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階段評(píng)估檢測(cè)(八) (選修3) (30分鐘　100分) 1.(14分)(2016全國(guó)卷Ⅲ)圖(a)中的三個(gè)DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖(b)為某種表達(dá)載體的示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點(diǎn)是唯一的)。 根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題： (1)經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被_________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是__________________________________。 (2)若某人利用圖(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖(c)所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有_______________，不能表達(dá)的原因是________。 (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有__________________和_____________，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是_________________。 【解題指南】(1)圖示信息：圖(a)中三種酶的識(shí)別序列，圖(b)中終止子、啟動(dòng)子、圖(c)中目的基因的插入位置。 (2)關(guān)鍵知識(shí)：只有兩種限制性核酸內(nèi)切酶剪切時(shí)識(shí)別的序列相同時(shí)，才能被DNA連接酶連接；啟動(dòng)子是啟動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄的，終止子終止轉(zhuǎn)錄過(guò)程，插入二者之間的目的基因才能正常表達(dá)。 【解析】本題主要考查限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用及基因表達(dá)載體的構(gòu)建。 (1)BamHⅠ和Sau3AⅠ的共同識(shí)別序列是—GATC—，二者切割形成的黏性末端相同，可以被DNA連接酶連接。 (2)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目的基因的前端，終止子應(yīng)位于目的基因的后端，這樣目的基因才能順利地轉(zhuǎn)錄并完成翻譯過(guò)程，即順利表達(dá)，圖中所示甲、丙均不符。 (3)常見(jiàn)的DNA連接酶有T4 DNA連接酶和Ecoli DNA連接酶，T4 DNA連接酶既能連接黏性末端，又能連接平末端。 答案：(1)Sau3AⅠ　兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端 (2)甲和丙　甲中目的基因插入在啟動(dòng)子的上游，丙中目的基因插入在終止子的下游，二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄(其他合理答案亦可) (3)Ecoli DNA連接酶　T4 DNA連接酶 T4 DNA連接酶 【加固訓(xùn)練】 　　(2016海南高考)基因工程又稱(chēng)為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問(wèn)題： (1)在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即_______和從_______中分離。 (2)利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)，兩個(gè)文庫(kù)相比，cDNA文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少，其原因是__________________________________。 (3)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是___________聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是_________。 (4)將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有________和_______顆粒。 【解析】本題主要考查目的基因的獲取方法、基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法。 (1)在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，既可在核苷酸序列已知的情況下人工合成，也可用限制酶對(duì)生物材料的DNA切割，再選取。 (2)cDNA文庫(kù)是由mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的，其中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達(dá))的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因。 (3)在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是大腸桿菌。 (4)將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉顆粒。 答案：(1)人工合成　生物材料(其他合理答案亦可) (2)cDNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達(dá))的基因，而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因(其他合理答案亦可) (3)RNA　大腸桿菌(或細(xì)菌) (4)金粉　鎢粉 2.(12分)(2019撫州模擬)現(xiàn)代生物工程技術(shù)推動(dòng)了醫(yī)藥學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展，依據(jù)現(xiàn)代生物工程技術(shù)的相關(guān)知識(shí)和原理回答下列問(wèn)題： (1)利用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)胰島素的批量生產(chǎn)是目前糖尿病治療的新思路，該過(guò)程中的關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)是________，該環(huán)節(jié)目的是使胰島素基因_______________，同時(shí)，使其能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 (2)單克隆抗體的制備中，將經(jīng)抗原免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞后，還需進(jìn)行________培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選，就能獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是____________。 (3)在胚胎工程中，胚胎移植前，通過(guò)_____________技術(shù)可獲得較多胚胎；移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是____________________。 【解析】(1)基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使得目的基因(胰島素基因)在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代，且在下一代能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 (2)單克隆抗體的制備過(guò)程中，獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選后獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞；最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體的原因是其由一種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成，而一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體。 (3)利用胚胎分割技術(shù)可以獲得多個(gè)相同的胚胎；由于受體子宮對(duì)外來(lái)胚胎基本不發(fā)生排斥反應(yīng)，因此移植后的胚胎能在受體子宮中存活。 答案：(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建　在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代 (2)克隆化　每一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 (3)胚胎分割　受體子宮對(duì)外來(lái)胚胎基本不發(fā)生排斥反應(yīng) 3.(12分)干擾素是治療癌癥的重要藥物，它必須從血液中提取，由于每升人血液中只能提取0.5 μg，所以價(jià)格昂貴。美國(guó)加利福尼亞的某生物制品公司用下圖的方式生產(chǎn)干擾素。試回答相關(guān)問(wèn)題： (1)若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛乳汁中含有人干擾素，構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、人干擾素基因、終止子________和復(fù)制原點(diǎn)等。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵最有效的方法是_________________。 (2)通常情況下，對(duì)供體和受體母牛選擇后，要用激素進(jìn)行_____________，并用激素對(duì)供體母牛做_____________處理。 (3)為了實(shí)現(xiàn)干擾素的批量生產(chǎn)，早期胚胎進(jìn)行移植之前要進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，并要求早期胚胎細(xì)胞中的性染色體組成為_(kāi)______。選擇發(fā)育良好的囊胚或_______胚進(jìn)行移植。為了提高胚胎利用效率，可在這兩個(gè)階段進(jìn)行胚胎分割，胚胎分割可以看作動(dòng)物_______(填“有性”或“無(wú)性”)繁殖的方法之一。 (4)近年來(lái)，關(guān)于胚胎干細(xì)胞的研究越來(lái)越多。胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，如圖所示的細(xì)胞A和細(xì)胞B分別是_______細(xì)胞、_______細(xì)胞，可以從這些細(xì)胞中獲得胚胎干細(xì)胞。 【解析】(1)基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的最有效的方法是顯微注射技術(shù)。 (2)胚胎移植過(guò)程中要注意對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，同時(shí)要用促性腺激素對(duì)供體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理，以獲得更多的后代。 (3)因?yàn)樾枰獜娜橹刑崛∷幬?，所以?yīng)選擇性染色體組成為XX的雌性個(gè)體；胚胎分割是無(wú)性繁殖的方法之一。 (4)通常從早期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或胎兒的原始性腺中獲得胚胎干細(xì)胞。 答案：(1)標(biāo)記基因　顯微注射技術(shù) (2)同期發(fā)情處理　超數(shù)排卵 (3)XX　桑椹　無(wú)性 (4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　原始性腺 4.(12分)(2018海南高考)甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì)，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細(xì)胞，得到了轉(zhuǎn)基因植株?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜_____________(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是_______。 (2)若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測(cè)到這種甜蛋白，則表明該重組質(zhì)粒中_____________已轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中且能夠表達(dá)；用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交，發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個(gè)體數(shù)與不含甜蛋白個(gè)體數(shù)之比為1∶1，則說(shuō)明甜蛋白基因已經(jīng)整合到_____________(填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”)中。 (3)假設(shè)某種轉(zhuǎn)基因作物因?yàn)槭艿讲《靖腥径鴾p產(chǎn)，若要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗，應(yīng)選用_______作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。 (4)通常，基因工程操作主要有4個(gè)步驟，即目的基因獲取、重組表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。因此，基因工程的含義可概括為_(kāi)_________________________________________________。 【解析】(1)受傷的雙子葉植物如黃瓜葉片能分泌大量的酚類(lèi)物質(zhì)，吸引農(nóng)桿菌向傷口處轉(zhuǎn)移。 (2)普通黃瓜原來(lái)沒(méi)有甜蛋白，如果在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測(cè)到甜蛋白，說(shuō)明甜蛋白基因已經(jīng)轉(zhuǎn)移到黃瓜細(xì)胞內(nèi)，并且得到表達(dá)。