2019-2020年高三生物一輪復(fù)習(xí)精講精練 第35講 基因工程(一) 蘇教版.doc
《2019-2020年高三生物一輪復(fù)習(xí)精講精練 第35講 基因工程(一) 蘇教版.doc》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《2019-2020年高三生物一輪復(fù)習(xí)精講精練 第35講 基因工程(一) 蘇教版.doc(14頁珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
2019-2020年高三生物一輪復(fù)習(xí)精講精練 第35講 基因工程(一) 蘇教版1涵蓋范圍本單元包括選修3全部?jī)?nèi)容基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程以及生態(tài)工程。2考情分析(1)考查力度:占分比重相對(duì)穩(wěn)定,如山東理綜只出一個(gè)8分的簡(jiǎn)答題。(2)考查內(nèi)容基因工程中三種工具?;蚬こ滩僮魉牟角??;蚬こ坛晒D(zhuǎn)基因生物實(shí)例及安全性討論。細(xì)胞工程中植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備及應(yīng)用。核移植技術(shù)。胚胎工程中胚胎移植和胚胎分割。干細(xì)胞的研究。(3)考查形式有的省將選修與必修有機(jī)結(jié)合,既可出簡(jiǎn)答題也可出選擇題。有的省如山東省全部以簡(jiǎn)答題形式呈現(xiàn),且不與必修聯(lián)系。3復(fù)習(xí)指導(dǎo)(1)復(fù)習(xí)線索以基因工程的具體成果(如抗蟲棉)為主線,系統(tǒng)復(fù)習(xí)基因工程的操作工具和操作步驟等知識(shí)點(diǎn)。以植物的組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ),系統(tǒng)復(fù)習(xí)其他細(xì)胞工程技術(shù)手段。以體內(nèi)受精作用和個(gè)體發(fā)育過程為基礎(chǔ),系統(tǒng)復(fù)習(xí)胚胎工程的流程。(2)復(fù)習(xí)方法圖解法復(fù)習(xí)基因工程和胚胎工程。比較法復(fù)習(xí)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合及單克隆抗體制備。關(guān)注熱點(diǎn)科研成果,注意知識(shí)的實(shí)踐應(yīng)用。第35講基因工程(一)考綱要求1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理及技術(shù)()??键c(diǎn)一聚焦基因工程的概念及基本工具1分析基因工程的概念(1)供體:提供目的基因。(2)操作環(huán)境:體外。(3)操作水平:分子水平。(4)原理:基因重組。(5)受體:表達(dá)目的基因。(6)本質(zhì):性狀在受體體內(nèi)表達(dá)。(7)優(yōu)點(diǎn):克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙,定向改造生物的遺傳性狀。2基因工程的基本工具(判一判)(1)限制性核酸內(nèi)切酶只能用于切割目的基因()(2)限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子具有特異性()(3)限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后可產(chǎn)生黏性末端和平口末端兩種類型()(4)DNA連接酶能將兩堿基間通過形成氫鍵連接起來()(5)Ecoli DNA連接酶既可連接平口末端,又可連接黏性末端()(6)質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,是基因工程常用的載體()(7)載體的作用是攜帶目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中,使之穩(wěn)定存在并表達(dá) ()易錯(cuò)警示巧辨基因工程操作工具易錯(cuò)點(diǎn)(1)限制性核酸內(nèi)切酶是一類酶,而不是一種酶。(2)限制性核酸內(nèi)切酶的成分為蛋白質(zhì),其作用的發(fā)揮需要適宜的理化條件,高溫、強(qiáng)酸或強(qiáng)堿均易使之變性失活。(3)在切割目的基因和載體時(shí)要求用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。(4)將一個(gè)基因從DNA分子上切割下來,需要切兩處,同時(shí)產(chǎn)生4個(gè)黏性末端。(5)不同DNA分子用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的黏性末端都相同,同一個(gè)DNA分子用不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割,產(chǎn)生的黏性末端一般不相同。(6)限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)應(yīng)位于標(biāo)記基因之外,不能破壞標(biāo)記基因,以便于進(jìn)行檢測(cè)。(7)基因工程中的載體與細(xì)胞膜上物質(zhì)運(yùn)輸?shù)妮d體不同?;蚬こ讨械妮d體是DNA分子,能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞內(nèi);膜載體是蛋白質(zhì),與細(xì)胞膜的通透性有關(guān)。(8)基因工程中有3種工具,但工具酶只有2種。1. 如圖所示為部分雙鏈DNA片段,下列有關(guān)基因工程中工具酶功能的敘述錯(cuò)誤的是()A切斷a處的酶為限制性核酸內(nèi)切酶B連接a處的酶為DNA連接酶C切斷b處的酶為DNA解旋酶D連接b處的酶為RNA聚合酶答案D解析限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的核苷酸序列,并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子,通常形成黏性末端,即能切割DNA鏈外側(cè)的磷酸二酯鍵(圖中的a處),內(nèi)側(cè)堿基對(duì)之間的氫鍵(b處)可通過DNA解旋酶水解。