2019年高中生物 專題五 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段知能提升 新人教版選修1.doc
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2019年高中生物 專題五 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段知能提升 新人教版選修1一、單項選擇題1下列有關(guān)PCR的描述,不正確的是()APCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制B用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA是一個酶促反應(yīng),需耐高溫的解旋酶和DNA聚合酶C一個DNA片段經(jīng)PCR擴(kuò)增,可形成2nn解析:PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù),它以極少量的DNA為模板,以四種脫氧核苷酸為原料,在引物作用下使DNA聚合酶從引物的3端連接脫氧核苷酸,短時間內(nèi)迅速復(fù)制上百萬份的DNA拷貝。PCR利用DNA在不同溫度下變性解聚或復(fù)性的特性來解旋并結(jié)合引物,不用解旋酶解旋。答案:B2.PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點是()A原理簡單B原料易找CTaq DNA聚合酶有耐熱性D快速、高效、靈活、易于操作答案:D3PCR技術(shù)的操作步驟依次是()A高溫變性、中溫延伸、低溫復(fù)性B高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸C中溫延伸、高溫變性、低溫復(fù)性D中溫延伸、低溫復(fù)性、高溫變性答案:B4聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,其簡要過程如下圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述,不正確的是()APCR技術(shù)是在實驗室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板CPCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料,以指數(shù)方式擴(kuò)增D應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變解析:PCR技術(shù)是人工合成DNA的方法,原料是脫氧核苷酸,不是核糖核苷酸。答案:C5PCR實驗室中使用的微量離心管、緩沖溶液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是()A反復(fù)洗滌B用酒精擦洗C高壓滅菌D在20 下儲存解析:為了避免外源DNA等因素的污染,PCR實驗室中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在20 儲存。使用前,將所需的試劑從冰箱內(nèi)拿出,放在冰塊上緩慢融化。答案:C6PCR技術(shù)中,引物的作用是()A打開DNA雙鏈B催化合成DNA子鏈C使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始復(fù)制D提供模板解析:DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,而只能從3端延伸DNA鏈,引物的作用就在于此。答案:C7有關(guān)PCR反應(yīng)的敘述中,正確的是()APCR反應(yīng)所需要的引物只有RNABPCR反應(yīng)所需要的原料是核糖核苷酸CPCR反應(yīng)所需要的酶在60 會變性DPCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行答案:D8DNA檢測技術(shù)可應(yīng)用于親子鑒定、遺傳病檢測等領(lǐng)域。DNA檢測離不開對樣品DNA的PCR擴(kuò)增。不同樣品DNA的擴(kuò)增過程或條件不同的是()A引物BDNA聚合酶C四種脫氧核苷酸D預(yù)變性的溫度解析:不同的樣品DNA有不同的核苷酸序列,由于引物能與模板DNA(樣品DNA)按照堿基互補配對原則結(jié)合,因此不同樣品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。答案:A9復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至4060 ,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。PCR的結(jié)果可不考慮原來解旋開的兩個DNA模板鏈的重新結(jié)合,原因不包括()A由于模板DNA比引物復(fù)雜得多B引物和模板之間的碰撞結(jié)合機(jī)會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補鏈之間的碰撞C加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少D模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性,不可能再次結(jié)合解析:DNA分子在80100 的溫度范圍內(nèi)雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈打開,在DNA分子復(fù)制時提供模板,這個過程稱為變性。當(dāng)溫度緩慢降低到50 左右時,兩條解聚的單鏈重新結(jié)合成雙鏈,稱為復(fù)性,故D項闡述錯誤。答案:D10在PCR擴(kuò)增DNA的實驗中,根據(jù)設(shè)計,一分子DNA經(jīng)30次循環(huán)后,應(yīng)得到約230個DNA分子,但結(jié)果只有約210個DNA分子。