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考綱要求 1 微生物的分離和培養(yǎng) 2 果酒 果醋和腐乳的制作 3 酶在洗滌方面的應(yīng)用 4 制備和應(yīng)用固定化酵母細(xì)胞 5 DNA的粗提取與鑒定 滅菌 尿素 稀釋涂布平板 纖維素 剛果紅染色 化學(xué) 結(jié)合法 物理和化學(xué)性質(zhì) 二苯胺 1 2014 江蘇單科 24 某同學(xué)設(shè)計(jì)了右圖所示的發(fā)酵裝置 下列有關(guān)敘述正確的是 多選 A 該裝置可阻止空氣進(jìn)入 用于果酒發(fā)酵B 該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出 考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 典例引領(lǐng) C 去除彎管中的水 該裝置可滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D 去除彎管中的水后 該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似解析該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進(jìn)入 能用于果酒發(fā)酵 A正確 果酒發(fā)酵產(chǎn)生的CO2可溶解在彎管的水中 進(jìn)一步通過水排出 B正確 醋酸菌是好氧菌 因沒有通入無菌空氣 去除彎管中的水后也不能滿足底層發(fā)酵液中醋酸菌的呼吸需氧量 C錯(cuò)誤 去除彎管中的水后 該裝置的彎管部分也能防止空氣中的微生物進(jìn)入 與巴斯德的鵝頸瓶作用類似 D正確 答案ABD 2 2014 全國課標(biāo) 39 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解 回答下列問題 1 分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶 該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶 其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 2 在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅 CR 時(shí) CR可與纖維素形成 色復(fù)合物 用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí) 培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 3 為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落 某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲 乙兩種培養(yǎng)基 成分見下表 注 表示有 表示無 據(jù)表判斷 培養(yǎng)基甲 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 培養(yǎng)基乙 填 能 或 不能 用于分離和鑒別纖維素分解菌 原因是 解析 1 纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物 是含量最豐富的多糖類物質(zhì) 纖維素能被土壤中某些微生物分解利用 如下圖 2 剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物 當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后 紅色復(fù)合物無法形成 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌 3 分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 且需以纖維素為唯一碳源 答案 1 纖維二糖葡萄糖 2 紅透明圈 3 不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素 不會(huì)形成CR 纖維素紅色復(fù)合物 即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 3 臨床使用抗生素前 有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)時(shí) 首先要從病人身上獲取少量樣本 然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作 以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性 回答下列問題 1 為了從樣本中獲取致病菌單菌落 可用 法或 法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面 經(jīng)過選擇培養(yǎng) 鑒別等步驟獲得 2 取該單菌落適當(dāng)稀釋 用 法接種于固體培養(yǎng)基表面 在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h 使其均勻生長 布滿平板 3 為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性 將分別含有A B C D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置 培養(yǎng)一段時(shí)間后 含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈 說明該致病菌對(duì)抗生素A 含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈 說明該致病菌對(duì)抗生素B 含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小 說明 含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小 且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落 在排除雜菌污染的情況下 此菌落很可能是抗生素D的 4 根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果 為達(dá)到抗菌目的 最好應(yīng)選用抗生素 解析本題考查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷 1 在微生物的培養(yǎng)過程中 常用來分離微生物的方法是稀釋涂布 平板 法或平板劃線法 2 為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布 一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上 3 在抗藥性檢驗(yàn)過程中 如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈 說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌生長 透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強(qiáng)弱 據(jù)此可判斷A B C抗菌能力強(qiáng)弱依次是A C B D的透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落 說明該菌落對(duì)此種抗生素具有耐藥性 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抗生素A對(duì)該致病菌的抗菌效果最好 答案 1 劃線稀釋涂布 平板 或涂布 2 涂布 3 敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱耐藥菌 4 A 1 微生物的培養(yǎng)與分離技術(shù) 1 微生物培養(yǎng)中的無菌操作技術(shù) 常用消毒3種方法 消毒法 巴氏消毒法及化學(xué)藥劑消毒法 常用滅菌3種方法滅菌 接種環(huán) 接種針等金屬器具 滅菌 主要針對(duì)玻璃器皿等 滅菌 主要針對(duì)等 煮沸 灼燒 干熱 高壓蒸汽 培養(yǎng)基 2 培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù) 稱量 滅菌 3 篩選目的微生物的原理 原理 人為提供有利于目的菌株生長的條件 包括營養(yǎng) 溫度 pH等 同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長 因此 可以通過配制選擇培養(yǎng)基 控制培養(yǎng)條件等選擇目的微生物 實(shí)例 培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源可篩選到尿素細(xì)菌 培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源 可篩選到纖維素分解菌 2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1 制作果酒 果醋 腐乳 菌種的比較 2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)必須控制的發(fā)酵條件 發(fā)酵過程都需要器材消毒 滅菌和操作過程無菌操作 加入抑制雜菌繁殖的物質(zhì) 如酒精 香辛料等 控制發(fā)酵溫度 pH 氧氣濃度和發(fā)酵時(shí)間 1 某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理 接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2013 江蘇卷 T18C 2 用稀釋涂布平板法培養(yǎng)計(jì)數(shù) 應(yīng)選擇有30 300菌落數(shù)的平板 2015 四川卷 3D 3 純化菌種時(shí) 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即平板劃線法和稀釋涂布平板法 2011 新課標(biāo)全國卷 T39 2 4 在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時(shí)間可延長 2012 江蘇 21A 錯(cuò)混診斷 5 在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí) 讓發(fā)酵裝置接受光照并放在45 處 2010 北京 1AD 6 與果醋 果酒制作相比 腐乳的制作所需要的適宜溫度最高 所用菌種為乳酸菌 2011 江蘇 3AC 7 在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與 所用豆腐的含水量為70 左右 水分過多腐乳不易成形 江蘇 17AB改編 答案 1 2 3 4 5 6 7 提示 1 培養(yǎng)微生物不必在光照條件下 5 制作葡萄酒不需光照且溫度為18 25 6 腐乳制作所需菌種為毛霉 果醋制作所需溫度最高 題組1微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 