DNA連接酶將切斷的磷酸二酯鍵進(jìn)行連接,即圖中的a處。RNA聚合酶的作用是催化DNA的轉(zhuǎn)錄。2限制性核酸內(nèi)切酶Mun和限制性核酸內(nèi)切酶EcoR的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是CAATTG和GAATTC。如圖表示四種質(zhì)粒和目的基因,其中,箭頭所指部位為限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn),質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是()答案A解析由圖可知,質(zhì)粒B上無標(biāo)記基因,不適合作為載體;質(zhì)粒C和D的標(biāo)記基因上都有限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn);只有質(zhì)粒A上既有標(biāo)記基因,且Mun 的切割位點(diǎn)不在標(biāo)記基因上。1與DNA有關(guān)的酶(1)五種相關(guān)酶的比較作用底物作用部位形成產(chǎn)物限制性核酸內(nèi)切酶DNA分子磷酸二酯鍵黏性末端或平口末端DNA連接酶DNA片段磷酸二酯鍵重組DNA分子DNA聚合酶脫氧核苷酸磷酸二酯鍵子代DNADNA解旋酶DNA分子堿基對(duì)間的氫鍵形成脫氧核苷酸單鏈DNA(水解)酶DNA分子磷酸二酯鍵游離的脫氧核苷酸(2)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶之間的關(guān)系圖示2對(duì)載體的分析條件目的穩(wěn)定并能復(fù)制目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴(kuò)大有一個(gè)至多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)可攜帶多個(gè)或多種外源基因具有特殊的標(biāo)記基因便于重組DNA的鑒定和選擇考點(diǎn)二基因工程的操作步驟觀察基因工程的操作過程,分析每一步驟的操作程序 易錯(cuò)警示基因工程操作易錯(cuò)點(diǎn)(1)目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的:基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控,所以目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間的部位。(2)基因工程操作過程中只有第三步(將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞)沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象:第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得DNA,第二步存在黏性末端連接現(xiàn)象,第四步檢測(cè)存在分子水平雜交方法。(3)原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。(4)一般情況下,用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的片段,但有時(shí)可用兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割質(zhì)粒和目的基因,這樣可避免質(zhì)粒和質(zhì)粒之間、目的基因和目的基因之間的連接。(5)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程,稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化的實(shí)質(zhì)是目的基因整合到受體細(xì)胞染色體基因組中。(6)不熟悉標(biāo)記基因的種類和作用:標(biāo)記基因的作用篩選、檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,常見的有抗生素抗性基因、發(fā)光基因(表達(dá)產(chǎn)物為帶顏色的物質(zhì))等。(7)對(duì)受體細(xì)胞模糊不清:受體細(xì)胞常用植物受精卵或體細(xì)胞(經(jīng)組織培養(yǎng))、動(dòng)物受精卵(一般不用體細(xì)胞)、微生物(大腸桿菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰島素則必須用真核生物酵母菌(需內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的加工、分泌);一般不用支原體,原因是它營(yíng)寄生生活;一定不能用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞,原因是它無細(xì)胞核,不能合成蛋白質(zhì)。(8)還應(yīng)注意的問題有:基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子(DNA片段)起始密碼子(RNA);終止子(DNA片段)終止密碼子(RNA)?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建是最核心、最關(guān)鍵的一步,在體外進(jìn)行。3下列有關(guān)基因工程操作的敘述中,正確的是()A用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割載體與目的基因可獲得相同的黏性末端B以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同C檢測(cè)到受體細(xì)胞含有目的基因就標(biāo)志著基因工程操作的成功D用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為載體是因?yàn)槠淇剐曰虮阌谂c外源基因連接答案A解析一種氨基酸可以由多種密碼子控制,因此以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因通常不同;只有目的基因表達(dá),使受體表現(xiàn)出目標(biāo)性狀或獲得目標(biāo)產(chǎn)物才標(biāo)志著基因工程操作的成功;抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因,用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。4浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn),一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后,許多參與農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)的表達(dá)和酶活性都得到提高,在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì),有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作,請(qǐng)回答下列問題:(1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_。步驟用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指_;步驟用到的酶有_。(2)圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是_,在導(dǎo)入之前應(yīng)用一定濃度的_處理受體細(xì)菌。(3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用_制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。(4)請(qǐng)你為該課題命名:_。答案(1)從基因組文庫(kù)中獲取、人工合成目的基因或PCR合成(任選其中兩項(xiàng)即可)Taq DNA聚合酶限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(2)轉(zhuǎn)化法氯化鈣溶液(3)紅霉素抗性基因紅霉素(4)探究油菜素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解解析進(jìn)行基因工程操作時(shí),首先要獲取目的基因,其方法有多種:從基因組文庫(kù)中獲取、人工合成目的基因或PCR合成等。在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。圖中的受體細(xì)胞是細(xì)菌,故用轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入基因表達(dá)載體,導(dǎo)入后,需檢驗(yàn)和篩選。從圖中可以看出,最終是通過對(duì)照實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌對(duì)土壤中殘留農(nóng)藥的分解能力。1獲得目的基因(1)如果目的基因的序列是已知的,可用化學(xué)方法合成目的基因,或者用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增目的基因。(2)如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以從基因文庫(kù)中獲取。2制備重組DNA分子(1)重組DNA分子的結(jié)構(gòu):?jiǎn)?dòng)子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。(2)重組DNA分子的制備方法:3轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞生物種類植物動(dòng)物微生物常用方法農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞法受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的DNA上表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷?受精卵)顯微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動(dòng)物Ca2處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子4篩選重組細(xì)胞(1)篩選的原因:不是所有的受體細(xì)胞接納了重組DNA分子,只有部分受體細(xì)胞中含有目的基因。(2)篩選的方法:插入滅活法。5實(shí)現(xiàn)功能表達(dá):培育受體細(xì)胞并誘導(dǎo)目的基因的表達(dá)。6實(shí)例:抗軟化番茄的培育過程(1)目的基因:抗多聚半乳糖醛酸酶基因(2)受體細(xì)胞:番茄體細(xì)胞(3)轉(zhuǎn)化方法:農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)(4)轉(zhuǎn)化過程:抗多聚半乳糖醛酸酶基因與農(nóng)桿菌質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌用農(nóng)桿菌侵染普通番茄細(xì)胞利用植物組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)導(dǎo)入目的基因成功的番茄體細(xì)胞含有抗多聚半乳糖醛酸酶基因的抗軟化番茄。1(xx浙江卷,6)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是()A每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子答案C解析大腸桿菌成功表達(dá)出腺苷酸脫氨酶,說明這些大腸桿菌都至少含一個(gè)重組質(zhì)粒,A項(xiàng)正確;作為載體的條件為至少含一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn),所以作為載體的質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn),B項(xiàng)正確;作為基因表達(dá)載體應(yīng)包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因四部分,但并不是每個(gè)酶切位點(diǎn)都至少插入一個(gè)ada,C項(xiàng)錯(cuò)誤;由于這些目的基因成功表達(dá),所以每個(gè)ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子,D項(xiàng)正確。