高中生物專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)3.2月季的花藥培養(yǎng)課件新人教版.ppt
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目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 1 能說出被子植物花粉發(fā)育的過程及花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 2 說出影響花藥培養(yǎng)的因素 3 學(xué)會花藥培養(yǎng)的基本技術(shù) 4 能用月季或其他植物的花藥進(jìn)行培養(yǎng) 目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 一 二 三 四 一 被子植物的花粉發(fā)育1 被子植物的花粉是在花藥中由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的 花粉是單倍體的生殖細(xì)胞 2 被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時期 單核期和雙核期等階段 目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 一 二 三 四 二 產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 兩種途徑之間沒有絕對的界限 主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比 目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 一 二 三 四 三 影響花藥培養(yǎng)的因素1 誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率高低的主要影響因素是材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 2 材料的選擇與不同植物 同種植物親本的生理狀況 以及花粉發(fā)育時期有關(guān) 從花藥來看 應(yīng)當(dāng)選擇花期早期的花藥 從花粉來看 應(yīng)當(dāng)選擇單核期的花粉 從花蕾來看 應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾 此時期的營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)比較好 對離體刺激敏感 為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難 提示 花瓣松動后 微生物就可能侵入花藥 3 親本植株的生長條件 材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對誘導(dǎo)成功率都有一定影響 目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 一 二 三 四 四 實驗操作1 材料的選取選擇花藥時 一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育時期 常用的方法有醋酸洋紅法和焙花青 鉻礬法 它們分別可以將細(xì)胞核染成紅色和藍(lán)黑色 2 材料的消毒花蕾 用體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精浸泡大約30s 在無菌水中清洗 用無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分 放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 的氯化汞溶液中2 4min 用無菌水沖洗3 5次 目標(biāo)導(dǎo)航 預(yù)習(xí)導(dǎo)引 一 二 三 四 3 接種和培養(yǎng) 1 剝離花藥 消毒后的花蕾 要在無菌條件下除去萼片和花瓣 剝離花藥時 一是要注意盡量不損傷花藥 否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織 二是要徹底去除花絲 否則不利于愈傷組織或胚狀體的形成 2 接種花藥 剝離的花藥要立刻接種到培養(yǎng)基上 通常每瓶接種7 10個花藥 3 培養(yǎng) 利用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基 pH為5 8 溫度為25 左右 幼小植株形成后才需要光照 培養(yǎng)20 30d后 花藥開裂 長出愈傷組織或形成胚狀體 前者還要轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上 以便進(jìn)一步分化出再生植株 后者要盡快將幼小植株分開并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上 4 通過愈傷組織形成的花粉植株 染色體組的數(shù)目常常會發(fā)生變化 因而需要作進(jìn)一步的鑒定和篩選 知識梳理 典例透析 一 二 三 一 花粉發(fā)育過程中的 四分體時期 和減數(shù)分裂過程中的 四分體 的辨析被子植物花粉發(fā)育過程中的 四分體 是指由一個花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生的連在一起的4個單倍體細(xì)胞 4個小孢子 而減數(shù)分裂過程中的 四分體 是指在聯(lián)會狀態(tài)下的一對同源染色體 因為含有四條染色單體 所以叫做 四分體 知識梳理 典例透析 一 二 三 二 培養(yǎng)植株的鑒定和篩選在花藥培養(yǎng)中 通過愈傷組織形成的花粉植株 染色體組的數(shù)目常常會發(fā)生變化 有些植株是由花藥發(fā)育形成的單倍體花粉植株 有些植株是由花藥壁細(xì)胞發(fā)育形成的二倍體花藥壁植株 還有的植株是營養(yǎng)核和生殖核融合后發(fā)育成的 因此需對培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩選 知識梳理 典例透析 一 二 三 三 花藥培養(yǎng)與單倍體育種1 