧核苷酸用32P標(biāo)記,請分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點:_,循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_。(4)PCR反應(yīng)過程的前提條件是_,PCR技術(shù)利用了DNA的_原理解決了這個問題。(5)在對樣品DNA分析過程中發(fā)現(xiàn),DNA摻雜著一些組蛋白,要去除這些組蛋白,加入的物質(zhì)是_。解析引物的作用是提供DNA聚合酶的起點3端;DNA體外擴增同細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制一樣都是半保留復(fù)制,DNA分子的兩條母鏈分別作為模板,合成新的DNA鏈。答案(1)5GAOHHOAG5(2)或(3)每個DNA分子各有一條鏈含32P1/2n(4)DNA解旋熱變性(5)蛋白酶14(18分)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗,來提取和分離血紅蛋白,請回答下列有關(guān)問題。(1)實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檬酸鈉,取血回來,馬上進行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_以上所述的過程即是樣品處理,它包括_、_、收集血紅蛋白溶液。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是_。(3)你如何知道紅細(xì)胞已洗滌干凈?_。(4)分離紅細(xì)胞時的離心速度及離心時間分別是_。(5)若離心速度過高和時間過長結(jié)果會怎樣?_。(6)將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析,即樣品的粗分離。透析的目的是_。透析的原理是_。(7)然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化,最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。樣品純化的目的是_。解析人或哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和細(xì)胞器,雜質(zhì)相對較少,提取血紅蛋白相對較容易,而其他動物如鳥類、兩棲類等動物紅細(xì)胞中含細(xì)胞核及大量的細(xì)胞器不易提取血紅蛋白。為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血劑檸檬酸鈉。樣品的處理包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白,以利于后續(xù)步驟分離純化。重復(fù)洗滌三次,直至上清液中沒有黃色,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。采集的血樣要及時分離紅細(xì)胞,分離時采取低速短時間離心,如500 r/min 離心2 min。若離心速度過高和時間過長會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一起沉淀,得不到純凈紅細(xì)胞,影響后續(xù)血紅蛋白提取的純度。答案(1)防止血液凝固紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放(2)去除血漿蛋白(3)離心后的上清液沒有黃色(4)低速500 r/min;短時間如2 min(5)離心速度過高和時間過長會使白細(xì)胞等一同沉淀,得不到純凈的紅細(xì)胞,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度(6)去除分子量較小的雜質(zhì)透析袋能使小分子自由進出,而大分子則保留在袋內(nèi)(7)通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去 15(12分)材料:飼料原料中的磷元素有相當(dāng)一部分存在于植酸中,豬禽等動物由于缺乏有關(guān)酶,無法有效利用植酸,造成磷源浪費,而且植酸隨糞便排出后易造成環(huán)境有機磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成為目前重要的飼料添加劑之一。(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中,常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板,植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生_,可根據(jù)其大小選擇目的菌株,所得菌株需要進一步測定植酸酶活性?;钚詼y定可以植酸鈉作為底物,活性可用一定條件下單位時間內(nèi)_表示。(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程(如下圖)。發(fā)酵液純酶 菌體去除透析液()去除中的主要成分為_;中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。(3)為制備基因工程菌,可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含多次循環(huán),每次循環(huán)包括三步:_。反應(yīng)過程中打開模板DNA雙鏈的方法是_。(4)除植酸酶外,微生物還應(yīng)用在_的生產(chǎn)中。解析(1)選擇目的菌株,可采用選擇培養(yǎng)基來操作。通過在培養(yǎng)基中添加特定成分,使其他微生物死亡或不能呈現(xiàn)特定現(xiàn)象來篩選。含有植酸酶基因的菌株可產(chǎn)生植酸酶分解培養(yǎng)基中的植酸鈣,產(chǎn)生透明圈。(2)題干中的生產(chǎn)流程為酶純化的過程。含酶的發(fā)酵液通過透析,即以半透膜過濾發(fā)酵液,使一些小分子物質(zhì)被過濾掉,再通過電泳法或凝膠色譜法分離純化混合的酶液,獲取純的植酸酶。答案(1)透明圈植酸鈉的消耗量(醇和磷酸的生成量)(2)小分子雜質(zhì)凝膠色譜法:根據(jù)不同蛋白質(zhì)之間分子大小、吸附性質(zhì)等差別進行純化。(或電泳法:根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷、分子大小等差異進行純化。)(3)變性、復(fù)性和延伸加熱(4)蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
- 2.下載的文檔,不會出現(xiàn)我們的網(wǎng)址水印。
- 3、該文檔所得收入(下載+內(nèi)容+預(yù)覽)歸上傳者、原創(chuàng)作者;如果您是本文檔原作者,請點此認(rèn)領(lǐng)!既往收益都?xì)w您。
下載文檔到電腦,查找使用更方便
9.9 積分
下載 |
- 配套講稿:
如PPT文件的首頁顯示word圖標(biāo),表示該PPT已包含配套word講稿。雙擊word圖標(biāo)可打開word文檔。
- 特殊限制:
部分文檔作品中含有的國旗、國徽等圖片,僅作為作品整體效果示例展示,禁止商用。設(shè)計者僅對作品中獨創(chuàng)性部分享有著作權(quán)。
- 關(guān) 鍵 詞:
- 2019-2020年高中生物 專題檢測 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)含解析新人教版選修1 2019 2020 年高 生物 專題 檢測 DNA 蛋白質(zhì) 技術(shù) 解析 新人 選修
鏈接地址:http://www.szxfmmzy.com/p-3168800.html