2(xx新課標(biāo)全國(guó)卷,40)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問題:(1)限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有_和_。(2)質(zhì)粒載體用EcoR切割后產(chǎn)生的片段如下:AATTCGGCTTAA為使載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外,還可用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是_。(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即_DNA連接酶和_DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是_,產(chǎn)物是_。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用_技術(shù)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,_和_也可作為載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是_。答案(1)黏性末端平口末端(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoR切割產(chǎn)生的末端相同(其他合理答案也可)(3)EcoliT4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌體動(dòng)植物病毒(其他合理答案也可)(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱(其他合理答案也可)解析(1)DNA分子經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有黏性末端和平口末端兩種類型。(2)為使載體與目的基因相連,應(yīng)使二者被切割后產(chǎn)生的末端相同,故用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的末端必須與EcoR切割產(chǎn)生的末端相同。(3)根據(jù)酶的來源不同,DNA連接酶分為EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶。(4)mRNA(或RNA)為模板,合成DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄,若要體外獲得大量DNA分子,可以使用RCR技術(shù)。(5)在基因工程中,通常利用質(zhì)粒作為載體,另外噬菌體和動(dòng)植物病毒也可作為載體。(6)大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí),常用Ca2處理,使之成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞。3(xx江蘇卷,32)圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?,F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。請(qǐng)回答下列問題:(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由_連接。(2)若用限制性核酸內(nèi)切酶Sma完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是_末端,其產(chǎn)物長(zhǎng)度為_。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA堿基對(duì)替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段,用限制性核酸內(nèi)切酶Sma完全切割,產(chǎn)物中共有_種不同長(zhǎng)度的DNA片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制性核酸內(nèi)切酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制性核酸內(nèi)切酶是_。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加_的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè),部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá),其最可能的原因是_。答案(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平口537 bp、790 bp、661 bp(3)4(4)BamH 抗生素B同種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的末端相同,部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接解析(1)一條脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩個(gè)堿基之間是通過“脫氧核糖磷酸脫氧核糖”相連的,要注意兩條脫氧核苷酸鏈的相鄰堿基之間通過氫鍵相連進(jìn)行區(qū)分。