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大題1題多練十　現(xiàn)代生物科技專題 1.(2018重慶4月調(diào)研測試,38)透明質(zhì)酸酶在臨床上常用作藥物滲透劑,目前主要從動(dòng)物組織中提取。科研人員嘗試將透明質(zhì)酸酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使其得到高效表達(dá)。下圖中NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶,重疊延伸PCR是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。據(jù)圖回答下列問題。 　　　　　　　　　　　　　　　　 (1)步驟①的目的是保護(hù)　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,PCR的原理是　　　　　　　　　　　　;PCR擴(kuò)增的過程是:目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后　　　　　　　　　　　　　　　　　,如此重復(fù)循環(huán)。 (2)若圖中的透明質(zhì)酸酶基因來自cDNA文庫,則在進(jìn)行步驟②之前需在其前、后端分別接上特定的　　　　　　　　　,否則該基因就不能轉(zhuǎn)錄。步驟②需要用　　　　　　　　　　(酶)切割質(zhì)粒。 (3)圖中A是　　　　　　　　　　　;早期實(shí)驗(yàn)人員利用大腸桿菌作為受體,后來發(fā)現(xiàn)用毛霉或酵母菌作受體更具優(yōu)勢,從生物體結(jié)構(gòu)角度分析,最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定地維持和表達(dá)其遺傳特性,只有通過檢測和鑒定才能知道。檢測轉(zhuǎn)基因生物DNA上是否插入了目的基因的方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 答案:(1)透明質(zhì)酸酶基因,防止NcoⅠ破壞目的基因　DNA雙鏈復(fù)制　在DNA聚合酶作用下延伸 (2)啟動(dòng)子、終止子　NcoⅠ和XhoⅠ (3)基因表達(dá)載體　毛霉或酵母菌是真核細(xì)胞,有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對初始形成的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工 (4)利用目的基因制作成的探針進(jìn)行DNA分子雜交 2.(2018黑龍江哈爾濱第三中學(xué)二模,38)草莓是無性繁殖的作物,感染的病毒很容易傳播給后代,病毒在作物體內(nèi)逐年積累,就會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量變低,品質(zhì)變差?？梢岳眉?xì)胞工程培育脫毒草莓或利用基因工程培育抗病毒草莓。回答下列問題。 (1)為了獲得脫毒草莓,外植體往往取自植物分生區(qū)附近(如莖尖),其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。利用植物組織培養(yǎng),能獲得試管苗,其原理是細(xì)胞具有全能性,細(xì)胞具有全能性的原因是　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)植物組織培養(yǎng)過程中可出現(xiàn)不同的結(jié)果,這些結(jié)果的出現(xiàn)主要與培養(yǎng)基中兩種激素有關(guān),這兩種激素是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;在培養(yǎng)形成完整新植株過程中,對這兩種激素的調(diào)控關(guān)鍵是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)構(gòu)建的基因表達(dá)載體除了含有標(biāo)記基因外,還必須有　　　　　　　　　　　　　　　　　。草莓是雙子葉植物,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞采用最多的方法是　　　　　　　　　　　　　。 (4)要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,檢測方法是　　　　　　　　　　　　　　　。用　　　　　　　　　　　　　　　　　　　作為探針與草莓基因組DNA雜交,如果　　　　　　　　　　　,就表明目的基因已插入染色體DNA中。 答案:(1)分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無病毒　具有草莓全部遺傳信息 (2)生長素和細(xì)胞分裂素　恰當(dāng)調(diào)控好不同的培養(yǎng)期培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的濃度和比例 (3)啟動(dòng)子、終止子、目的基因　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 (4)DNA分子雜交技術(shù)　放射性同位素標(biāo)記的目的基因　顯示出雜交帶 3.2018年1月25日,我國研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長類動(dòng)物食蟹猴,可作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。下圖為用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育食蟹猴的操作過程,請回答下列問題。 (1)2001年,美國科學(xué)家已經(jīng)培育出胚胎細(xì)胞核移植猴。獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)進(jìn)行過程①時(shí),為提供成纖維細(xì)胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境,應(yīng)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)措施是　　　　　　　　　　　　,其目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)據(jù)圖分析,過程③是利用　　　　　　　　法將成纖維細(xì)胞注入猴去核的MⅡ中期卵母細(xì)胞的　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)圖中過程⑤的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在　　　　　　　　條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。 (5)上述實(shí)驗(yàn)的突破之處是使用了去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,在確定其作用時(shí),研究人員用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞得到A組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)向融合細(xì)胞中注入去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的融合細(xì)胞得到B組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 下圖中X為融合細(xì)胞發(fā)育成的胚胎數(shù),Y為囊胚數(shù),Z為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)數(shù)。分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知,Kd4d的mRNA的作用是既能提高　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,又能提高　　　　　　　　　　　　　　　　　。 答案:(1)體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性較難 (2)定期更換培養(yǎng)液　防止成纖維細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累對細(xì)胞自身造成危害 (3)顯微注射　卵細(xì)胞膜與透明帶之間 (4)相同生理 (5)融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率　囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率