啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 基礎(chǔ)知識：PCR原理1 DNA合成方向是（）A從子鏈的3端向5端延伸B從引物的5端開始延伸C從子鏈的5端向3端延伸D以上皆可2 下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是 ( )A利用DNA溶于酒精，而蛋白質(zhì)不溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對DNA沒有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，取濾液進(jìn)行以后的實驗D在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離3 酵母菌是一種真菌，與人們的日常生活密切相關(guān)，也是現(xiàn)代生物技術(shù)研究中常用的模式生物。果酒、面包的制作需要酵母菌，酵母菌可以用液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長情況與發(fā)酵食品的制作有密切關(guān)系。(1)土壤中富含各種微生物，將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上，可得到酵母菌。這一過程叫做_；為提高果酒的品質(zhì)，發(fā)酵時常采用人工培養(yǎng)的純凈菌種。實驗室中獲取純凈菌種的方法有_。(2)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用_來檢驗，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈_色。(3)突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是_ _加入DNA聚合酶的作用是_。(4)酵母細(xì)胞固定化可大大提高生產(chǎn)效率。固定酵母細(xì)胞時首先需要將干酵母放入_中活化，若制得的凝膠珠顏色過淺，可能是因為_ _。4 有關(guān)PCR的描述下列哪項不確切（）APCR是pilymerase chain rdaction三個單詞的首字母縮寫B(tài)1993年，美國生物化學(xué)家穆里斯因發(fā)明PCR技術(shù)而獲得度諾貝爾化學(xué)獎CPCR技術(shù)的突出優(yōu)點是快速、高效、靈活和易于操作DPCR實驗的原理十分復(fù)雜，操作也十分復(fù)雜5 DNA的復(fù)制需要引物，主要原因是（）A可加快DNA的復(fù)制速度B引物可與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合C引物的5端有助于DNA聚合酶的延伸DNA鏈DDNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈6 PCR技術(shù)中，如何設(shè)計引物（）APCR引物要根據(jù)需要擴(kuò)增的目標(biāo)DNA的堿基序列來設(shè)計BPCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對應(yīng)的RNA序列來設(shè)計CPCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對應(yīng)的tRNA的序列來設(shè)計D以上都不是正確方法7 變性作用是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，雙鏈解開，但共價鍵并未斷裂。引起變性的因素很多，升高溫度、過酸、過堿以及加入變性劑等都能造成核酸變性。PCR的反應(yīng)過程中，引起變性的因素是（）ApH 過高 BpH 過低C升高溫度 D加入酒精8 PCR技術(shù)利用了DNA的什么原理來控制DNA的解旋與結(jié)合()A特異性B穩(wěn)定性C熱變性D多樣性9 下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述不正確的是()A聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)B在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時，DNA的復(fù)制過程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似CPCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，只需提供：DNA模板以及四種脫氧核苷酸DPCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)分為變性、復(fù)性和延伸10 利用PCR技術(shù)可獲得目的基因，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不必知道基因的全部序列BPCR反應(yīng)體系中需添加磷酸、脫氧核糖和含氮的堿基作為原料CPCR 體系中需要添加從受體細(xì)胞中提取的解旋酶和DNA聚合酶DPCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)參考答案：1 答案： C解析： DNA聚合酶能從引物的3端開始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。2 答案： D解析： 利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA和蛋白質(zhì)分開。溫度過高也會影響DNA的特性，如PCR技術(shù)。在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大，但加入蒸餾水后，DNA溶解度降低，DNA析出，過濾后應(yīng)取其黏稠物進(jìn)行以后的實驗。蛋白酶能分解蛋白質(zhì)，而不能分解DNA。3 答案： (1)酵母菌的分離平板劃線法和稀釋涂布平板法 (2)重鉻酸鉀灰綠(3)使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始連接脫氧核苷酸催化DNA子鏈的合成(4)蒸餾水 海藻酸鈉濃度過低解析： 從近幾年的高考看，在有限的題量中，命題往往以一個中心事例為切入點，綜合考查幾項技術(shù)的應(yīng)用。本題以酵母菌為主線，綜合考查了酵母菌的分離培養(yǎng)、酒精發(fā)酵、PCR技術(shù)、酵母細(xì)胞固定化技術(shù)等內(nèi)容。第(1)小題考查了微生物的分離技術(shù)和接種方法。在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)需要的微生物的生長，目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物。微生物的純化培養(yǎng)(兩種接種方法)是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第(2)小題考查發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生的鑒定方法。發(fā)酵后取樣，可通過嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定，用重鉻酸鉀檢驗酒精的存在，其基本原理是酒精可使重鉻酸鉀的濃硫酸溶液顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。第(3)小題考查PCR技術(shù)的基礎(chǔ)知識。PCR技術(shù)中的引物可以是RNA或單鏈DNA分子片段，PCR技術(shù)需要設(shè)計兩種引物，分別與模板DNA兩條鏈相結(jié)合，使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始連接脫氧核苷酸。DNA聚合酶催化合成DNA子鏈。第(4)小題，在缺水的狀態(tài)下，微生物會處于休眠狀態(tài)。活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。觀察凝膠珠的顏色和形狀：如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。4 答案： D解析： 5 答案： D解析： DNA聚合酶不能從5端開始合成DNA，而只能從3端延伸DNA鏈，因此，DNA復(fù)制需要引物。當(dāng)引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的3端開始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。6 答案： A解析： DNA復(fù)制需要引物，引物是一小段DNA或RNA，能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對，故引物的設(shè)計要根據(jù)目標(biāo)DNA的堿基序列來確定。7 答案： C解析： 各選項的條件均能導(dǎo)致DNA分子變性，但在PCR反應(yīng)中，變性后還要進(jìn)行復(fù)性和延伸等過程，過酸、過堿、酒精等會導(dǎo)致反應(yīng)過程中的酶變性失活，使DNA擴(kuò)增不能進(jìn)行，因此，在PCR反應(yīng)中，選用升高溫度使DNA變性。8 答案： C解析： DNA分子在80100 的溫度范圍內(nèi)變性，雙鏈解開成單鏈，當(dāng)溫度慢慢降低時，又能重新結(jié)合形成雙鏈。9 答案： C解析： PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，耐熱的DNA聚合酶，同時通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行10 答案： A解析： A、用PCR方法擴(kuò)增目的基因時，只要設(shè)計出目的基因的引物，接下來即可自動進(jìn)行，因此不必知道基因的全部序列，A正確；BPCR反應(yīng)體系中需添加脫氧核糖核苷酸作為原料，B錯誤；CPCR過程中是通過高溫使氫鍵斷裂的，因此不需要加入解旋酶，C錯誤；DPCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了變性、復(fù)性、延伸，而不是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)，D錯誤故選：A4