(2)從Sma的識(shí)別序列和切點(diǎn)可見,其切割后產(chǎn)生的是平口末端,圖1中DNA片段有Sma 的兩個(gè)識(shí)別序列,故切割后產(chǎn)生的產(chǎn)物長(zhǎng)度為537(5343)bp、790(79633)bp和661(6583)bp三種。(3)圖示方框內(nèi)發(fā)生堿基對(duì)的替換后,形成的d基因失去了1個(gè)Sma 的識(shí)別序列,故D基因、d基因用Sma 完全切割后產(chǎn)物中除原有的3種長(zhǎng)度的DNA片段外,還增加一種537790 bp的DNA片段。(4)目的基因的兩端都有BamH 的識(shí)別序列,質(zhì)粒的啟動(dòng)子后的抗生素A抗性基因上也有BamH 的識(shí)別序列,故應(yīng)選用的限制性核酸內(nèi)切酶是BamH ,此時(shí)抗生素B抗性基因作為標(biāo)記基因,故篩選時(shí)培養(yǎng)基中要添加抗生素B。若重組質(zhì)粒已導(dǎo)入了受體細(xì)胞卻不能表達(dá),很可能是因?yàn)橛猛N限制性核酸內(nèi)切酶切割后,目的基因和質(zhì)粒有兩種連接方式,導(dǎo)入受體細(xì)胞的重組質(zhì)粒是目的基因和質(zhì)粒反向連接形成的。1下列一般不作為基因工程中的標(biāo)記基因的是()A四環(huán)素抗性基因B綠色熒光蛋白基因C產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因D貯藏蛋白的基因答案D解析標(biāo)記基因位于載體(質(zhì)粒)上,以利于重組DNA的鑒定和選擇,如四環(huán)素抗性基因、綠色熒光蛋白基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。2若要利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA(圖丙),限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是Bgl(AGATCT)、EcoR(GAATTC)和Sau3A(GATC)。下列分析合理的是()A用EcoR切割目的基因和P1噬菌體載體B用Bgl和EcoR切割目的基因和P1噬菌體載體C用Bgl和Sau3A切割目的基因和P1噬菌體載體D用EcoR和Sau3A切割目的基因和P1噬菌體載體答案D解析解答本題的關(guān)鍵是要看準(zhǔn)切割后目的基因插入的方向,只有用EcoR和Sau3A切割目的基因和P1噬菌體載體,構(gòu)建的重組DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移動(dòng)方向才一定與圖丙相同。3質(zhì)粒作為“分子運(yùn)輸車”的條件是()能夠自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子有多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)有標(biāo)記基因真核細(xì)胞中沒有A BC D答案C解析載體具備的條件是:能自我復(fù)制;有標(biāo)記基因;最好有多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn);能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制。4下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)敘述,不正確的是()A需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行C抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因D啟動(dòng)子位于目的基因的首端答案B解析基因表達(dá)載體是目的基因與載體的結(jié)合,在此過程中需用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因與載體,用DNA連接酶將相同的末端連接起來;基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在細(xì)胞外進(jìn)行的;基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子(位于基因首端使轉(zhuǎn)錄開始)、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。5下面是獲得抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B圖中愈傷組織分化產(chǎn)生的再生植株基因型一般都相同C卡那霉素抗性基因中含有相關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)D轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有性生殖的后代不能穩(wěn)定保持抗蟲性狀答案C解析卡那霉素抗性基因是標(biāo)記基因,在構(gòu)建目的基因的表達(dá)載體時(shí),不能被限制性核酸內(nèi)切酶破壞,不應(yīng)有相關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)。愈傷組織分化產(chǎn)生再生植株是通過有絲分裂來實(shí)現(xiàn)的,再生植株的基因型一般都相同。通過土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)將目的基因?qū)朊藁?xì)胞后,在有性生殖過程中,目的基因不一定能通過生殖細(xì)胞傳給子代,故不能穩(wěn)定保持抗蟲性狀。6如圖是從酵母菌中獲取某植物需要的某種酶的基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問題:(1)圖中cDNA文庫(kù)_基因組文庫(kù)(大于、等于、小于)。(2)過程提取的DNA需要_的切割,B過程是_過程。(3)為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用的技術(shù)是_,其原理是_。(4)目的基因獲取之后,需要進(jìn)行_,其組成必須有_及標(biāo)記基因等,此步驟是基因工程的核心。(5)將該目的基因?qū)肽畴p子葉植物細(xì)胞,常采用的方法是_,其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是_。