啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質技術課題2多聚酶鏈式反應擴增DNA片段練習(打包6套)新人教版.zip
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基礎知識:PCR原理1 DNA中磷酸基團末端稱為()A3端 B.2端 C.5端 D.1端2 DNA復制過程中的前提是()A獲得引物 B.催化合成DNA子鏈C解旋 D.4種脫氧核苷酸3 催化合成DNA子鏈的是()A解旋酶 B.DNA聚合酶C引物 D.淀粉酶4 下列不屬于PCR技術的優(yōu)點的是()A簡單,易于操作B可以完全無限制擴增C實用性強,靈敏度高D快速、高效,并可自動化5 有關PCR反應的敘述中,正確的是()APCR反應所需要的引物只是RNABPCR反應所需要的原料是核糖核苷酸CPCR反應所需要的酶在60 時會變性DPCR反應需要在一定的緩沖液中進行6 在下列哪種溫度范圍內,DNA的雙螺旋結構能解開()A1020 B80100 C2030 D4060 7 下列關于DNA雙鏈的敘述錯誤的是()A通常將DNA的羥基末端稱為5端,而磷酸基團的末端稱為3端B通常將DNA的羥基末端稱為3端,而磷酸基團的末端稱為5端C通常DNA只能從3端延伸DNA鏈D通常DNA不能從5端延伸DNA鏈8 下列有關PCR的描述,不正確的是()A是一種酶促反應B引物決定了擴增的特異性CPCR反應中的目的片段一般以2n指數擴增D擴增對象是氨基酸序列9 由李建遠教授率領的科研團隊,在山東煙臺毓璜頂醫(yī)院成功克隆出5枚符合國際公認技術鑒定指標的人類囊胚請回答下列問題:(1)在卵子去核的過程中,李建元教授采用三維立體偏震光紡錘體成像系統(tǒng),對核DNA精確定位后,再用微激光主要對卵子的第一屏障打孔,才能精確剔除卵子細胞核這一屏障是指 A卵黃膜 B透明帶 C核膜(2)在培養(yǎng)皮膚纖維細胞和淋巴細胞時,需要用胰蛋白酶等處理,原因是 培養(yǎng)過程中除了保證無菌、無毒的環(huán)境外,為了防止培養(yǎng)過程中的污染,通常還要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的 (3)通過克隆胚胎進而用其衍生而來的器官,來取代患者本人病變的器官,就會避免免疫排異反應的發(fā)生,根本原因是 (4)獲得目的基因后可采用 技術進行擴增大部分物種的基因能拼接在一起,是因為 檢測目的基因是否成功導入植物細胞,可采用的生物技術是 10 要使PCR反應在體外的條件下順利地進行,需要嚴格的控制( )A氧氣的濃度 B.酸堿度 C.溫度 D.大氣的濕度參考答案:1 答案: C解析: DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將DNA的羥基末端稱為3端,而磷酸基團的末端稱為5端。2 答案: C解析: 在DNA的復制過程中,雙鏈的解開是進行DNA復制的前提。3 答案: B解析: 在DNA復制過程中,起催化作用的是DNA聚合酶。4 答案: B解析: PCR技術要設計引物,因此擴增具有特異性,靈敏度很高。而應用Taq DNA聚合酶的PCR儀可自動化,操作簡單。PCR技術能在體外迅速擴增DNA片段,快速高效,往往被誤認為可以無限制擴增,其實PCR的循環(huán)次數一般以2535次循環(huán)為宜,當反應超過35次循環(huán)時,PCR產物也不再增加。5 答案: D解析: PCR反應所需要的引物是DNA或RNA;原料是四種脫氧核糖核苷酸;變性是在高溫下進行的,所用Taq聚合酶的特點是耐高溫,即在高溫下不變性。6 答案: B解析: DNA在80 以上才會變性,雙螺旋結構能解開。7 答案: A解析: 本題考查DNA雙鏈的結構與復制。通常將DNA的羥基末端稱為3端,磷酸基團末端稱為5端。8 答案: D解析: PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術,它以極少量的DNA為模板,以四種脫氧核苷酸為原料,在引物作用下使DNA聚合酶從引物的3端連接脫氧核苷酸,短時間內迅速復制上百萬份的DNA拷貝,其擴增產量ya2n,a代表模板DNA量,y代表DNA片段擴增后的理論拷貝數,n代表循環(huán)次數;在擴增過程中,被擴增的是DNA序列,而不是氨基酸序列,因此D項錯誤。