若甜蛋白基因整合到核基因組中，由于黃瓜為二倍體植物，其基因型可看作Aa(不含甜蛋白基因看作a)，與普通黃瓜(aa)雜交，后代性狀分離比為1∶1；若甜蛋白基因整合到線粒體或葉綠體基因組中，其遺傳具有母系遺傳的特點(diǎn)，要么后代全有此性狀(轉(zhuǎn)基因黃瓜作母本)要么后代都沒(méi)有此性狀(轉(zhuǎn)基因黃瓜作父本)。 (3)植物的根尖或莖尖沒(méi)有或很少有病毒，取這些部位的材料進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗。 (4)基因工程的含義是利用體外重組技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將一生物的特定基因轉(zhuǎn)移到另一種生物的基因組中，使后者體現(xiàn)出新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。 答案：(1)受傷的　葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類(lèi)物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞 (2)甜蛋白基因　核基因組　(3)莖尖 (4)按照人們的愿望進(jìn)行設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類(lèi)型 5.(14分)(2018全國(guó)卷Ⅱ)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5末端，獲得了L1-GFP融合基因(簡(jiǎn)稱(chēng)為甲)，并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1～E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。 回答下列問(wèn)題： (1)據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是___________。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證________，也是為了保證_______________。 (2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了___________和_____________過(guò)程。 (3)為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_______________移入牛的_________________中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。 (4)為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定，在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的_________(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。 【解析】(1)將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，為了保證甲(L1-GFP融合基因)的完整性，應(yīng)該選擇E1和E4兩種酶切割，并且把目的基因插入啟動(dòng)子和終止子之間，從而使其能在受體細(xì)胞中表達(dá)。 (2)在牛皮膚細(xì)胞中觀察到了綠色熒光表明基因已表達(dá)，而基因的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程。 (3)由(4)題意可知，獲得含有L1-GFP融合基因(甲)的牛為克隆牛，需要用核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中。 (4)檢測(cè)甲是否存在于牛的不同組織細(xì)胞中，可以采用PCR技術(shù)擴(kuò)增，再用DNA分子雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)，PCR技術(shù)中模板是DNA，并不是RNA。 答案：(1)E1和E4　甲的完整　甲與載體正確連接 (2)轉(zhuǎn)錄　翻譯 (3)細(xì)胞核　去核卵母細(xì)胞　(4)核DNA 6.(10分)(2019延邊模擬)Ⅱ型糖尿病病因復(fù)雜，多數(shù)是胰島素拮抗引起機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性降低，而胰島素單克隆抗體可用于快速檢測(cè)血清胰島素的含量。請(qǐng)回答下列有關(guān)胰島素單克隆抗體制備的問(wèn)題： (1)首先需要將人胰島素注射到健康成熟小鼠體內(nèi)，其目的是獲取_________________細(xì)胞；再將該細(xì)胞與_________相融合，以制取雜交瘤細(xì)胞；其中誘導(dǎo)融合的常用生物誘導(dǎo)因素是___________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有____________________________等兩兩融合的細(xì)胞。細(xì)胞融合過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有___________的特性。 (3)為檢驗(yàn)得到的雜交瘤細(xì)胞能否分泌胰島素抗體，可用___________與從雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中提取的抗體雜交。在體外條件下，當(dāng)培養(yǎng)的小鼠雜交瘤細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行___________培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞。 (4)細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是__________________________________。 【解析】(1)為了獲得能分泌抗人胰島素抗體的B細(xì)胞，應(yīng)該先將人的胰島素作為抗原注射到小鼠體內(nèi)；雜交瘤細(xì)胞是由能分泌抗人胰島素抗體的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合形成的，常用的生物誘導(dǎo)劑是滅活的病毒，此外也可以用物理或化學(xué)方法進(jìn)行誘導(dǎo)。(2)若只考慮兩兩融合的情況，融合體系中存在三種融合細(xì)胞，即雜交瘤細(xì)胞、B細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞；兩種細(xì)胞能夠相互融合利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(3)檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的胰島素抗體可以用抗原抗體雜交法，即用人的胰島素與從雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中提取的抗體雜交。小鼠雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，當(dāng)細(xì)胞數(shù)量太多時(shí)，需要進(jìn)行分瓶傳代培養(yǎng)，才能獲得更多的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)而獲得更多的單克隆抗體。