出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因可能是()循環(huán)次數(shù)不夠Taq DNA聚合酶活力不夠或其活性受到抑制引物不能與親鏈結(jié)合系統(tǒng)設(shè)計欠妥A BC D解析:該現(xiàn)象屬于在PCR擴(kuò)增中假陰性現(xiàn)象。其原因有:(1)Taq DNA聚合酶活力不夠或其活性受到抑制導(dǎo)致催化效率降低,得到的產(chǎn)物比預(yù)期的少;(2)引物設(shè)計不合理,可能不能與模板DNA結(jié)合,導(dǎo)致無法進(jìn)行擴(kuò)增;(3)提取的模板數(shù)量或質(zhì)量不過關(guān),可能不能起模板作用。也無法進(jìn)行擴(kuò)增;(4)PCR系統(tǒng)設(shè)置不妥,達(dá)不到預(yù)期的效果;(5)循環(huán)次數(shù)過少,產(chǎn)物的量比預(yù)期的少。答案:D二、雙項選擇題11關(guān)于DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是()ADNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5端延伸DNA鏈BDNA復(fù)制需要引物C引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進(jìn)行結(jié)合DDNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸解析:由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3端即復(fù)制方向是由3端向5端延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補配對的原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5端向3端延伸。答案:BC12PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同,它們是()APCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNABPCR過程不需要DNA聚合酶CPCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的DPCR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制解析:PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比較,主要有兩點不同:(1)PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA,長度通常為2030個核苷酸。(2)PCR 過程中,DNA解旋不依賴解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的。答案:AC三、非選擇題13PCR技術(shù)是將某一特定DNA片段在體外酶的作用下,復(fù)制出許許多多相同片段的一種方法,利用它能快速而特異地擴(kuò)增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本過程如下:注:圖中“”表示每次擴(kuò)增過程中需要的引物(用P代表)。每個引物含20個脫氧核苷酸,并分別與DNA片段兩端堿基互補,其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈請據(jù)圖分析回答:(1)PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)_的過程。(2)PCR擴(kuò)增過程中對DNA片段進(jìn)行高溫加熱處理,其目的是_,其作用相當(dāng)于細(xì)胞內(nèi)_酶的作用。(3)在適溫延伸過程中,必需加一特定的DNA聚合酶,從圖示中可判斷,該酶與一般人體細(xì)胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特點是_。(4)假如引物都用3H標(biāo)記,從理論上計算,DNA片段經(jīng)3次擴(kuò)增所得的8個DNA分子中,含有3H 標(biāo)記的DNA分子占_%。(5)假定DNA片段含200對脫氧核苷酸,經(jīng)3次擴(kuò)增,從理論上計算,除需要引物14個外,還需要游離的脫氧核苷酸_個。解析:PCR技術(shù)是一種在體外模擬生物細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的過程,在這一過程中存在DNA分子變性(高溫使雙鏈解旋)、復(fù)性(低溫引物與單鏈結(jié)合)、延伸(中溫復(fù)制延伸),其中高溫下雙鏈解旋相當(dāng)于解旋酶的作用。PCR過程中所使用的DNA聚合酶必須要能夠耐高溫。由于每一個DNA分子都要和引物結(jié)合,所以每一個DNA分子中都要含有引物;每個DNA都含有400個脫氧核苷酸,則計算式為:400840020142 520。答案:(1)DNA復(fù)制 (2)使DNA雙鏈解開成為單鏈解旋 (3)耐高溫 (4)100 (5)2 52014下圖是PCR技術(shù)示意圖,請回答下列問題:(1)標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為_、_、_三大步驟。答案:變性復(fù)性延伸(2)引物是此過程中必須加入的物質(zhì),從化學(xué)本質(zhì)上說,引物是一小段_。答案:單鏈DNA或RNA(3)將雙鏈DNA_,使之變性,從而導(dǎo)致_。答案:加熱到95雙鏈DNA分離成兩條單鏈(4)Taq且只能由_端開始。答案:催化合成DNA子鏈3(5)引物延伸需提供_作為原料。答案:四種脫氧核苷酸- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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