9 答案: (1)B (2)將細胞分散開來解除接觸抑制 抗生素(3)遺傳物質相同(4)PCR 大部分生物的遺傳物質都是DNA,且都是雙螺旋結構 DNA分子雜交解析: (1)對卵子的第一屏障打孔,才能精確剔除卵子細胞核,而這一屏障是透明帶,故選:B(2)在培養(yǎng)皮膚纖維細胞和淋巴細胞時,需要用胰蛋白酶等處理,原因是將細胞分散解除接觸性抑制培養(yǎng)過程中通常在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,防止培養(yǎng)過程中的污染(3)通過克隆胚胎進而用其衍生而來的器官,來取代患者本人病變的器官,由于遺傳基因(物質)完全相同,則避免免疫排異反應的發(fā)生(4)獲得目的基因后可采用PCR技術進行擴增;大部分物種的基因能拼接在一起,原因是大部分生物的遺傳物質都是DNA而且都是雙螺旋結構;采用DNA分子雜交技術檢測目的基因是否成功導入植物細胞10 答案: C解析: 要使PCR反應在體外的條件下順利地進行,需要嚴格的控制溫度,因為酶受溫度影響3基礎知識:PCR的反應過程1 在PCR反應中,只有一個DNA的片段作為模板,經過一次循環(huán)后,含引物的DNA單鏈占DNA總鏈數的()A1/2 B.1/4 C.1 D.1/82 多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。請回答下列問題:(1)DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將 的末端稱為5,端,當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后,DNA聚合酶就能從引物的 開始延伸DNA鏈。(2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題,但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀80年代,科學家從一種Taq細菌中分離到 ,它的發(fā)現和應用解決了上述問題。要將Taq細菌從其它普通的微生物中分離出來。所用的培養(yǎng)基叫 。(3)PCR的每次循環(huán)可以分為 三步。假設在PCR反應中,只有一個DNA片段作為模板,請計算在5次循拜后,反應物中大約有 個這樣的DNA片段。(4)簡述PCR技術的主要應用(要求答2項)_。3 在PCR擴增循環(huán)過程中,下列說法正確的是()A在每次循環(huán)中,變性所用的時間是一樣多的B在每次循環(huán)中,復性所用的時間是一樣多的C在每次循環(huán)中,延伸所用的時間是一樣多的D以上說法都不正確4 PCR技術的操作步驟依次是()A高溫變性、中溫延伸、低溫退火B(yǎng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸C中溫延伸、高溫變性、低溫退火D中溫延伸、低溫退火、高溫變性5 分離血紅蛋白溶液時,離心后試管的溶液分四層,血紅蛋白在第()層。A一 B二C三 D四6 在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A防止血紅蛋白被氧化B血紅蛋白是一種兩性物質,需要酸中和C磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程D讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內,維持其結構和功能7 在PCR的實驗操作中,下列說法正確的是()PCR所用的緩沖液和酶要在常溫下儲存離心管的蓋子一定要蓋嚴用手指輕彈離心管壁離心的目的是使反應液集中在離心管的底部A B. C. D.8 PCR過程與細胞內的DNA復制過程相比,主要有兩點不同,它們是()PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNAPCR過程不需要DNA聚合酶PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現的PCR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進行復制A B. C. D.9 PCR技術的操作步驟依次是( )A高溫變性、中溫延伸、低溫復性 B. 高溫變性、低溫復性、中溫延伸C中溫延伸、高溫變性、低溫復性 D. 中溫延伸、低溫復性、高溫變性10 關于DNA粗提取與鑒定實驗的有關說法正確的是( ) 充分溶解DNA的鹽溶液是0.14mol/L的NaCl溶液 實驗中提取較純凈的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點 對最后提取出DNA用二苯胺試劑鑒定時需用酒精燈直接加熱 實驗操作過程中先后兩次加入蒸餾水的作用相同參考答案:1 答案: B解析: 經過一次循環(huán)后,DNA單鏈共4條,含引物的DNA單鏈只有1條。2 答案: 磷酸基團 3端 耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養(yǎng)基 變性、復性和延伸 32 遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學、基因克隆和DNA序列測定等(要求答2項)解析: 本題考查PCR技術有關知識。DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將含有游離的磷酸基團的末端稱為5,端,而DNA聚合酶從引物的3開始延伸DNA鏈;在體外擴增DNA時不用解旋酶而是用熱變性處理的方法打開DNA雙鏈,因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶;PCR的每次循環(huán)可以分為變性、復性和延伸三個步驟,五次循環(huán)后得到25個DNA片段。PCR技術有廣泛的應用,可以用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、克隆基因等方面。3 答案: D解析: 4 答案: B解析: PCR技術的操作步驟依次是:高溫變性、低溫退火、中溫延伸。5 答案: C解析: 分離血紅蛋白溶液時,離心后可明顯觀察到試管中液體分四層,從上向下數依次為:無色透明的甲苯層,白色薄層固體(脂溶性物質的沉淀層)、紅色透明液體(血紅蛋白水溶液)、暗紅色沉淀物(其他雜質),故血紅蛋白分布于第三層。6 答案: D解析: 利用磷酸緩沖液模擬細胞內pH環(huán)境,保證血紅蛋白的正常結構和功能,便于分離觀察和研究。7 答案: C解析: PCR所用的緩沖液和酶需裝成小份,并在-20儲存;蓋嚴離心管口的蓋子,防止實驗中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側壁,使反應液混合均勻;離心的目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效果。8 答案: C解析: PCR過程與細胞內的DNA復制過程相比較,主要有兩點不同:(1)PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNA,長度通常為2030個核苷酸。(2)PCR過程中,DNA解旋不依賴解旋酶,而是通過對反應溫度的控制來實現的9 答案: B10 答案: B3實驗多聚酶鏈式反應擴增DNA片段1 下列有關PCR技術的說法,錯誤的是:ADNA復制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能從3端延伸DNA鏈B引物與DNA母鏈的關系是堿基互補配對C添加緩沖溶液的作用是維持pH基本不變DDNA聚合酶可以用來合成引物2 在實驗室內模擬生物體內的DNA復制,需要哪些條件()酶游離的脫氧核苷酸ATPDNA分子引物tRNA適宜的溫度適宜的酸堿度A BC D3 在PCR的實驗操作中,下列說法正確的是()在微量離心管中添加各種試劑時,只需要一個槍頭離心管的蓋子一定要蓋嚴用手指輕彈離心管壁離心的目的是使反應液集中在離心管的底部A BC D4 在PCR實驗操作中,下列說法不正確的是()A在微量離心管中添加各種試劑時,只需一個槍頭B離心管的蓋子一定要蓋嚴,防止液體外溢C用手輕彈離心管壁的目的是使反應液充分混合D離心的目的是使反應液集中在離心管底部,提高反應效果5 PCR技術擴增DNA,需要的條件是()目的基因引物四種脫氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖體A BC D6 下列對操作過程的敘述,錯誤的是()APCR反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行高壓滅菌BPCR所用的緩沖液和酶應分裝成小份,并在20 儲存CPCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化D在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換7 PCR技術是在遺傳實驗室中常見的一種DNA片段進行體外擴增的方法,利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進行的關鍵步驟是()A反復洗滌 B不被外源DNA污染C高壓滅菌 D在20保存8 回答下列關于DNA復制與PCR技術的相關問題:(1)PCR與生物體內的DNA復制有何區(qū)別?_。(2)PCR每次循環(huán)都可分為_、_和_三步。(3)_ _的發(fā)現和使用大大提高了PCR的效率,使PCR技術趨向_。(4)PCR通過控制_來控制雙鏈的_與_。(5)PCR反應需要一定的緩沖溶液中提供_、分別與兩條模板結合的_、_種脫氧核苷酸、_的DNA聚合酶。(6)從第二輪循環(huán)開始,DNA聚合酶只能特異的復制_的DNA序列,使這段_的序列呈指數擴增。