1 2015 江蘇卷 19 做 微生物的分離與培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)時(shí) 下列敘述正確的是 A 高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí) 打開放氣閥使壓力表指針回到零后 開啟鍋蓋B 倒平板時(shí) 應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊 以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C 為了防止污染 接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D 用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí) 應(yīng)標(biāo)記在皿底上 解析A項(xiàng)錯(cuò) 高壓滅菌加熱結(jié)束后 讓其自然冷卻后再慢慢打開排氣閥以排除余氣 然后才能開蓋取物 B項(xiàng)錯(cuò) 倒平板時(shí)左手拿培養(yǎng)皿 右手拿錐形瓶 左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙 倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋 C項(xiàng)錯(cuò) 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 D項(xiàng)正確 皿底的標(biāo)記不會(huì)因?yàn)樯w子混淆而混淆 答案D 2 2014 四川卷 10 有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑 長期使用會(huì)污染環(huán)境 研究發(fā)現(xiàn) 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲 乙所示 1 微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源 水 四類 該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源 其原因是 2 與微生物培養(yǎng)基相比 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和 這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成 保存?zhèn)溆?3 純化菌株時(shí) 通常使用的劃線工具是 劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后 第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌 第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落 其他劃線上有菌落 造成劃線無菌落可能的操作失誤有 4 為探究苯磺隆的降解機(jī)制 將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心 取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn) 該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是 該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理 為什么 答案 1 氮源和無機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖 2 細(xì)胞分裂素母液 3 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻 劃線未從第一區(qū)域末端開始 4 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理 缺少空白對(duì)照 1 分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)基 因?yàn)榫渲荒茉诠腆w培養(yǎng)基上形成 2 平板劃線法只適用于微生物的提純 不適合進(jìn)行計(jì)數(shù) 并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純 3 倒平板的溫度一般在50 左右適宜 溫度過高會(huì)燙手 過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固 4 平板需倒置 這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā) 又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成培養(yǎng)基污染 題組2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1 2015 江蘇卷 17 關(guān)于 腐乳的制作 實(shí)驗(yàn) 下列敘述錯(cuò)誤的是 A 將腐乳坯堆積起來會(huì)導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高 影響毛霉生長B 腐乳坯若被細(xì)菌污染 則腐乳坯表面會(huì)出現(xiàn)黏性物C 勤向腐乳坯表面噴水 有利于毛霉菌絲的生長D 裝壇階段加入料酒 可有效防止雜菌污染 解析A項(xiàng)對(duì) 將腐乳坯堆積起來會(huì)導(dǎo)致微生物大量繁殖 