答案(1)小于(2)限制性核酸內(nèi)切酶逆轉(zhuǎn)錄(3)PCR技術(shù)DNA復(fù)制(4)制備重組DNA分子啟動(dòng)子、終止子、目的基因(復(fù)制原點(diǎn)可不答)(5)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)目的基因是否整合到植物細(xì)胞的染色體上解析(1)基因組文庫(kù)是指將某生物的全部基因組DNA切割成一定長(zhǎng)度的DNA片段克隆到某種載體上形成的集合;cDNA文庫(kù)是由mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的基因組成的,由于基因的選擇性表達(dá),cDNA文庫(kù)小于基因組文庫(kù)。(2)從供體細(xì)胞的DNA中獲取目的基因,首先應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶將目的基因從其所在的DNA分子上切割下來;B過程是以mRNA為模板合成DNA的過程,應(yīng)為逆轉(zhuǎn)錄過程。(3)PCR技術(shù)是一種體外擴(kuò)增DNA的方法,其原理為DNA復(fù)制,能將得到的目的基因在細(xì)胞外大量擴(kuò)增。(4)制備重組DNA分子包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子,其構(gòu)建是基因工程的核心。(5)將目的基因?qū)肽畴p子葉植物細(xì)胞常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,目的基因只有整合到植物細(xì)胞的染色體上才能在植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳。7科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與pBR322質(zhì)粒進(jìn)行重組,得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵,使其發(fā)育為轉(zhuǎn)基因牛,再通過細(xì)胞工程培育為轉(zhuǎn)基因克隆牛。pBR322質(zhì)粒含有兩個(gè)抗生素抗性基因和5個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切點(diǎn)(如圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)圖1中顯示的人的生長(zhǎng)激素基因是通過人工合成的,圖中過程需要的酶是_。該過程所依據(jù)的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則是_(用字母和箭頭表示)。(2)圖1中的mRNA是從人體的哪種細(xì)胞中獲取的?_。(3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選,方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,通過含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察大腸桿菌的生長(zhǎng)、繁殖情況進(jìn)行判斷,如圖3所示:如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,而不能在培養(yǎng)基B上生長(zhǎng)、繁殖,則使用限制性核酸內(nèi)切酶a的切點(diǎn)是圖2中的_,即目的基因插入了_中。如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,而在培養(yǎng)基B上能生長(zhǎng)、繁殖,則使用限制性核酸內(nèi)切酶a的切點(diǎn)是圖2中的_,即目的基因插入了_中。如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,則使用限制性核酸內(nèi)切酶a的切點(diǎn)是圖2中的_。答案(1)逆轉(zhuǎn)錄酶AT、UA、GC、CG(2)垂體細(xì)胞(3)切點(diǎn)3或切點(diǎn)4或切點(diǎn)5抗四環(huán)素基因切點(diǎn)1抗氨芐青霉素基因切點(diǎn)2解析(1)以mRNA為模板合成DNA的過程中需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化,遵循AT、UA、GC、CG的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。(2)題中所用的目的基因?yàn)槿说纳L(zhǎng)激素基因,生長(zhǎng)激素是由垂體細(xì)胞分泌的,因此,只有在垂體細(xì)胞中才能獲得相應(yīng)的mRNA。(3)結(jié)合質(zhì)粒中標(biāo)記基因的類型,以及目的基因插入的位置即可判斷限制性核酸內(nèi)切酶a的切點(diǎn)。- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
- 2.下載的文檔,不會(huì)出現(xiàn)我們的網(wǎng)址水印。
- 3、該文檔所得收入(下載+內(nèi)容+預(yù)覽)歸上傳者、原創(chuàng)作者;如果您是本文檔原作者,請(qǐng)點(diǎn)此認(rèn)領(lǐng)!既往收益都?xì)w您。
下載文檔到電腦,查找使用更方便
9.9 積分
下載 |
- 配套講稿:
如PPT文件的首頁顯示word圖標(biāo),表示該P(yáng)PT已包含配套word講稿。雙擊word圖標(biāo)可打開word文檔。
- 特殊限制:
部分文檔作品中含有的國(guó)旗、國(guó)徽等圖片,僅作為作品整體效果示例展示,禁止商用。設(shè)計(jì)者僅對(duì)作品中獨(dú)創(chuàng)性部分享有著作權(quán)。
- 關(guān) 鍵 詞:
- 2019-2020年高三生物一輪復(fù)習(xí)精講精練 第35講 基因工程一 蘇教版 2019 2020 年高 生物 一輪 復(fù)習(xí) 精練 35 基因工程
鏈接地址:http://www.szxfmmzy.com/p-3384513.html