9 使用PCR儀具體實驗操作順序應為()設計好PCR儀的循環(huán)程序按配方準備好各組分用微量移液器在微量離心管中依次加入各組分進行PCR反應離心使反應液集中在離心管底部A BC D10 PCR實驗中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進行的關鍵步驟是()A反復洗滌 B外源DNA污染C高壓蒸汽滅菌 D在20 儲存參考答案:1 答案: D解析: 2 答案: D解析: 在實驗室內模擬DNA復制時,需要DNA聚合酶催化合成DNA子鏈;四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料;DNA母鏈為DNA復制的模板;還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等。3 答案: C解析: 在微量離心管中添加反應成分時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實驗的準確性;蓋嚴離心管口的蓋子,防止實驗中外源DNA污染;用手指輕輕彈擊管的側壁,使反應液混合均勻;離心目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效果。4 答案: A解析: 在微量離心管中添加各種試劑時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須更換,確保實驗的準確性;離心管的蓋子一定要蓋嚴,防止實驗中脫落或液體外溢;離心10 s的目的是使反應液集中在離心管底部,提高反應效果。5 答案: C解析: PCR技術需要目的基因作為擴增的模板,DNA聚合酶催化反應的進行,而引物是滿足DNA聚合酶起作用的需要,四種脫氧核苷酸是該過程的原料。6 答案: C解析: 為了防止外源DNA等因素的污染,PCR反應中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進行高壓滅菌;所用的緩沖液及酶應分裝成小份保存,并使用一次性吸液槍頭,即A、B、D均正確。在冰箱中放置的緩沖液和酶取出后應放在冰塊上緩慢融化,而不能迅速融化,故C錯誤。7 答案: C解析: 通過對PCR實驗中所用儀器和試劑進行高壓滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染。8 答案: (1)PCR反應不需要解旋酶,而生物體內DNA復制時需要解旋酶;PCR需要耐熱的DNA聚合酶,而生物體內DNA聚合酶在高溫的時候會變性;PCR一般要經歷三十多次循環(huán),而生物體內DNA復制需要生物體自身的控制(2)變性退火延伸(3)Taq聚合酶自動化(4)溫度解聚結合(5)DNA模板兩種引物四耐熱(6)處于兩個引物之間固定長度解析: 本題主要考查關于DNA復制與PCR技術的知識,尤其對PCR技術的考查較細致,可參考。9 答案: C解析: PCR反應的操作步驟一般分為準備(包括配置配方及將各配方放于實驗臺上)移液混合離心反應,因PCR儀是一種自動控制溫度的儀器,設計好循環(huán)程序就可以進行反應了。10 答案: C.解析: 通過對PCR實驗中所用儀器和試劑進行高壓蒸汽滅菌,可以避免外源DNA等因素的污染.4基礎知識:PCR原理1 DNA合成方向是()A從子鏈的3端向5端延伸B從引物的5端開始延伸C從子鏈的5端向3端延伸D以上皆可2 下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是 ( )A利用DNA溶于酒精,而蛋白質不溶于酒精,可將DNA與蛋白質分離B利用高溫能使蛋白質變性,卻對DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質分離C在溶有DNA的物質的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,輕輕攪拌后過濾,取濾液進行以后的實驗D在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質分離3 酵母菌是一種真菌,與人們的日常生活密切相關,也是現代生物技術研究中常用的模式生物。果酒、面包的制作需要酵母菌,酵母菌可以用液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)來培養(yǎng),培養(yǎng)液中酵母菌種群的增長情況與發(fā)酵食品的制作有密切關系。(1)土壤中富含各種微生物,將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上,可得到酵母菌。這一過程叫做_;為提高果酒的品質,發(fā)酵時常采用人工培養(yǎng)的純凈菌種。實驗室中獲取純凈菌種的方法有_。