堆內(nèi)溫度升高 影響毛霉生長 B項(xiàng)對(duì) 正常情況下毛霉等菌種 會(huì)使豆腐表面長出一層菌絲 被細(xì)菌污染 腐乳坯表面會(huì)出現(xiàn)黏性物 C項(xiàng)錯(cuò) 適于做腐乳的豆腐含水量為70 左右 適于毛霉菌絲生長 再加水不利于腐乳成型 D項(xiàng)對(duì) 加入料酒 可抑制雜菌生長 答案C 2 2015 江蘇卷 24 下圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖 下列敘述錯(cuò)誤的是 多選 A 發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生速率越來越快B 集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2C 發(fā)酵過程中酵母種群呈 J 型增長D 若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜 最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣 解析A項(xiàng)錯(cuò) 發(fā)酵后期 底物減少 酒精濃度增加等因素 都會(huì)造成酒精產(chǎn)生速率減慢 B項(xiàng)錯(cuò) 發(fā)酵初期 由于發(fā)酵瓶中有氧氣 酵母菌能進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳 C項(xiàng)錯(cuò) 酵母菌種群不呈 J型 增長 D項(xiàng)對(duì) 發(fā)酵瓶漏氣 會(huì)使醋酸菌大量繁殖而形成表面觀察到的菌膜 答案ABC 3 根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí) 回答下列問題 1 果酒的制作 制作果酒時(shí) 發(fā)酵瓶可用體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精進(jìn)行 填 消毒 或 滅菌 從微生物培養(yǎng)的角度分析 果汁能夠?yàn)橹谱鞴扑玫慕湍妇峁┧?和無機(jī)鹽 2 果醋的制作 制作果醋所用的微生物只有當(dāng) 充足時(shí) 才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng) 在制作果醋的過程中 要將溫度嚴(yán)格控制在 3 腐乳的制作 腐乳的制作有多種微生物參與 其中起主要作用的是 在制作腐乳的過程中 加鹽和加酒所發(fā)揮的相同作用是 答案 1 消毒 碳源氮源 2 氧氣 30 35 3 毛霉 抑制微生物的生長 避免豆腐塊腐敗變質(zhì) 果酒和果醋發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)思路 酵母菌繁殖需要氧氣 醋酸菌是好氧細(xì)菌 則果酒制作前期和果醋制作整個(gè)過程都需要氧氣 酵母菌產(chǎn)生酒精時(shí)是厭氧的 則在充氣口處應(yīng)該設(shè)置開關(guān) 發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2 需要設(shè)置排氣口 為了防止空氣中微生物污染 排氣口應(yīng)該連接一個(gè)長而彎曲的膠管 為便于取樣及監(jiān)測(cè)發(fā)酵情況 需要設(shè)置出料口 1 2014 江蘇高考 18 下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述 正確的是 A 高溫易使酶失活 因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好B 洗衣粉中表面活性劑對(duì)堿性蛋白酶活性有一定的促進(jìn)作用C 在pH低于7 0的自來水中 堿性蛋白酶依然能起作用D 洗衣粉中酶主要是通過快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用 考點(diǎn)二酶的應(yīng)用 典例引領(lǐng) 解析加酶洗衣粉中的酶在水溫45 60 時(shí) 能充分發(fā)揮洗滌作用 水溫高于60 時(shí) 堿性蛋白酶要失去活力 水溫低于15 時(shí) 酶的活性迅速下降 影響洗滌效果 A項(xiàng)錯(cuò)誤 表面活性劑能影響堿性蛋白酶活性 還會(huì)使酶失活 B項(xiàng)錯(cuò)誤 堿性蛋白酶適合的pH值為6 0 8 5 C項(xiàng)正確 蛋白質(zhì)是衣物上最普遍存在的污垢 而且是最難被表面活性劑和其他助洗劑所去除的 蛋白酶能把衣物上蛋白質(zhì)先分解成可溶性的肽 然后再分解成氨基酸 從而很容易被洗去 D項(xiàng)錯(cuò)誤 答案C 2 2015 江蘇單科 11 下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述 錯(cuò)誤的是 A 固定化酶的主要目的是實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用B 溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素C 固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物D 凝膠與被包埋細(xì)胞之間不是通過共價(jià)鍵結(jié)合解析A項(xiàng) 固定化酶制作的目的是能夠順利從發(fā)酵產(chǎn)物中把酶分離出來 能夠使酶反復(fù)使用 B項(xiàng) 溶解氧交換受阻會(huì)影響細(xì)胞呼吸 是固定化細(xì)胞應(yīng)用的重要限制因素 C項(xiàng) 固定化細(xì)胞常用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物如固定化酵母細(xì)胞用于生產(chǎn)酒精 