啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)(打包6套)新人教版.zip
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實(shí)驗(yàn)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段1 下列有關(guān)PCR技術(shù)的說法,錯(cuò)誤的是:ADNA復(fù)制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能從3端延伸DNA鏈B引物與DNA母鏈的關(guān)系是堿基互補(bǔ)配對(duì)C添加緩沖溶液的作用是維持pH基本不變DDNA聚合酶可以用來合成引物2 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬生物體內(nèi)的DNA復(fù)制,需要哪些條件()酶游離的脫氧核苷酸ATPDNA分子引物tRNA適宜的溫度適宜的酸堿度A BC D3 在PCR的實(shí)驗(yàn)操作中,下列說法正確的是()在微量離心管中添加各種試劑時(shí),只需要一個(gè)槍頭離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)用手指輕彈離心管壁離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部A BC D4 在PCR實(shí)驗(yàn)操作中,下列說法不正確的是()A在微量離心管中添加各種試劑時(shí),只需一個(gè)槍頭B離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止液體外溢C用手輕彈離心管壁的目的是使反應(yīng)液充分混合D離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果5 PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是()目的基因引物四種脫氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖體A BC D6 下列對(duì)操作過程的敘述,錯(cuò)誤的是()APCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌BPCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在20 儲(chǔ)存CPCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化D在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換7 PCR技術(shù)是在遺傳實(shí)驗(yàn)室中常見的一種DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的方法,利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是()A反復(fù)洗滌 B不被外源DNA污染C高壓滅菌 D在20保存8 回答下列關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的相關(guān)問題:(1)PCR與生物體內(nèi)的DNA復(fù)制有何區(qū)別?_。(2)PCR每次循環(huán)都可分為_、_和_三步。(3)_ _的發(fā)現(xiàn)和使用大大提高了PCR的效率,使PCR技術(shù)趨向_。(4)PCR通過控制_來控制雙鏈的_與_。(5)PCR反應(yīng)需要一定的緩沖溶液中提供_、分別與兩條模板結(jié)合的_、_種脫氧核苷酸、_的DNA聚合酶。(6)從第二輪循環(huán)開始,DNA聚合酶只能特異的復(fù)制_的DNA序列,使這段_的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。9 使用PCR儀具體實(shí)驗(yàn)操作順序應(yīng)為()設(shè)計(jì)好PCR儀的循環(huán)程序按配方準(zhǔn)備好各組分用微量移液器在微量離心管中依次加入各組分進(jìn)行PCR反應(yīng)離心使反應(yīng)液集中在離心管底部A BC D10 PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是()A反復(fù)洗滌 B外源DNA污染C高壓蒸汽滅菌 D在20 儲(chǔ)存參考答案:1 答案: D解析: 2 答案: D解析: 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬DNA復(fù)制時(shí),需要DNA聚合酶催化合成DNA子鏈;四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料;DNA母鏈為DNA復(fù)制的模板;還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等。3 答案: C解析: 在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;蓋嚴(yán)離心管口的蓋子,防止實(shí)驗(yàn)中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁,使反應(yīng)液混合均勻;離心目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部,提高反應(yīng)效果。4 答案: A解析: 在微量離心管中添加各種試劑時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須更換,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán),防止實(shí)驗(yàn)中脫落或液體外溢;離心10 s的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部,提高反應(yīng)效果。5 答案: C解析: PCR技術(shù)需要目的基因作為擴(kuò)增的模板,DNA聚合酶催化反應(yīng)的進(jìn)行,而引物是滿足DNA聚合酶起作用的需要,四種脫氧核苷酸是該過程的原料。6 答案: C解析: 為了防止外源DNA等因素的污染,PCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌;所用的緩沖液及酶應(yīng)分裝成小份保存,并使用一次性吸液槍頭,即A、B、D均正確。在冰箱中放置的緩沖液和酶取出后應(yīng)放在冰塊上緩慢融化,而不能迅速融化,故C錯(cuò)誤。7 答案: C解析: 通過對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染。8 答案: (1)PCR反應(yīng)不需要解旋酶,而生物體內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)需要解旋酶;PCR需要耐熱的DNA聚合酶,而生物體內(nèi)DNA聚合酶在高溫的時(shí)候會(huì)變性;PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的控制(2)變性退火延伸(3)Taq聚合酶自動(dòng)化(4)溫度解聚結(jié)合(5)DNA模板兩種引物四耐熱(6)處于兩個(gè)引物之間固定長(zhǎng)度解析: 本題主要考查關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的知識(shí),尤其對(duì)PCR技術(shù)的考查較細(xì)致,可參考。9 答案: C解析: PCR反應(yīng)的操作步驟一般分為準(zhǔn)備(包括配置配方及將各配方放于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上)移液混合離心反應(yīng),因PCR儀是一種自動(dòng)控制溫度的儀器,設(shè)計(jì)好循環(huán)程序就可以進(jìn)行反應(yīng)了。10 答案: C.解析: 通過對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染.4
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