(2)果汁發(fā)酵后是否有酒精產生,可以用_來檢驗,在酸性條件下,該物質與酒精反應呈_色。(3)突變菌往往帶有一些特殊的基因。在獲得這些基因的過程中,PCR技術相當重要。PCR擴增反應中加入引物的作用是_ _加入DNA聚合酶的作用是_。(4)酵母細胞固定化可大大提高生產效率。固定酵母細胞時首先需要將干酵母放入_中活化,若制得的凝膠珠顏色過淺,可能是因為_ _。4 有關PCR的描述下列哪項不確切()APCR是pilymerase chain rdaction三個單詞的首字母縮寫B(tài)1993年,美國生物化學家穆里斯因發(fā)明PCR技術而獲得度諾貝爾化學獎CPCR技術的突出優(yōu)點是快速、高效、靈活和易于操作DPCR實驗的原理十分復雜,操作也十分復雜5 DNA的復制需要引物,主要原因是()A可加快DNA的復制速度B引物可與DNA母鏈通過堿基互補配對結合C引物的5端有助于DNA聚合酶的延伸DNA鏈DDNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈6 PCR技術中,如何設計引物()APCR引物要根據需要擴增的目標DNA的堿基序列來設計BPCR引物要根據已知的DNA序列對應的RNA序列來設計CPCR引物要根據已知的DNA序列對應的tRNA的序列來設計D以上都不是正確方法7 變性作用是指核酸雙螺旋結構被破壞,雙鏈解開,但共價鍵并未斷裂。引起變性的因素很多,升高溫度、過酸、過堿以及加入變性劑等都能造成核酸變性。PCR的反應過程中,引起變性的因素是()ApH 過高 BpH 過低C升高溫度 D加入酒精8 PCR技術利用了DNA的什么原理來控制DNA的解旋與結合()A特異性B穩(wěn)定性C熱變性D多樣性9 下列有關PCR技術的敘述不正確的是()A聚合酶鏈式反應,是用DNA聚合酶在體外擴增DNA片段的技術B在用PCR技術擴增DNA時,DNA的復制過程與細胞內DNA的復制類似CPCR反應需在一定的緩沖溶液中進行,只需提供:DNA模板以及四種脫氧核苷酸DPCR一般經歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)分為變性、復性和延伸10 利用PCR技術可獲得目的基因,下列相關敘述錯誤的是()A用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列BPCR反應體系中需添加磷酸、脫氧核糖和含氮的堿基作為原料CPCR 體系中需要添加從受體細胞中提取的解旋酶和DNA聚合酶DPCR反應中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應參考答案:1 答案: C解析: DNA聚合酶能從引物的3端開始延伸DNA鏈,DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。2 答案: D解析: 利用DNA不溶于酒精,而蛋白質溶于酒精,可將DNA和蛋白質分開。溫度過高也會影響DNA的特性,如PCR技術。在物質的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大,但加入蒸餾水后,DNA溶解度降低,DNA析出,過濾后應取其黏稠物進行以后的實驗。蛋白酶能分解蛋白質,而不能分解DNA。3 答案: (1)酵母菌的分離平板劃線法和稀釋涂布平板法 (2)重鉻酸鉀灰綠(3)使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始連接脫氧核苷酸催化DNA子鏈的合成(4)蒸餾水 海藻酸鈉濃度過低解析: 從近幾年的高考看,在有限的題量中,命題往往以一個中心事例為切入點,綜合考查幾項技術的應用。本題以酵母菌為主線,綜合考查了酵母菌的分離培養(yǎng)、酒精發(fā)酵、PCR技術、酵母細胞固定化技術等內容。第(1)小題考查了微生物的分離技術和接種方法。在培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進需要的微生物的生長,目的是從眾多微生物中分離出所需要的微生物。微生物的純化培養(yǎng)(兩種接種方法)是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第(2)小題考查發(fā)酵后是否有酒精產生的鑒定方法。發(fā)酵后取樣,可通過嗅味和品嘗進行初步鑒定,用重鉻酸鉀檢驗酒精的存在,其基本原理是酒精可使重鉻酸鉀的濃硫酸溶液顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。第(3)小題考查PCR技術的基礎知識。PCR技術中的引物可以是RNA或單鏈DNA分子片段,PCR技術需要設計兩種引物,分別與模板DNA兩條鏈相結合,使DNA聚合酶能夠從引物的3端開始連接脫氧核苷酸。