D項(xiàng) 將細(xì)胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細(xì)胞 細(xì)胞并不與凝膠通過共價(jià)鍵結(jié)合 B 3 2013 江蘇單科 6 下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述 正確的是 A 可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞B 反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化酶的活性沒有影響C 葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不同D 固定化細(xì)胞可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)解析本題考查固定化酶和固定化細(xì)胞的相關(guān)知識(shí) 可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞 有些反應(yīng)產(chǎn)物可與相應(yīng)酶結(jié)合 進(jìn)而影響固定化酶的活性 葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不變 固定化細(xì)胞固定的是一系列酶 催化一系列反應(yīng) 不能催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng) A 1 制備固定化酵母細(xì)胞固定酵母細(xì)胞的方法 包埋法 步驟如下 1 酵母細(xì)胞的活化 酵母菌吸水 由休眠狀態(tài)恢復(fù)為正常狀態(tài) 2 配制CaCl2溶液 CaCl2溶液用于增強(qiáng)凝膠珠的強(qiáng)度 4 海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合 5 固定化酵母細(xì)胞 將海藻酸鈉酵母細(xì)胞混合液滴加到CaCl2溶液中 2 探尋在酶的實(shí)驗(yàn)探究中應(yīng)注意的問題 1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵循 和 兩大原則 嚴(yán)格控制 2 探究不同溫度 或pH 對(duì)酶活性的影響時(shí) 作為自變量 通常通過設(shè)置 來確定最適值 最適值是通過比較相同時(shí)間內(nèi)獲得的 來確定的 3 探究最適溫度時(shí) 為無關(guān)變量 探究最適pH時(shí) 溫度最好為 4 探討加酶洗衣粉的最適溫度要根據(jù)生活中的實(shí)際情況 合理設(shè)置 5 在使用加酶洗衣粉時(shí)不但要考慮最佳洗滌效果條件 還要考慮到酶的 和 的問題 3 果膠酶可以提高果汁的出汁率 還可以提高果汁的澄清度 單一變量 對(duì)照 無關(guān)變量 溫度 或pH 合理的梯度 產(chǎn)量或效果 pH 最適溫度 溫度梯度 專一性 洗滌成本 1 用果膠酶澄清果汁時(shí) 溫度越低澄清速度越快 2015 江蘇卷 7C 2 洗衣時(shí) 加少許白醋能增強(qiáng)加酶洗衣粉中酶的活性 2015 江蘇卷 7D 3 下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述 判斷正誤 2015 江蘇卷 11 固定化酶的主要目的是實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用 溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素 錯(cuò)混診斷 固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物 凝膠與被包埋細(xì)胞之間不是通過共價(jià)鍵結(jié)合 4 嫩肉粉是以蛋白酶為主要成分的食品添加劑 就酶的作用特點(diǎn)而言 室溫下先與肉片混勻放置一段時(shí)間再炒熟的使用方法最佳 廣東文基 72D改編 5 用含蛋白酶的洗衣粉去除油漬 效果比其他類型的加酶洗衣粉好 2010 江蘇 3D 6 棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進(jìn)行洗滌 2011 江蘇 15C 答案 1 2 3 4 5 6 提示 1 在一定范圍內(nèi) 溫度越低 酶活性越低 果汁中果膠的分解速度越慢 2 洗衣粉中的堿性蛋白酶在弱堿性條件下活性最強(qiáng) 3 溶解氧交換受阻會(huì)影響細(xì)胞呼吸 是固定化細(xì)胞而不是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素 5 由于酶具專一性 蛋白酶不宜去除油漬 6 洗滌棉織物也可使用添加纖維素酶的洗衣粉 它可使棉織物更柔軟 題組1果膠酶及其在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用 某生物興趣小組為探究不同濃度果膠酶對(duì)澄清蘋果汁出汁率的影響 進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)步驟 制備蘋果汁 將蘋果洗凈 切成小塊 用榨汁機(jī)打碎成蘋果汁勻漿 加熱蘋果汁到100 再冷卻至50 左右 配制不同濃度的酶液 取5支10g L的試管 依次編為2 6號(hào) 分別加入不同量的質(zhì)量濃度為10g L果膠酶溶液 再分別加入蘋果酸定容至10g L 獲得質(zhì)量濃度分別為2g L 4g L 6g L 8g L 10g L的果膠酶溶液備用 降解蘋果汁 如下圖 沉淀 向上述6只燒杯中添加明膠 