花藥培養(yǎng) 1 過程 材料的選取 選單核期花粉 常用醋酸洋紅法和焙花青 鉻礬法鏡檢 材料的消毒 用體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0 1 的氯化汞溶液消毒 接種和培養(yǎng) 形成幼苗前不需要光照 形成幼苗后需要光照 知識梳理 典例透析 一 二 三 2 流程解讀 進(jìn)行組織培養(yǎng)時要配備三種培養(yǎng)基 期間進(jìn)行兩次轉(zhuǎn)接 a 脫分化培養(yǎng)基 生長素與細(xì)胞分裂素比例適中 促進(jìn)愈傷組織的形成 b 生芽培養(yǎng)基 生長素與細(xì)胞分裂素比值較低 促進(jìn)芽的分化 抑制根的形成 c 生根培養(yǎng)基 生長素與細(xì)胞分裂素比值較高 促進(jìn)根的分化 抑制芽的形成 若培養(yǎng)的外植體含有葉綠體 則培養(yǎng)過程中要提供充足光照 使其進(jìn)行光合作用 若培養(yǎng)的組織或細(xì)胞不含葉綠體 則培養(yǎng)過程中不進(jìn)行光照 以免光線對其造成損傷 知識梳理 典例透析 一 二 三 2 單倍體育種的過程 1 在花藥培養(yǎng)的基礎(chǔ)上 用秋水仙素處理單倍體幼苗 2 染色體加倍 重新恢復(fù)為二倍體 因為此二倍體是由單倍體染色體加倍后發(fā)育而來的 所以是純合子 不會發(fā)生性狀分離 知識梳理 典例透析 一 二 三 3 比較花藥培養(yǎng)與單倍體育種示意圖 盡管花藥離體培養(yǎng)是單倍體育種的首要環(huán)節(jié) 但二者的步驟和結(jié)果是不同的 應(yīng)注意看清楚是培養(yǎng)過程還是育種過程 花藥離體培養(yǎng)只涉及上圖中的 而單倍體育種則包括 知識梳理 典例透析 題型一 題型二 題型三 題型一花粉的發(fā)育 例題1 關(guān)于被子植物花粉的形成 下列說法正確的是 A 花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的B 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時期 單核期和雙核期C 花粉發(fā)育經(jīng)歷雙核期時 兩個細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)并不完全相同D 花粉母細(xì)胞形成花粉粒中精子的過程是一系列減數(shù)分裂的過程解析 花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的 其發(fā)育經(jīng)歷了小孢子四分體時期 單核期和雙核期等階段 雙核期后形成的兩個細(xì)胞是由一個細(xì)胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的 兩個細(xì)胞的細(xì)胞核具有完全相同的遺傳物質(zhì) 花粉粒內(nèi)的生殖細(xì)胞再經(jīng)有絲分裂得到2個精子 答案 B 知識梳理 典例透析 題型一 題型二 題型三 題型二花粉的選擇 例題2 選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素之一 下列說法正確的是 A 任何時期的花粉都可經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體B 對所有植物來說 在單核期 即細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期 花藥培養(yǎng)成功率最高C 對一般植物而言 單核期時花藥培養(yǎng)成功率最高D 為挑選到單核期的花藥 通常選擇部分開放的花朵解析 花粉的發(fā)育時期對花藥培養(yǎng)的成功率有重要影響 一般來說 在單核期 即細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期 花藥培養(yǎng)成功率最高 但并不是所有的植物都是如此 為挑選到單核期的花藥 通常選用完全未開放的花蕾 答案 C 知識梳理 典例透析 題型一 題型二 題型三 反思領(lǐng)悟月季花藥培養(yǎng)的難點之一是材料的選擇 材料選擇應(yīng)遵從以下幾點 從花藥來看 應(yīng)當(dāng)選擇初花期的 從花粉來看 應(yīng)當(dāng)選擇單核期的 從花蕾來看 應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的 檢測花粉發(fā)育時期的實驗方法 用顯微鏡觀察已染色的花粉樣品臨時裝片 觀察細(xì)胞核的位置 以確定花粉發(fā)育的時期 知識梳理 典例透析 題型一 題型二 題型三 題型三花藥培養(yǎng)的過程 例題3 下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)的說法 錯誤的是 A 對材料的選擇最常用的方法是焙花青 鉻礬法 這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色B 材料消毒時 用氯化汞溶液或次氯酸鈣溶液浸泡后 需要用無菌水沖洗C 接種花藥后一段時間內(nèi)不需要光照 但幼小植株形成后需要光照D 接種的花藥長出愈傷組織或胚狀體后 要適時轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基 以便進(jìn)一步分化成再生植株解析 對材料的選擇最常用的方法是醋酸洋紅法 答案 A 知識梳理 典例透析 題型一 題型二 題型三 反思領(lǐng)悟確定花粉發(fā)育時期的兩種方法 1 最常用的方法 醋酸洋紅法 花藥 載玻片上 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 的醋酸洋紅 用鑷柄將花藥搗碎 蓋上蓋玻片 鏡檢 花粉細(xì)胞核被染成紅色 2 某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色 需采用焙花青 鉻礬法 花藥在卡諾氏固定液中固定20min 取出 置于載玻片上 焙花青 鉻礬溶液染色 蓋上蓋玻片 鏡檢 花粉細(xì)胞核被染成藍(lán)黑色- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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