DNA聚合酶催化合成DNA子鏈。第(4)小題,在缺水的狀態(tài)下,微生物會處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)。剛形成的凝膠珠應在CaCl2溶液中浸泡一段時間,以便形成穩(wěn)定的結構。觀察凝膠珠的顏色和形狀:如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色,說明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細胞數目較少;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,需要再作嘗試。4 答案: D解析: 5 答案: D解析: DNA聚合酶不能從5端開始合成DNA,而只能從3端延伸DNA鏈,因此,DNA復制需要引物。當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結合后,DNA聚合酶就能從引物的3端開始延伸DNA鏈,DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。6 答案: A解析: DNA復制需要引物,引物是一小段DNA或RNA,能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對,故引物的設計要根據目標DNA的堿基序列來確定。7 答案: C解析: 各選項的條件均能導致DNA分子變性,但在PCR反應中,變性后還要進行復性和延伸等過程,過酸、過堿、酒精等會導致反應過程中的酶變性失活,使DNA擴增不能進行,因此,在PCR反應中,選用升高溫度使DNA變性。8 答案: C解析: DNA分子在80100 的溫度范圍內變性,雙鏈解開成單鏈,當溫度慢慢降低時,又能重新結合形成雙鏈。9 答案: C解析: PCR反應需要在一定的緩沖溶液中進行,需提供DNA模板,分別與兩條模板鏈相結合的兩種引物,四種脫氧核苷酸,耐熱的DNA聚合酶,同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行10 答案: A解析: A、用PCR方法擴增目的基因時,只要設計出目的基因的引物,接下來即可自動進行,因此不必知道基因的全部序列,A正確;BPCR反應體系中需添加脫氧核糖核苷酸作為原料,B錯誤;CPCR過程中是通過高溫使氫鍵斷裂的,因此不需要加入解旋酶,C錯誤;DPCR反應中溫度的周期性改變是為了變性、復性、延伸,而不是為了DNA聚合酶催化不同的反應,D錯誤故選:A4基礎知識:PCR的反應過程1 下列對PCR過程中“溫度的控制”的敘述中不正確的是()APCR反應需要高溫,是為了確保模板是單鏈B延伸的溫度必須大于復性溫度,而小于變性溫度C要用耐高溫的DNA聚合酶D需要耐高溫的解旋酶2 洗滌紅細胞時,離心所采用的方法是()A低速長時間離心 B低速短時間離心C高速長時間離心 D高速短時間離心3 下列各項中,一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質中的分離度的是()A層析柱高 B層析柱的直徑C緩沖溶液 D樣品的分布4 聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。PCR過程一般經歷下述三十多次循環(huán):95 下使模板DNA變性、解鏈55 下復性(引物與DNA模板鏈結合)72 下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關PCR過程的敘述中不正確的是()A變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現B復性過程中引物與DNA模板鏈的結合依靠互補配對原則完成C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸DPCR與細胞內DNA復制相比,所需要酶的最適溫度較高5 下列關于PCR技術的描述,錯誤的是( )A以DNA復制為基礎而建立起來的技術B利用PCR技術可完全無誤的擴增基因C反應體系需要模板、引物、四種脫氧核苷酸、耐熱DNA聚合酶和緩沖溶液D以變性、復性和延伸為一個周期6 DNA的雙螺旋結構解開的溫度范圍是()。A1020 B80100 C2030 D4060 7 在PCR擴增的實驗中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實驗得到的產物中,卻有兩種DNA。