活性炭等物質(zhì)攪拌處理 充分混勻后靜置 分別過濾 記錄并處理結(jié)果 用量筒測(cè)量澄清濾液 即蘋果汁 的體積記入表格 并計(jì)算出汁率 請(qǐng)回答下列問題 1 果膠酶能提高蘋果的出汁率并使果汁澄清的原因是 2 步驟 中 蘋果汁先加熱到100 的目的是 3 步驟 中 在2 6號(hào)試管中加入10g L果膠酶溶液的量分別是 步驟 中 在1號(hào)燒杯中加入1mL 4 根據(jù)預(yù)期結(jié)果 請(qǐng)繪制出澄清蘋果汁出汁率與果膠酶濃度之間大致的關(guān)系曲線 并在坐標(biāo)軸上標(biāo)出澄清蘋果汁最高出汁率所需的果膠酶最佳濃度 解析 1 果膠酶能分解果膠 瓦解細(xì)胞壁 從而提高出汁率并使果汁澄清 2 將蘋果汁加熱到100 可使蘋果中原有酶失活 防止對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾 3 欲獲得xg L的濃度 應(yīng)加入xmL果膠酶量 在1號(hào)燒杯中加入1mL蘋果酸作為對(duì)照 4 出汁率曲線起點(diǎn)于縱軸某點(diǎn) 在一定范圍內(nèi)隨果膠酶濃度升高 出汁率上升 達(dá)飽和點(diǎn)后穩(wěn)定 答案 1 果膠酶能分解果膠 瓦解細(xì)胞壁 2 使蘋果中的酶失活 防止對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾 3 2mL 4mL 6mL 8mL 10mL蘋果酸 4 如圖 注意坐標(biāo)軸的含義 曲線變化趨勢(shì) 起點(diǎn) 最佳濃度 在混合蘋果泥和果膠酶之前 要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中 每組進(jìn)行同溫 或同pH 處理 其目的是保證底物和酶在混合時(shí)的溫度 或pH 相同 避免蘋果泥或果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度 或pH 從而影響果膠酶的活性 題組2探究加酶洗衣粉的洗滌效果 1 2012 江蘇單科 16 下列關(guān)于 探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果 的敘述 合理的是 A 先用熱水溶解洗衣粉 再將水溫調(diào)節(jié)到最適溫度B 實(shí)驗(yàn)的觀察指標(biāo)可以是相同洗滌時(shí)間內(nèi)污漬的殘留程度C 相同pH時(shí)加酶洗衣粉洗滌效果好于普通洗衣粉D 衣物質(zhì)地和洗衣粉用量不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 解析本實(shí)驗(yàn)的自變量是洗衣粉的種類 因變量是洗滌效果 無關(guān)變量有溫度 pH 衣物質(zhì)地 因?yàn)槊妇哂袑Ｒ恍?洗衣粉的用量等 探究實(shí)驗(yàn)中除自變量外應(yīng)給予相同且適宜的其他條件 才能排除無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾 根據(jù)上述分析 符合題意的是B 答案B 2 加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉 請(qǐng)回答下列問題 1 由圖推知 該實(shí)驗(yàn)的目的是 50 時(shí)加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是 2 下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗滌效果的實(shí)驗(yàn)記錄 請(qǐng)據(jù)表回答 該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)體現(xiàn)了 原則 若實(shí)驗(yàn)組1號(hào)洗凈所需時(shí)間接近7min 最可能的原因是 3 下列衣料不適宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗滌的有 棉織品 毛織品 腈綸織品 蠶絲織品 4 根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果 寫出兩項(xiàng)提高加酶洗衣粉效果的措施 答案 1 探究溫度 堿性蛋白酶含量對(duì)去污力的影響0 6 2 對(duì)照 單一變量 酶失活 3 4 用溫水浸泡 延長浸泡時(shí)間 增加洗衣粉的用量等 寫出兩項(xiàng)合理答案方可 1 一般說來 絲綢類的衣物不可以使用加酶洗衣粉洗滌 是因?yàn)榈鞍酌笗?huì)水解蛋白質(zhì)類的絲綢 2 酶的催化作用需要適宜的溫度 用溫水浸泡衣物可以縮短衣物的浸泡時(shí)間 加快洗滌 3 人體皮膚細(xì)胞有蛋白質(zhì) 使用加酶洗衣粉后如不徹底清洗雙手 就會(huì)使手的皮膚受到腐蝕 而使人患過敏性皮炎 濕疹等 4 加酶洗衣粉的酶制劑不含肽酶 因?yàn)殡谋旧硪兹苡谒?