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可以讓不同的細(xì)胞相互融合，突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 答案：(1) 能分泌抗人胰島素抗體的B 小鼠骨髓瘤細(xì)胞　滅活的病毒 (2)B細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　流動(dòng)性 (3)人胰島素　傳代 (4)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 7.(12分)生態(tài)農(nóng)業(yè)是指運(yùn)用生態(tài)學(xué)原理，在環(huán)境與經(jīng)濟(jì)協(xié)調(diào)發(fā)展的思想指導(dǎo)下，應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)建立起來(lái)的多層次、多功能的綜合農(nóng)業(yè)生產(chǎn)體系。例如：“?；~(yú)塘”和“豬沼果”(農(nóng)戶養(yǎng)豬，豬糞發(fā)酵產(chǎn)沼氣，沼氣發(fā)電或做燃?xì)夤┘矣?，沼渣培育果?生產(chǎn)模式。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)該農(nóng)業(yè)生產(chǎn)體系實(shí)現(xiàn)了_______________和物質(zhì)循環(huán)再生利用，充分利用了生態(tài)系統(tǒng)中的能量和物質(zhì)。 (2)同碳元素一樣，氮元素在生物群落和無(wú)機(jī)環(huán)境之間也是不斷循環(huán)的，生產(chǎn)中還要往農(nóng)田不斷施加氮肥，這與物質(zhì)循環(huán)矛盾嗎？________，為什么？__________________________________。 (3)在生態(tài)農(nóng)業(yè)體系中，農(nóng)作物也會(huì)遭受有害動(dòng)物的破壞，對(duì)有害動(dòng)物進(jìn)行防控的技術(shù)有多種。利用性引誘劑誘殺某種害蟲(chóng)的雄性個(gè)體，破壞害蟲(chóng)種群正常的_________，降低其種群密度，這種防治方法屬于_______，利用了生態(tài)系統(tǒng)的_______功能。 【解析】(1)“桑基魚(yú)塘”和“豬沼果”的生態(tài)模式下，豬的糞便、蠶沙、蠶蛹中的能量被充分利用，同時(shí)這些有機(jī)物被分解后產(chǎn)生的一些無(wú)機(jī)物又重新被植物利用，該農(nóng)業(yè)生產(chǎn)體系實(shí)現(xiàn)了對(duì)能量的多級(jí)利用和物質(zhì)循環(huán)再生利用，充分利用了生態(tài)系統(tǒng)中的能量和物質(zhì)。 (2)同碳元素一樣，氮元素在生物群落和無(wú)機(jī)環(huán)境之間也是不斷循環(huán)的，生產(chǎn)中還要往農(nóng)田不斷施加氮肥，這與物質(zhì)循環(huán)不矛盾，因?yàn)檗r(nóng)田土壤中的氮含量往往不足以使農(nóng)作物高產(chǎn)，加之農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出，其中的氮元素并不能都?xì)w還土壤，所以需要施加氮肥(或農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出，其中的氮元素并不能都?xì)w還土壤，所以需要施加氮肥)。 (3)性外激素多是由雌蟲(chóng)分泌并釋放，能引誘雄蟲(chóng)前來(lái)交配。性引誘劑就是模仿雌蟲(chóng)分泌的性外激素，用其來(lái)誘殺雄蟲(chóng)，破壞害蟲(chóng)種群正常的性別比例，降低其種群密度，這種防治方法屬于生物防治，利用了生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞功能。 答案：(1)對(duì)能量的多級(jí)利用　(2)不矛盾　農(nóng)田土壤中的氮含量往往不足以使農(nóng)作物高產(chǎn)，加之農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出，其中的氮元素并不能都?xì)w還土壤，所以需要施加氮肥(或農(nóng)產(chǎn)品源源不斷地自農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)輸出，其中的氮元素并不能都?xì)w還土壤，所以需要施加氮肥)　(3)性別比例　生物防治　信息傳遞 8.(14分)(2019涼山州模擬)“今又生”是我國(guó)為數(shù)不多的首創(chuàng)基因治療藥物之一，其本質(zhì)是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼裝得到重組病毒。人的P53蛋白可對(duì)癌變前的DNA損傷進(jìn)行修復(fù)，使其恢復(fù)正常，或誘導(dǎo)其進(jìn)入休眠狀態(tài)或細(xì)胞凋亡，阻止細(xì)胞癌變?！敖裼稚钡妮d體采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主細(xì)胞的基因組中，無(wú)遺傳毒性；載體經(jīng)基因工程改造后，只對(duì)細(xì)胞實(shí)施一次感染，不能復(fù)制，不能污染。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)在“今又生”的生產(chǎn)中，為了獲得更高的安全性能，在載體一般應(yīng)具備的條件中，科學(xué)家選擇性地放棄了一般載體都應(yīng)該具有的_____________。檢測(cè)P53基因的表達(dá)產(chǎn)物，還可以采用_______________技術(shù)。 (2)如果要獲取人類(lèi)基因組中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括_________和通過(guò)化學(xué)方法人工合成。目的基因的大量擴(kuò)增則可以采用_______________，該技術(shù)中需使用的一種特殊的酶是__________________。 (3)在研究中如果要獲得胚胎干細(xì)胞進(jìn)行研究，則胚胎干細(xì)胞可來(lái)源于囊胚期的_______________或胎兒的原始性腺，也可以通過(guò)___________技術(shù)得到重組細(xì)胞后再進(jìn)行相應(yīng)處理獲得。在哺乳動(dòng)物早期發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一個(gè)階段是__________________。 【解析】(1)為了防止載體的復(fù)制，需放棄載體中的復(fù)制原點(diǎn)；檢測(cè)外源基因的表達(dá)產(chǎn)物，可采取抗原-抗體雜交法。(2)獲取目的基因的方法有人工合成法和從基因文庫(kù)中獲取，目的基因擴(kuò)增的方法是PCR技術(shù)，該技術(shù)中特殊的酶是耐高溫的Taq酶。(3)胚胎干細(xì)胞來(lái)源于囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或胎兒的原始性腺，也可通過(guò)核移植技術(shù)得到重組細(xì)胞后經(jīng)相應(yīng)處理獲得，囊胚期的后一個(gè)階段是原腸胚期。 答案：(1)復(fù)制原點(diǎn)　抗原-抗體雜交 (2)從細(xì)胞中分離(或從基因文庫(kù)中提取) PCR技術(shù)　熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶) (3)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)　核移植　原腸胚