其原因可能是()A基因突變BTaq聚合酶發(fā)生變異C基因污染D溫度過高8 PCR儀實質上是一臺自動調控溫度的儀器,下列關于它調控不同溫度的目的敘述錯誤的是()A94 C,使DNA分子變性,解開螺旋B55 C,引物與作為模板的單鏈DNA特定部位相互配對、結合C72 C,使DNA分子開始復制,延伸D72 C,使DNA分子恢復雙螺旋結構,恢復活性9 PCR是一種體外迅速擴增DNA片段的技術,其基本原理和過程與細胞內DNA的復制類似下列關于兩者共同點的敘述,不正確的是()邊解旋邊復制遵循堿基互補配對原則需要引物過程可分為變性、復性、延伸等步驟ABCD10 PCR技術又稱聚合酶鏈式反應,現在已成為分子生物學實驗室的一種常規(guī)手段,它可以在體外很短的時間內將DNA大量擴增。你認為以下符合在體外進行PCR反應條件的一組是( ) 穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 DNA模板 合成引物 四種脫氧核苷酸 DNA聚合酶 DNA解旋酶 限制性核酸內切酶 溫控設備A BC D參考答案:1 答案: D解析: PCR是體外DNA擴增技術,DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解體。復性前,在耐高溫的Taq DNA聚合酶的作用下根據堿基互補配對原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復性溫度但小于變性溫度。2 答案: B解析: 洗滌紅細胞時,轉速要低,時間要短,否則白細胞會與之一起沉淀,達不到分離目的。3 答案: B解析: 分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱必須有適宜的高度,分離度與柱高相關。樣品的分布也影響分離度,緩沖溶液的pH影響蛋白質所帶的電荷,因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會影響分離度。4 答案: C解析: 變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現;復性過程中引物與DNA模板鏈的結合依靠互補配對原則完成;延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸;PCR與細胞內DNA復制相比,所需要酶的最適溫度較高5 答案: B解析: 利用PCR技術也可能會出現擴增的基因出現錯誤。故選B6 答案: B解析: 蛋白質大多不能忍受6080 的高溫,而DNA在80 以上才會變性。7 答案: C解析: 實驗中得到兩種DNA的原因可能是靶細胞基因污染造成的,所以在實驗中,必須做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。8 答案: D解析: PCR利用DNA熱變性的原理,當溫度上升到94 C時,雙鏈DNA解旋為單鏈,A項正確;當溫度下降到4060 C左右時,兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結合,B項正確;當溫度上升到72 左右時,在DNA聚合酶的作用下,根據堿基互補配對原則合成新的DNA鏈,從而實現DNA延伸,故C正確,D錯誤。9 答案: C解析: 解:PCR反應和體內DNA復制都是邊解旋邊復制,故正確;PCR反應和體內DNA復制都遵循堿基互補配對原則,故正確;PCR反應需要引物,但體內DNA復制不需要引物,故錯誤;PCR過程可分為變性、復性、延伸等步驟,而體內DNA復制沒有這些步驟,故錯誤故選C10 答案: D解析: 試題分析:在PCR技術中,需要的條件有模板、引物、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶,此外還需要適宜的溫度和pH,故D正確??键c:本題主要考查PCR的過程,意在考查考生能理解所學知識的要點,把握知識間的內在聯系的能力。3實驗多聚酶鏈式反應擴增DNA片段1 在進行PCR操作時,如果槍頭受到污染,則會影響到A 復制循環(huán)速度B. DNA分子純度C. DNA分子大小 D. 酶催化活性2 下列關于PCR技術的敘述,正確的是( )A PCR技術建立在對擴增的目的基因序列完全已知的基礎上B 該技術需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶C 該技術需要一對特異性的引物,要求一對引物的序列是互補的D 該技術應用體內DNA雙鏈復制原理,也需要模板、原料、能量、酶等條件3 PCR實驗中用到微量離心管、緩沖液和蒸餾水,使用前必須進行的關鍵步驟是()A反復洗滌 B用酒精擦洗C高壓滅菌 D在20 保存4 DNA在波長為多大的時候有一強烈的吸收峰()A260nm B240nm C280nm D300nm5 PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。