題組3固定化酶及其應(yīng)用 1 2015 江蘇卷 20 下圖為制備人工種子部分流程示意圖 下列敘述正確的是 A 胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織B 該過程以海藻酸鈉作為營養(yǎng)成分 以CaCl2溶液作為凝固劑C 可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖 為胚狀體提供碳源D 包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣 有利于人工種子的儲(chǔ)藏 解析本題主要考查人工種子的制備 難度適中 A項(xiàng)錯(cuò)誤 胚狀體是愈傷組織再分化得到的 B項(xiàng)錯(cuò)誤 海藻酸鈉是凝固劑 C項(xiàng)正確 在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖 不僅為胚狀體提供能量 而且是培養(yǎng)物滲透壓的主要調(diào)節(jié)者 D項(xiàng)錯(cuò)誤 凝膠珠具有空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) 不隔絕空氣 答案C 2 2012 江蘇單科 17 下列關(guān)于酶和固定化酵母細(xì)胞的研究與應(yīng)用的敘述 錯(cuò)誤的是 A 從酶的固定方式看 吸附法比化學(xué)結(jié)合法對(duì)酶活性影響小B 作為消化酶使用時(shí) 蛋白酶制劑以口服方式給藥C 尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶 可以反復(fù)使用D 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗 目的是洗去CaCl2和雜菌 解析酶的固定方式有包埋法 化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法 物理吸附法是利用吸附劑本身的表面張力對(duì)附近的分子產(chǎn)生吸附 與化學(xué)結(jié)合法相比 不會(huì)使被吸附物質(zhì)的性質(zhì)發(fā)生改變 所以吸附法對(duì)酶活性影響較小 A項(xiàng)說法正確 消化酶在人體消化道內(nèi)發(fā)揮作用 蛋白酶制劑一般在最外面加上糖衣后通過口服方式給藥 B項(xiàng)說法正確 尿糖試紙是一種將葡萄糖氧化酶 過氧化氫酶和某種無色的化合物固定于濾紙上制成的酶試紙 不能反復(fù)利用 C項(xiàng)說法錯(cuò)誤 制作固定化酵母細(xì)胞時(shí) 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗的目的是洗去CaCl2和雜菌 防止凝膠珠硬度過大和雜菌污染 D項(xiàng)說法正確 答案C 1 酶的三種固定方法 化學(xué)交聯(lián)法 物理吸附法 包埋法 2 適用對(duì)象一般來講 酶更適合用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化 而細(xì)胞多采用包埋法固定化 這是因?yàn)閭€(gè)大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合 而個(gè)小的酶則易從包埋材料中漏出 1 2015 江蘇卷 25 圖1 2分別為 DNA的粗提取與鑒定 實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖 下列敘述正確的是 多選 考點(diǎn)三DNA的粗提取與鑒定 典例引領(lǐng) A 圖1 2中加入蒸餾水稀釋的目的相同B 圖1中完成過濾之后保留濾液C 圖2中完成過濾之后棄去濾液D 在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì) 解析本題主要考查 DNA的粗提取與鑒定 實(shí)驗(yàn) 意在考查考生理解能力和實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?難度較小 A項(xiàng)錯(cuò)誤 圖1 2中加入蒸餾水稀釋的目的分別是破碎細(xì)胞獲取含DNA的濾液 稀釋NaCl溶液 析出DNA B項(xiàng)正確 圖1過濾之后保留濾液 因?yàn)V液含DNA C項(xiàng)正確 圖2過濾之后棄去濾液 因DNA已析出 D項(xiàng)正確 嫩肉粉中的蛋白酶可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行水解 答案BCD 2 2014 江蘇卷 16 下列關(guān)于 DNA的粗提取與鑒定 實(shí)驗(yàn)敘述 錯(cuò)誤的是 A 酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B DNA既溶于2mol LNaCl溶液也溶于蒸餾水C 向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?可見玻棒上有白色絮狀物D DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱 冷卻后變藍(lán) 解析理論上只要含DNA的生物材料都行 只是從操作難易程度上分 最好選擇容易操作的 所以酵母和菜花可作為提取DNA的材料 A正確 DNA在2mol LNaCl溶液和蒸餾水中都能溶解 只不過溶解度不同 B正確 向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?雞血細(xì)胞會(huì)破裂 DNA在蒸餾水中溶解度較大 不會(huì)析出 C錯(cuò)誤 DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱 冷卻后變藍(lán) D正確 答案C 3 2013 江蘇單科 4 某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn) 操作錯(cuò)誤的是 A 加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速 充分的研磨B 用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC 加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D 加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析破碎植物細(xì)胞時(shí) 加入洗滌劑后 動(dòng)作要輕緩 柔和 否則容易產(chǎn)生大量的泡沫 不利于后續(xù)步驟的操作 A錯(cuò)誤 答案A 1 DNA粗提取和鑒定的原理 1 DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 即2mol LNaCl可溶解DNA 0 14mol LNaCl可析出DNA 2 DNA不被蛋白酶水解 加入嫩肉粉 可將蛋白質(zhì)水解 得到DNA 3 DNA不溶于酒精 加入冷卻的體積分?jǐn)?shù)95 的酒精可析出DNA 除去雜質(zhì) 4 DNA可被二苯胺染成藍(lán)色 以此鑒定DNA 需沸水浴加熱 2 DNA的粗提取和鑒定方法 1 材料的選取 選用DNA含量相對(duì)較高的生物組織 2 破碎細(xì)胞 動(dòng)物的紅細(xì)胞 吸水破裂 植物細(xì)胞 加入洗滌劑 食鹽后研磨 3 除去雜質(zhì)的方法方法一 利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同 通過調(diào)節(jié) 除去溶于和不溶于NaCl溶液中的雜質(zhì) 方法二 利用DNA對(duì)酶的耐受性 直接在濾液中加入嫩肉粉 反應(yīng)10 15min 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解 而不會(huì)破壞 NaCl溶液的濃度 DNA 蛋白質(zhì) 方法三 利用DNA對(duì)高溫的耐受性 將濾液放在60 75 的恒溫水浴箱中保溫10 15min 使 變性沉淀而 分子還未變性 4 DNA的析出 向處理后的濾液中加入與濾液體積相等的 冷卻的酒精溶液 體積分?jǐn)?shù)為95 靜置2 3min 溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物 用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌 卷起絲狀物 5 DNA的鑒定 在沸水浴的條件下 DNA遇二苯胺會(huì)被染成 蛋白質(zhì) DNA 藍(lán)色 1 關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn) 請(qǐng)判斷正誤 2015 廣東卷 3 用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNA DNA溶液與二苯胺試劑混合 沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物 用甲基綠對(duì)人的口腔上皮細(xì)胞染色 細(xì)胞核呈綠色 細(xì)胞質(zhì)呈紅色 2 提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞 江蘇 23A 3 用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì) 江蘇 23B 錯(cuò)混診斷 答案 1 2 3 提示 1 兔的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核及各種細(xì)胞器 用甲基綠對(duì)人的口腔上皮細(xì)胞染色只能使細(xì)胞核呈綠色 不能使細(xì)胞質(zhì)呈紅色 2 提取植物細(xì)胞中的DNA不能用漲破法 題組DNA的粗提取與鑒定 1 2012 江蘇卷 18 下列關(guān)于 DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn) 的敘述 正確的是 A 洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C 常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取D 用玻棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少 解析洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜 但不能增加DNA的溶解度 A錯(cuò)誤 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴中變藍(lán) 不需要冷卻 B錯(cuò)誤 常溫下菜花勻漿中有些酶可破壞DNA 影響DNA的提取 C正確 用玻棒緩慢攪拌濾液并不影響DNA的含量 而在粗提取時(shí) 緩慢攪拌有利于DNA附著 D錯(cuò)誤 答案C 2 請(qǐng)回答下列關(guān)于DNA粗提取和鑒定的問題 1 DNA提取過程可以使用雞血或者菜花 使用雞血時(shí) 需在雞血中加入 目的是 在 中加入蒸餾水 目的是 2 使用菜花提取DNA時(shí) 需先研磨 研磨時(shí)可加入一定的洗滌劑和食鹽 其作用分別是 和 3 本實(shí)驗(yàn)中可用到嫩肉粉 起作用的是其中的 4 使用體積分?jǐn)?shù)為 的 酒精可使DNA析出 最后 使用 對(duì)DNA進(jìn)行鑒定 水浴加熱冷卻后溶液呈藍(lán)色 答案 1 檸檬酸鈉防止血液凝固雞血細(xì)胞液使雞血細(xì)胞破裂 2 使細(xì)胞膜破裂溶解DNA 3 蛋白酶 4 95 冷二苯胺試劑 DNA的粗提取與鑒定 實(shí)驗(yàn)和 血紅蛋白的提取與分離 實(shí)驗(yàn)中都常常用到紅細(xì)胞 但前者往往采用雞血細(xì)胞 后者一般采用哺乳動(dòng)物的血紅細(xì)胞 原因是雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富 材料易得 且極易吸水漲破 哺乳動(dòng)物成熟的血紅細(xì)胞中不含有細(xì)胞核和多種細(xì)胞器 其中的血紅蛋白含量豐富 適宜用于血紅蛋白的提取與分離實(shí)驗(yàn)