下列防止污染的辦法中不包括的是()A將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環(huán)擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進行B吸樣槍吸樣要慢,吸樣時盡量一次性完成,槍頭小套、小離心管應一次性使用,以免交叉污染C所有PCR試劑都應放置于大瓶分裝,以減少重復加樣次數,避免污染機會DPCR試劑、PCR反應液應與樣品及PCR產物分開保存,不應放于同一冰盒或同一冰箱6 在PCR擴增的實驗中,加入一種提取物(一種模板DNA片段),但實驗得到的產物卻有2種DNA。其原因可能是()A基因突變 BTaq聚合酶發(fā)生變異C基因污染 D溫度過高7 關于PCR技術的應用,錯誤的一項是()A古生物學、刑偵破案、DNA序列測定B診斷遺傳病、基因克隆、古生物學CDNA序列測定、基因克隆、刑偵破案D診斷遺傳病、合成核苷酸、DNA序列測定8 PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實際上是一種能自動調控溫度的儀器,對PCR過程中“溫度的控制”的說法中錯誤的是()A酶促反應需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈B延伸的溫度必須大于復性溫度,而小于變性溫度CDNA聚合酶不具熱變性,要用耐高溫的聚合酶DDNA解旋酶不具熱變性,為了確保模板是單鏈9 關于DNA的復制,下列敘述正確的是()ADNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5端延伸DNA鏈BDNA復制不需要引物C引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合DDNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸10 多聚酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。PCR過程一般經歷下述三十多次循環(huán):95下使模板DNA變性、解鏈55下復性(引物與DNA模板鏈結合)72下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關PCR過程的敘述中不正確的是:( ) A變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現B復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸DPCR與細胞內DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高參考答案:1 答案: B解析: 2 答案: D解析: 3 答案: C解析: 在PCR實驗中,為了避免外源DNA等因素的污染,微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等在使用前必須進行高壓滅菌。同時也不能忽視其他操作步驟,如緩沖液和酶應該分裝成小份,并且在20 保存。4 答案: A解析: 5 答案: C解析: 所有的PCR試劑都應放置于小瓶分裝,一次性用完,避免因多次使用造成污染。6 答案: C解析: 其原因可能是基因污染。在PCR實驗中,一定要做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡化操作程序、使用一次性吸頭等,盡量避免基因污染。7 答案: D.解析: PCR技術在醫(yī)學上用于遺傳病的基因診斷、基因克隆、DNA序列測定,法醫(yī)上用于刑偵破案,古生物學上用于生物化石樣品分析.PCR技術是以4種脫氧核苷酸為原料,合成雙鏈DNA的過程,PCR技術不能合成核苷酸.8 答案: D.解析: PCR是一種體外DNA擴增技術.DNA雙鏈的解開不需要解旋酶,靠高溫使其變性,雙螺旋結構解體,雙鏈分開,延伸時,在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據堿基互補配對原則合成新的DNA,因此延伸的溫度要大于復性溫度小于變性溫度.9 答案: C解析: 由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3端開始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈是依據堿基互補配對原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5端向3端延伸。10 答案: C3
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